李发武 作品数:23 被引量:106 H指数:5 供职机构: 东莞市人民医院 更多>> 发文基金: 东莞市科技局科研立项 广东省医学科学技术研究基金 广东省东莞市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
慢性重型乙型肝炎患者隐孢子虫感染的研究 2005年 目的探讨慢性重型肝炎与隐孢子虫感染的关系,为防治该病提供依据。方法用金胺-酚染色法(AA-P)和改良抗酸染色法(MAF)检测218例慢性重型乙型肝炎(慢重肝)患者和140例腹泻儿童粪便标本隐孢子虫卵囊,用PCR技术检测其DNA,并进行内切酶分析;对隐孢子虫感染影响因素进行分析。结果经AA-p、MAF和PCR检测,慢重肝患者隐孢子虫感染率分别为4.1%、3.2%和6.0%;腹泻儿童感染率为0.7%、0.7%和1.4%。PCR结果显示,慢重肝患者隐孢子虫感染率高于腹泻儿童;阳性患者腹泻史、动物接触史明显高于阴性患者,农村患者感染率高于城市患者。结论慢性重型肝炎患者对隐孢子虫的易感性增加,隐孢子虫感染是引起慢性重型肝炎患者腹泻和可能加重其病情的因素之一。 李发武 向选东 余治健关键词:隐孢子虫感染 乙型肝炎患者 慢性重型乙型肝炎 改良抗酸染色法 慢重肝 乙型肝炎病毒L60V、I97L变异核壳蛋白对HepG2细胞HLA-A表达的影响 被引量:3 2007年 目的研究L60V、I97L变异核壳蛋白对HepG2细胞HLA-A表达的影响。方法构建EGFP-野毒株核壳蛋白、L60V、I97L变异核壳蛋白表达载体,酶切和测序鉴定,克隆扩增后转染HepG2细胞,筛选阳性细胞株;荧光显微镜观察荧光蛋白的表达,Western blotting检测核壳蛋白的表达;RT-PCR检测HLA-A mRNA的表达,流式细胞术观察HLA-A蛋白的表达。结果成功建立了融合表达蛋白表达载体;荧光显微镜显示细胞内融合蛋白表达,Western blotting检测各细胞系蛋白表达的量基本相同;RT-PCR和流式细胞术结果表明,与野毒株相比I97L变异核壳蛋白表达细胞株HLA-A mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05),而L60V变异核壳蛋白表达细胞株则均明显下调(P<0.05)。结论L60V、I97L变异核壳蛋白对HepG2细胞HLA-A表达与野毒株核壳蛋白的影响不尽相同,其在功能上与野毒株核壳蛋白存在差异。 李发武 卢放根关键词:乙型肝炎病毒 自体MSCs修复肝脏的基础与临床应用研究 朱海鹏 彭亮 高志良 殷思纯 李发武 杜巍 王艳娜 谢婵 郑玉宝 吴福全 该成果利用自体MSCs的具有高度自我更新能力及其强大的多向分化能力和不存在免疫排斥反应的特征,将MSCs自体移植到肝衰竭患者的体内,进而分化为肝细胞,恢复肝功能。该研究首先发现:急性肝衰竭大鼠肝匀浆蛋白可以促进MSCs向...关键词:关键词:肝衰竭治疗 轮状病毒肠炎患儿血清免疫球蛋白和补体的动态变化及其临床意义 被引量:14 2006年 目的探讨轮状病毒(RV)肠炎患儿血清免疫球蛋白(Ig)和补体(C)的动态变化及其临床意义。方法利用透射比浊法对81例RV肠炎患儿及22例健康儿童进行血清IgG、IgA、IgM和补体C3、C4水平的测定。并进行了急性期和恢复期的动态观察。结果RV肠炎患儿血清IgG、IgA、IgM和C3水平均较对照组明显降低(P均<0.001)。恢复期血清IgG、IgA、IgM和C3水平均较急性期明显升高(P<0.01或<0.05),但IgG、IgA仍比对照组低(P<0.05)。C4急性期和恢复期与对照组比较均无明显变化(P>0.05)。结论RV肠炎患儿存在体液免疫抑制,免疫球蛋白和C3参与了RV肠炎的发病过程。 殷思纯 尹红 李发武 罗北京 梁沛杨 华莉 叶国华关键词:轮状病毒感染 肠炎 免疫球蛋白类 补体 慢性乙型肝炎患者干扰素-α治疗应答与干扰素-α/β受体启动子-408基因多态性的相关性 被引量:5 2013年 目的:探讨干扰素(IFN)-α/β受体启动子-408位点的单核苷酸多态性(SNP)与IFN疗效的关系。方法:应用聚合酶链反应(PCR)并基因测序法检测210例慢性乙型肝炎(CHB)患者(轻度38例、中度102例、重度70例)的IFN-α/β受体基因启动子-408位点的SNP。对210例中既往未用过IFN治疗的80例CHB患者给予聚乙二醇化干扰素α-2a or 2b(Peg-IFN-α-2a/2b)治疗48周。比较SNP与Peg-IFN疗效的关系。结果:80例患者中,IFN治疗持久应答(SR)33例(41.3%),非持久应答(NSR)47例(58.7%)。IFN-α/β受体启动子-408位点CT基因型患者干扰素治疗SR为65%(13/20),显著高于CC基因型患者干扰素治疗SR 29.5%(13/44),两者比较差异有显著性意义(χ2=7.166,P=0.007)。干扰素治疗SR组IFN-α/β-408位点等位基因C、T的频率与NSR组的频率比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:IFN-α/β受体启动子-408为CT杂合基因型的CHB患者可能对Pec-IFN治疗效果较好。 李发武 丁慧俊 王文琦 吴福全 殷思纯 李婉霞 何松美 王艳娜关键词:干扰素-Α Β受体 聚乙二醇化干扰素 单核苷酸多态性 抗血小板衍生生长因子小干扰RNA表达质粒构建及其对肝星状细胞的影响 2008年 目的研究靶向PDGF-B链的小干扰RNA(siRNA)对肝星状细胞(HSCs)细胞外基质分泌的影响。方法根据PDGF-B链序列设计合成siRNA序列,将siRNA序列插入pSilencer3.1-H1hygro质粒,酶切后测序鉴定;PDGF-B链siRNA表达质粒转染HSCs,潮霉素筛选阳性细胞株,RT-PCR和Westernblot分别检测PDGFmRNA和蛋白的表达;将各组筛选的阳性HSCs细胞株培养,MTT观察各组细胞增殖,放射免疫法检测HSCs细胞株上清液中透明质酸和Ⅲ型前胶原的表达。结果成功构建3种表达PDGF-B链siRNA表达质粒,RT-PCR和Westernblot结果表明各siRNA表达质粒阳性HSCs细胞PDGFmRNA和蛋白表达均有明显抑制。PDGF-B链siRNA表达质粒HSCs细胞组较对照组能明显降低HSCs增殖,下调透明质酸和Ⅲ型前胶原表达。结论靶向PDGF-B链的siRNA能降低HSCs增殖和分泌细胞外基质的能力,具有抗纤维化治疗的潜力。 李发武 卢放根 余治健 王文琦关键词:血小板衍生生长因子 小干扰RNA 肝星状细胞 人体隐孢子虫病分子流行病学研究进展 被引量:11 2004年 李发武 向选东关键词:人体隐孢子虫病 分子流行病学 隐孢子虫 不同聚乙二醇化干扰素治疗丙型肝炎病毒感染临床观察 被引量:2 2010年 目的评价聚乙二醇化干扰素α-2a或α-2b(PEG-IFNα-2a/α-2b)联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎病毒感染的疗效与副作用,以优化慢性丙型肝炎治疗策略、提高临床治愈率。方法 60例慢性丙型肝炎患者随机分为A组和B组各30例,分别给予PEG-IFNα-2a加利巴韦林(A组)和PEG-IFNα-2b加利巴韦林(B组)治疗48周,检测基线及治疗4周、l2周、48周及治疗结束后24周时的血清HCV-RNA水平,比较两组快速病毒学应答(RVR)率、早期病毒学应答(EVR)率、治疗终点病毒学应答(ETVR)率、持续病毒学应答(SVR)以及复发率与不良反应。结果 A组和B组RVR、EVR、ETVR、SVR、复发率分别为46.7%、63.3%、86.7%、80.0%、6.7%和40.0%、56.7%、80.0%、76.7%、3.3%,组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05),两组的安全性情况相似,未见严重的不良事件,总体耐受性好。结论两种现有的聚乙二醇化干扰素α-2a或α-2b联合利巴韦林治疗丙型肝炎病毒感染的持续病毒学应答率和耐受性没有显著差异。 李发武 王文琦 吴福全 殷思纯 丁慧俊 王艳娜关键词:慢性丙型肝炎 聚乙二醇化干扰素 乙型肝炎病毒核壳蛋白对HepG2细胞凋亡的影响 2009年 目的初步探讨乙型肝炎病毒野生型核壳蛋白和L60V、I97L变异核壳蛋白影响HepG2细胞凋亡的分子机制。方法将构建的野生型核壳蛋白融合表达载体(pEGFP-WT),L60V变异核壳蛋白(pEGFP-V60)和I97L变异核壳蛋白(pEGFP-L97)表达载体HepG2阳性细胞株复苏培养;Western blot检测各核壳蛋白表达;TNF-α、Act-D诱导各种HepG2细胞株凋亡,48h采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测NF-κB信号传导通路中IKK-α、IκB-α、NF-κBP65蛋白表达与caspase-8、caspase-3蛋白表达情况。结果Western blot检测pEGFP-WT组、pEGFP-V60组和pEGFP-L97组核壳蛋白表达基本相同;流式细胞术检测显示,与pEGFP-C1细胞株相比,48h时pEGFP-WT、pEGFP-V60和pEGFP-L97表达细胞株的细胞凋亡率均明显偏低(P<0.01);4组细胞株IKK-α、IκB-α、NF-κBP65蛋白表达水平无明显差异,而pEGFP-WT组caspase-8、caspase-3蛋白表达水平明显低于pEGFP-V60和pEGFP-L97组,且三组表达均明显低于pEGFP-C1组。结论乙型肝炎病毒野生型和L60V、I97L变异核壳蛋白影响HepG2细胞凋亡可能与核壳蛋白影响细胞内caspase-3,8表达有关。 李发武 卢放根 王文琦 吴福全关键词:乙型肝炎病毒 核壳蛋白 HEPG2细胞 凋亡 慢性乙型肝炎患者隐孢子虫感染的状况调查——附276例检测报告 被引量:5 2007年 目的:探讨慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者隐孢子虫感染的状况。方法:用金胺-酚染色法加改良抗酸染色法检测276例慢乙肝患者(慢乙肝组)和140例腹泻儿童(腹泻组)及140名健康体检者(对照组)的粪便标本有否隐孢子虫卵囊,阳性者先用PCR法检测隐孢子虫DNA,然后行内切酶分析确认;对隐孢子虫感染的影响因素进行分析。结果:轻、中、重度慢乙肝患者的隐孢子虫感染率分别为1.3%(1/76)、3.3%(3/90)和10.9%(12/110),后者的感染率明显高于前两者,均为P<0.05。慢乙肝组的隐孢子虫感染率(5.8%,16/276)显著高于腹泻组(1.4%,2/140,P=0.039)和对照组(0.7%,1/140,P=0.013)。慢乙肝组隐孢子虫阳性患者的腹泻发生率、动物接触史明显高于阴性者;而农村患者的隐孢子虫感染率亦明显高于城市患者,均为P<0.05。结论:慢乙肝患者的隐孢子虫感染率高于健康体检者和腹泻患儿,说明慢乙肝患者对隐孢子虫的易感性增加,临床应予以重视。 李发武 张小红 吴福全 陈万宁关键词:慢性乙型肝炎 隐孢子虫 改良抗酸染色法 聚合酶链反应