李丽珍
- 作品数：110 被引量：335H指数：9
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- 发文基金：国家自然科学基金山东省科技攻关计划山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- survivin反义寡核苷酸转染对人乳腺癌细胞系MCF-7生长及对长春瑞滨的增敏作用
- 2009年
- 目的探讨survivin反义寡核苷酸(ASODN)对乳腺癌细胞系MCF-7的诱导凋亡、抑制增殖和对长春瑞滨的增敏作用。方法采用脂质体介导survivin ASODN转染乳腺癌细胞系MCF-7,半定量RT-PCR方法检测survivin基因mRNA表达,Western blot方法检测survivin基因蛋白表达,AnnexinⅤ/PI双染法通过流式细胞仪检测细胞凋亡率变化,PI染色通过流式细胞仪检测细胞周期时相变化,MTT比色法检测转染细胞的生长抑制情况及对长春瑞滨的敏感性,电镜观察反义转染对乳腺癌细胞系MCF-7的凋亡诱导作用。结果survivin反义复合物下调MCF-7细胞的survivin mRNA和蛋白表达,并呈剂量依赖性。细胞周期被阻滞于G2/M期,细胞凋亡率明显升高(P<0.05),反义组细胞生长抑制率明显上升(P<0.05)。透射电镜下转染组细胞呈凋亡晚期变化。600 nmol/L反义转染组长春瑞滨的IC50值为(3.7±0.42)μg/mL,正常组为(7.1±0.68)μg/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。结论survivin反义寡核酸可有效下调MCF-7的survivin mRNA及蛋白表达水平,抑制增殖,诱导凋亡,并增强其对化疗药物长春瑞滨的敏感性。
- 扈煜黎莉李丽珍
- 关键词：乳腺肿瘤反义
- 慢性ITP患者血小板膜表面GPⅣ、GPⅤ特异性自身抗体的测定被引量：2
- 2005年
- 目的 :检测慢性ITP患者血小板膜表面GPⅣ、GPⅤ特异性自身抗体。方法 :应用改良直接MAIPA(单克隆抗体俘获血小板抗原技术 )检测血小板膜糖蛋白 (GPⅣ、GPⅤ )特异性自身抗体。结果 :慢性ITP患者血小板洗脱液中GPIV特异性和GPV特异性自身抗体的阳性率分别为 6. 3%和 4. 8%。结论 :血小板膜GPⅣ、GPⅤ分子是慢性ITP自身抗体的靶抗原 ,但多与GPⅡb
- 秦平侯明石艳孙建芝朱媛媛李丽珍彭军张茂宏
- 关键词：特发性血小板减少性紫癜血小板膜糖蛋白
- CD69与免疫功能的调节被引量：16
- 2004年
- CD6 9是一种Ⅱ型跨膜糖蛋白 ,属于C 型凝集素受体家族 ,也是NK细胞信号传导基因复合体家族的一员。CD6 9最早是在激活的淋巴细胞上被发现并加以描述 ,后来发现经诱导后它几乎可在所有的血细胞上表达。虽然CD6 9的生理性配体还未明确 ,但与CD6 9交联可产生细胞内信号传导及多种免疫反应 ,并对造血细胞的生物学功能有广泛的作用。而且研究发现CD6 9与血液系统疾病及免疫相关性疾病的发病机理有关。本文就CD6 9的结构、基因定位与调节 ,在不同细胞上的表达与功能以及CD6 9与疾病的关系作一综述。
- 申蓉李丽珍徐从高
- 关键词：CD69造血细胞免疫功能
- 大剂量地塞米松联合胸腺肽α1治疗ITP的疗效和细胞免疫机制的研究
- 目的:探讨大剂量地塞米松(HDDex)联合胸腺肽α1(Tα1)短程冲击治疗慢性特发性血小板减少性紫癜(chronicidiopathicthrombocytopenicprupura,ITP)的疗效及其细胞免疫机制.
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- 郭成山王琳李丽珍贺韦东侯明
- 关键词：特发性血小板减少性紫癜大剂量地塞米松胸腺肽细胞免疫
- 文献传递
- 急性白血病患者血清中VEGF水平与临床关系的研究被引量：6
- 2002年
- 目的:探讨急性白血病患者血清中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的水平与临床的关系及血管新生在急性白血病发病中的作用。方法:采用双抗体夹心ELISA方法测定急性白血病患者血清中的VEGF。结果:急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)患者血清中VEGF的水平与正常对照相比,明显增高(P=0.0003)。处于完全缓解期的ANLL患者仍有较高的VEGF分泌。急性淋巴细胞白血病(ALL)患者血清VEGF水平虽比正常对照增高,但无统计学意义(P=0.067),其分泌量与ANLL患者相比,明显减低(P=0.001)。结论:ANLL患者存在着血管新生,VEGF在其发病机制中可能起着重要的作用。
- 宋强张茂宏李丽珍赵川莉李杰李湘新
- 关键词：急性白血病血清血管内皮细胞生长因子新生血管化
- 人源化抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa抗体库的构建及临床价值被引量：3
- 2005年
- 目的筛选出抑制血小板聚集的血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa自身抗体,用噬菌体表面展示技术构建人源化抗血小板GPⅡb/Ⅲa单链噬菌体抗体(ScFv)库。方法用单克隆抗体特异性俘获血小板抗原(MAIPA)技术和血小板聚集试验筛选出血浆中含有抑制血小板聚集的血小板GPⅡb/Ⅲa自身抗体的特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者。从筛选出患者的外周血淋巴细胞中提取mRNA,用RT PCR扩增出人免疫球蛋白的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因片断,用DNA linker将VH和VL连接成ScFv基因片断。用限制性内切酶SfiⅠ/NotⅠ酶切ScFv后克隆到噬菌体载体pHEN2,然后转化大肠杆菌TG1。用辅助噬菌体M13K07援救转化后的TG1,产生ScFv。结果95例慢性ITP患者中41例(43.2%)血浆中抗GPⅡb/Ⅲa自身抗体阳性,强阳性患者5例(5.3%)。2例(2.1%)明显抑制血小板聚集功能。扩增出380～400bp大小的VH和VL基因,用连接肽(Gly4Ser)3成功地连接成约780bp大小的ScFv片断。ScFv克隆到pHEN2并转化大肠杆菌TG1后,形成2.1×107个克隆。用辅助噬菌体M13K07援救TG1后产生的噬菌体抗体库滴度为1.62×1010cfu/ml。结论少数抗GPⅡb/Ⅲa自身抗体可抑制血小板聚集功能。用噬菌体表面展示技术构建了ScFv库,可用来筛选人源化抗血小板GPⅡb/ⅢaScFv。
- 冀学斌侯明马道新李丽珍彭军王琳
- 关键词：人源化噬菌体表面展示技术RT-PCR扩增噬菌体M13血小板聚集试验
- 全反式维甲酸下调慢性阻塞性肺病患者NGAL、MMP-9/TIMP-1比率的研究被引量：5
- 2006年
- 目的探讨慢性阻塞性肺病(COPD)患者外周血中性粒细胞(PMN)中NGAL活性和血浆中MMP-9、TIMP-1与COPD病变的关系及体外ATRA干预后NGAL、MMP-9和TIMP-1的变化,以揭示ATRA逆转的作用机制。方法以30例COPD患者为实验组,20例发作期哮喘为阳性对照组,20例健康成年人为健康对照组,均进行肺功能检查,RT-PCR测定COPD组及哮喘组和健康对照组PMN中NGALmRNA的表达强度,ELISA测定其血浆MMP-9和TIMP-1的表达水平。COPD组PMN分为ATRA组和未干预对照组,RT-PCR测定细胞沉淀中NGALmRNA的表达强度,ELISA测定上清液中MMP-9和TIMP-1的表达水平。结果COPD组和哮喘组血浆中MMP-9、NGAL水平和MMP-9/TIMP-1比例显著高于未干预对照组(P<0.05);TIMP-1水平显著低于未干预对照组(P<0.05)。COPD组与哮喘组间有统计学意义(P<0.05)。COPD组患者肺功能与MMP-9和NGAL成负相关,与TIMP-1成正相关。ATRA干预后,COPD患者中MMP-9、NGAL水平较前下降,TIMP-1较前上升,MMP-9/TIMP-1比例降低。结论COPD组NGAL、MMP-9和MMP-9/TIMP-1摩尔比例升高,TIMP-1降低;可作为COPD患者PMN活性的诊断依据。ATRA通过下调MMP-9、NGAL,上调TIMP-1的表达,纠正MMP-9/TIMP-1失衡,可能对肺气肿的治疗提供新的途径。
- 陈明董亮于钦凤李丽珍许晓群
- 关键词：慢性阻塞性肺病中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白金属蛋白酶组织抑制因子-1全反式维甲酸
- 噻唑蓝法检测中药复方对人白血病CD34^+CD38^-干细胞群的影响被引量：4
- 2008年
- 目的运用噻唑蓝(MTT)法检测中药益气养阴方及其拆方后的扶正组方、祛邪组方对人白血病CD34+CD38-干细胞群的影响。方法免疫磁珠分离人白血病CD34+CD38-干细胞群,MTT法检测中药复方对细胞生长的影响。结果益气养阴制剂对白血病干细胞的体外抑制率为(24.390±0.046)%,扶正组抑制率为(9.270±0.052)%,祛邪组为(9.370±0.017)%,益气养阴组与扶正组、祛邪组比较差异均有统计学意义(P<0.05),扶正组与祛邪阻比较差异无统计学意义。结论益气养阴方对白血病干细胞有明显抑制作用。
- 徐瑞荣王敬毅崔兴王琰胡述博李丽珍
- 关键词：白血病噻唑蓝免疫磁珠
- 再生障碍性贫血患者CD4^＋CD25^＋CD127^low调节性T细胞及Notch1表达水平的变化被引量：13
- 2008年
- 目的测定再生障碍性贫血（AA）患者治疗前后外周血CD4^＋CD25^＋CD127^low调节性T细胞（Treg）的数量及叉头翼状螺旋转录因子（FOXP3）mRNA、Notch1 mRNA的表达水平，探讨Treg在AA发病中的作用及其机制。方法流式细胞术检测29例初发AA患者、14例环孢素（CsA）治疗后恢复期及11例治疗后未恢复期患者外周血中CD4^＋CD25^＋CD127^lowT细胞、CD4^＋CD25^T细胞的数量，并与正常对照比较；采用RT-PCR检测FOXP3 mRNA和Notch1 mRNA的表达水平，分析两者相关性。结果AA初发组及治疗后未恢复组患者外周血中活化CD4^＋CD25^T细胞占CD4^＋T细胞比例分别为（4．3±0．7）％、（4．2±0．6）％，明显高于正常对照组[（2．4±0．8）％]（P〈0．05）。CsA治疗后恢复组患者比例下降为（2．6±0．7）％（P〈0．05），与对照组比较差异无统计学意义。AA初发组及未恢复组CD4^＋CD25^＋CD127^lowT细胞在CD4^＋T细胞中的比例分别为（2．4±1．2）％、（2．5±1．1）％，较正常对照组[（7．1±2．7）％]及恢复组[（5．3±1．0）％]明显降低（P值均〈0．01）；但后两组比较差异无统计学意义。AA初发组患者FOXP3 mRNA及Notch1 mRNA分别为（0．260±0．011）和（0．018±0．005），较正常对照[（1．307±0．011）和（0．308±0．028）]表达明显下调（P值均〈0．01），治疗后分别为（1．287±0．012）和（0．281±0．013），表达较初发组显著提高（P值均〈0．01），与对照组比较差异无统计学意义（P值均〉0．05）。AA患者CD4^＋CD25^＋CD127^lowT细胞、FOXP3均与Notch1表达呈正相关性（P值均〈0．01）。结论AA患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^lowTreg减少，其抑制作用减弱，导致自身反应性T细胞过度活化，抑制造血。其作用机制之一可能与靶细胞表面Notch1分子表达降低相关。
- 尹晓晓刘传方李丽珍陈为志
- 关键词：贫血CD4^+CD25^+调节性T细胞NOTCH1
- 小分子干扰RNA联合反义脱氧寡核苷酸靶向逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR多药耐药的研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨针对多药耐药基因(MDR-1)的小分子干扰RNA(siRNAs)和反义脱氧寡核苷酸(asODNs)联合应用逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR的作用效果。方法设计并合成针对MDR-1基因同一序列的siRNAs和asODNs及阴性对照siRNAs,采用转染试剂lipofectamineTM2000分别转染人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR;利用RT-PCR检测MDR-1mRNA和Western blot检测MDR-1蛋白质的表达;采用罗丹明123外排实验检测P-gp的转运功能,MTT法检测MCF-7/ADR细胞对阿霉素的耐药逆转效果。结果siRNAs、asODNs、asODNs和siRNAs联合应用均能降低MDR-1mRNA及其蛋白质表达,提高P-gp的转运功能,使细胞对阿霉素的敏感性明显恢复;asODNs和siRNAs联合应用效果明显提高;低浓度siRNAs(200nmol/L)比高浓度asODNs(5μmol/L)的效果强。结论siRNAs、asODNs能有效逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR的多药耐药,asODNs和siRNAs联合应用效果明显加强。
- 魏军民侯明李丽珍孔峰高鹏
- 关键词：反义脱氧寡核苷酸MDR-1
