李基棕
- 作品数：100 被引量：160H指数：7
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技厅农业攻关项目江苏省农业科技自主创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- Bta-miR-222抑制CPIV3复制的分子机制研究
- 为探讨bta-miR-222 对山羊副流感病毒3 型(CPIV3)复制的影响及其机制.本研究将bta-miR-222 模拟体转染MDBK 细胞,接种CPIV3 病毒液,收集上清和细胞,测定病毒效价和干扰素(IFN)含量;...
- 李基棕钟纯燕肖芳毛立李文良孙敏刘茂军
- 山羊支原体肺炎的CT影像分析被引量：1
- 2021年
- 旨在研究羊感染肺炎支原体后胸部CT影像学特征。将20只山羊分为2组,对照组5只、试验组15只,试验组通过气管注射感染5 mL绵羊肺炎支原体(1×10^(7) CCU·mL^(-1))人工诱发山羊支原体肺炎,对照组注射等体积生理盐水。感染后观察两组羊的临床症状,在感染后第0、7、14、21、28天对两组羊胸部进行CT扫查,分析支原体肺炎的CT影像学特征。感染后第29天剖杀羊,观察肺部病理解剖变化。取病变组织制备石蜡切片,观察组织病理学变化。结果显示:试验组山羊感染肺炎支原体后表现出呼吸道感染症状,体温升高,咳嗽,流浆液性或脓性鼻液。胸部CT影像主要表现为片状磨玻璃密度影,网格状阴影,多见双侧肺叶病变,好发于右前叶,以间质性肺炎伴发支气管肺炎为主,其中,重症羊多见空气支气管征,个别羊见胸膜增厚影。对照组临床症状和胸部CT影像在感染前后未见明显差异和异常。综上表明,CT影像诊断技术有利于羊支原体肺炎的早期诊断,并有助于疾病转归的判断。
- 姜敏姚大伟田睿毛立史超颖李文良张纹纹李基棕杨蕾蕾孙敏杨德吉刘茂军
- 关键词：支原体肺炎计算机断层扫描
- 一种分泌CPIV3抗体的杂交瘤细胞株及ELISA试剂盒
- 本发明属于分子生物学领域，涉及一种分泌CPIV3抗体的杂交瘤细胞株及ELISA试剂盒。本发明使用的山羊副流感病毒3型CPIV3 免疫原是从临床分离的CPIV3 JS2013毒株，从建立的分泌 CPIV3 单克隆抗体的杂交...
- 毛立李文良江杰元杨蕾蕾郝飞李基棕张纹纹周天赐
- 抗病毒蛋白Viperin抑制猪瘟病毒在PK-15细胞上的复制被引量：1
- 2018年
- Viperin是一种抗病毒蛋白,具有广谱的抗病毒功能。为了研究猪源抗病毒蛋白Viperin对猪瘟病毒(CSFV)的抗病毒作用及机制,通过构建细胞系过表达或通过siRNA转染抑制Viperin表达,采用荧光定量RTPCR和病毒滴度测定检测CSFV增殖水平的变化;检测培养上清和细胞中病毒含量的变化趋势,评价其对病毒释放的影响;进而通过共聚焦试验和免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)试验检测Viperin与病毒E2蛋白的共定位与相互作用。与对照细胞相比,过表达Viperin蛋白可以显著抑制CSFV在PK-15细胞上的复制,在感染后24、48、72h,病毒基因水平和病毒滴度分别下降68.75%、83.61%、77.27%和68.75%、87.5%、80.39%。通过RNA干扰技术抑制Viperin在PK-Vi细胞中的表达后CSFV复制显著恢复(仍低于对照组)。培养上清和细胞中病毒含量均同等程度受到抑制,表明Viperin表达对病毒的释放没有影响。共聚焦试验证明Viperin蛋白与E2蛋白在细胞内存在共定位现象。免疫共沉淀试验证明Viperin蛋白与E2蛋白存在相互作用。该研究证实Viperin具有抗CSFV作用,该作用可能是通过与病毒E2蛋白相互作用实现的,这为CSFV与宿主免疫反应相互作用研究提供了理论基础。
- 李文良毛立邓加武郝飞李基棕杨蕾蕾张纹纹江杰元
- 关键词：猪瘟病毒抗病毒共定位相互作用
- 链球菌通用PCR检测方法的建立及应用被引量：12
- 2009年
- 为建立链球菌快速检测方法，根据链球菌延伸因子ERTu基因设计合成1对通用引物，对链球菌属及其他属细菌进行PCR检测。结果表明，所设计的通用引物对猪链球菌2型和无乳链球菌均能扩增出1条大小为197bp的特异性DNA条带，而对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希氏菌、枯草芽孢杆菌、绿脓杆菌、都柏林沙门氏菌和多杀性巴氏杆菌均呈阴性反应；经对PCR产物进行测序分析表明，扩增片段与GenBank上链球菌相应序列的同源性达90％～98％；对链球菌DNA样本不同稀释度的检测显示，该PCR的最低检出量可达0．1ng／mL；利用PCR检测方法对11株链球菌分离物进行检测，结果均能扩增出与预期大小相一致的目的条带，与传统生化鉴定结果符合率达到100％。这些结果表明，已成功建立了链球菌PCR检测方法，并可应用于临床链球菌的鉴定。
- 杜海燕李基棕周碧君王开功杨颖殷俊磊文明
- 关键词：链球菌PCR
- 制备猪源干扰素δ5的方法和猪源干扰素δ5的应用
- 本发明公开了制备猪源干扰素δ5的方法和猪源干扰素δ5的应用。制备猪源干扰素δ5的方法包括：步骤S1，利用预处理后的猪小肠上皮细胞IPEC‑J2总RNA通过RT‑PCR扩增获取包含猪源干扰素δ5基因的DNA片段；步骤S2，...
- 范宝超李彬宋诗颖张雪寒朱雪蛟周金柱赵永祥李基棕郭容利郭玮璐张雪
- 文献传递
- 山羊副流感病毒3型感染MDBK细胞的转录组分析被引量：1
- 2019年
- 本研究旨在探究山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染MDBK细胞后的转录组基因变化情况,丰富CPIV3转录组信息。取1MOI CPIV3JSHA2014-1病毒液感染MDBK细胞,设非感染正常细胞为对照,于24h后收获细胞,提取总RNA,利用Illumina HiSeqTM2500对感染组与对照组进行高通量测序,并用测序评估、基因注释等生物信息学方法进行分析。结果显示,差异表达基因共261个,其中表达上调140个,表达下调121个,经RT-qPCR方法验证8个差异表达的干扰素信号通路相关基因,结果与高通量测序一致。进一步GO分类结果显示,差异表达基因主要涉及细胞生物学进程、构成细胞的组分以及实现的分子功能三个方面,KEGG分析显示这些基因参与代谢、生物系统、细胞进程、基因信息进程和环境信息进程。本研究为深入探究CPIV3的致病机制奠定了基础。
- 钟纯燕李基棕毛立毛立李文良郝飞刘茂军刘茂军主性嵇辛勤杨蕾蕾杨蕾蕾
- 关键词：高通量测序转录组
- 山羊Viperin基因的克隆与真核表达载体的构建
- 2017年
- 本研究分离山羊外周血单核细胞,设计引物,采用RT-PCR方法扩增出Viperin基因完整阅读框。经BLAST分析,该基因的核苷酸序列和推导的氨基酸序列与GenBank中已有序列的最高同源性均为99%。同时将不同物种(山羊、猪、人、小鼠)的氨基酸序列进行比对分析,发现N端结构域在不同物种间是高变区。然后,将目的基因酶切克隆入真核表达载体pc DNA3.1中构建重组表达质粒。经PCR、酶切和测序鉴定正确的阳性质粒分别被命名为pcDNA-g Vi HA和pcDNA-HAg Vi。使用脂质体Lipofectamine 2 000将重组质粒转染BHK21细胞,使用HA抗体进行间接免疫荧光检测,发现重组蛋白均得到表达,荧光分布于细胞质中;Western-blot结果表明,两个质粒转染后均可检测到分子量约为43 ku的条带。使用内质网标志物Calnexin抗体进行共聚焦检测,发现表达的Viperin蛋白与内质网存在共定位。上述研究结果为进一步研究山羊Viperin的抗病毒作用及其机制奠定了基础。
- 李照耀李照耀李文良李基棕李基棕郝飞毛立周斌
- 关键词：真核表达亚细胞定位山羊
- 检测绵羊肺炎支原体和小反刍兽疫病毒的引物组合物、试剂盒及应用
- 本发明提供检测绵羊肺炎支原体和小反刍兽疫病毒的引物组合物、试剂盒及应用，属于生物技术和分子生物学领域。检测绵羊肺炎支原体和小反刍兽疫病毒的引物组合物，包括引物对A和引物对B，所述引物对A包括引物1和引物2，所述引物对B包...
- 李文良霍晓丽毛立杨蕾蕾刘茂军郝飞李基棕孙敏
- 河北省廊坊市牛主要病毒性腹泻病原感染状况检测及牛冠状病毒演化分析被引量：1
- 2024年
- 牛病毒性腹泻病原严重危害畜牧业生产,BVDV、BoAstV、BCoV、MRV、BKoV、BoNeV、BNoV、BRV、BToV被认为是引起牛群腹泻的病原,不仅如此,BVDV、BCoV和BToV除了能引起消化道症状外还能引起呼吸道症状,BVDV不仅能引起消化道和呼吸道症状,还会导致母牛生殖功能异常,这些疾病对畜牧业造成巨大的经济损失。为了解牛主要病毒性腹泻病原流行情况,本次试验通过PCR检测方法对我国河北地区323份腹泻牛粪样品进行常见9种病毒性牛腹泻病原进行检测。结果显示,BVDV阳性检出率1.85%(6/323)、BCoV阳性检出率14.24%(46/323)、BRV阳性检出率57.89%(187/323)、BoAstV阳性检出率0.31%(1/323)、BoNeV阳性检出率10.84%(35/323)、BNoV阳性检出率4.33%(14/323)、MRV阳性检出率2.48%(8/323)、BToV阳性检出率4.64%(15/323)、BKoV阳性检出率11.76%(38/323)。混合感染共有76份,占比23.53%(76/323)。HBLF2302株的全基因序列、S、HE、N、M和E基因进行同源性和遗传进化分析发现,HBLF2302与BCoV/NMG1/2022基因同源性最高,为GIIb亚型。基于氨基酸序列比对和HBLF2302的S蛋白三级结构预测发现,在S蛋白中157号位突变为157T,854号位点突变为854I。318V为独特突变,改变了与侧链残基的作用力,与631C形成氢键连接。并发现中国株区别于其它地区的GⅡb亚型,位于ORF1a区域有三个独特位点。本研究丰富了牛腹泻病原的流行病学数据,为牛腹泻病的防控奠定基础。
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- 关键词：病毒性腹泻牛冠状病毒流行病学调查
