李丹阳
- 作品数:21 被引量:87H指数:6
- 供职机构:重庆医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市教委科研基金重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- 人参皂苷单体Rh2抑制人白血病KG1-α细胞增殖并促进其凋亡被引量:10
- 2014年
- 目的研究人参皂苷单体Rh2对人白血病细胞KG1-α增殖、凋亡的影响。方法取对数生长期的KG1-α细胞,分别用不同浓度的人参皂苷单体Rb1、Rg1、Rh2诱导,另设空白对照组,阳性对照用阿糖胞苷。运用CCK-8法检测各单体对细胞增殖的影响,筛选出最强作用单体。用筛选出的皂苷单体诱导KG1-α细胞,用annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测人参皂苷单体对细胞凋亡的影响,PI染色流式细胞术检测对细胞周期的影响,Western blot法检测人参皂苷单体处理的KG1-α细胞中P53、P21、cylin D1、cleaved caspase-3的表达。结果 CCK-8实验结果显示人参皂苷Rh2、Rb1、Rg1、阿糖胞苷的IC50分别为(75、207、268、1058)μmol/L;与对照组相比,经人参皂苷Rh2诱导24、48 h后,annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术结果表明凋亡率由(5.37±0.02)%,分别增加至(8.37±0.015)%、(33.22±1.67)%(P<0.05);同样处理,细胞周期检测结果显示:G0/G1期由(26.78±3.14)%,分别上升至(29.26±2.31)%、(44.77±2.26)%;S期由(65.43±2.22)%,分别下调至(51.46±0.57)%、(48.29±1.80)%;Western blot结果显示,cleaved-caspase 3、P53和P21在75μmol/L Rh2处理后表达上调,而cyclin D1表达下调。结论人参皂苷Rh2可抑制KG1-α细胞的增殖,促进细胞凋亡。
- 游智梅陈地龙魏强赵亮夏菁李丹阳李静
- 关键词:RG1细胞细胞增殖细胞周期
- Beclin1基因杂合性缺失在砷暴露诱发神经毒性中的作用研究
- 目的:砷(Arsenic,As)是自然界中广泛存在的一种神经毒性污染物。自噬是砷引发神经毒性的重要机制。哺乳动物自噬蛋白Beclin1作为自噬小体形成过程的一类必需蛋白,在人脑和小鼠大脑的多种神经元细胞中普遍表达。课题组...
- 李丹阳
- 关键词:砷BECLIN1自噬神经毒性
- 芒果苷改善高果糖所致HepG2细胞内甘油三酯沉积机制研究
- 2015年
- 目的研究芒果苷改善高果糖诱导的Hep G2细胞内甘油三酯沉积的可能机制。方法低糖(1 g/L葡萄糖)条件下培养的Hep G2细胞分为对照组(1 g/L葡萄糖,无果糖)、果糖组(1 g/L葡萄糖+30 mmol/L果糖)、果糖+芒果苷组(同时加入葡萄糖浓度1 g/L+30 mmol/L果糖+不同剂量的芒果苷,使其药物终浓度分别为6.25、12.5、25、50μmol/L),药物干预24 h之后,油红O染色观察细胞内脂滴的沉积情况,酶法测定细胞内甘油三酯(TG)的含量,Real-time PCR检测碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)、固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、肝型丙酮酸激酶(LPK)、二酯酰甘油酰基转移酶2(DGAT-2)mRNA表达的变化。结果油红O染色结果显示,与对照组相比,果糖组的Hep G2细胞脂滴显著增多,细胞内TG含量也明显升高(P<0.05)。与果糖组对比,低剂量的芒果苷对果糖导致的细胞内脂滴的沉积无影响,较高剂量的芒果苷(25μmol/L和50μmol/L)使细胞内的脂滴数量明显减少,细胞内TG含量显著降低(P<0.05),以50μmol/L的芒果苷干预效果最好。Real-time PCR结果显示,与对照组相比,果糖组Hep G2细胞ChREBP、SREBP-1c、LPK、DGAT-2 mRNA明显升高,50μmol/L芒果苷能够下调Hep G2细胞ChREBP、LPK、DGAT-2 mRNA的高表达(P<0.05),但对SREBP-1c mRNA表达影响不明显。结论芒果苷能够改善高果糖诱导的Hep G2细胞内TG的沉积,可能与抑制脂质合成相关基因ChREBP、LPK、DGAT-2 mRNA的表达密切相关。
- 郑旭李丹阳赵元阳周良曹文富曹纬国姚玲王建伟
- 关键词:芒果苷果糖CHREBP
- 血管平滑肌细胞特异性敲除SCAP通过ROS/AMPK途径激活自噬改善ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的研究
- 目的:固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)裂解激活蛋白(SCAP)又被称为胆固醇敏感器,能够感知细胞内胆固醇的浓度,调节细胞胆固醇的摄取和合成。研究证明平滑肌细胞在动脉硬化斑块中可以转化为泡沫细胞,我们的前期工作发现SC...
- 李丹阳
- 关键词:动脉粥样硬化血管平滑肌
- 文献传递
- 人PGI基因siRNA慢病毒质粒的构建及对白血病细胞增殖的影响被引量:2
- 2013年
- 目的构建共表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和人磷酸葡萄糖异构酶(phosphoglucose isomerase,PGI)基因的慢病毒载体,初步探讨干扰人PGI基因对白血病细胞增殖的影响。方法 RT-PCR、Westernblot检测人单核细胞、K562、KG1-α、HL-60细胞中PGI mRNA和蛋白表达水平,筛选高表达PGI的白血病细胞系;构建人PGI基因siRNA的慢病毒载体及阴性对照,经293T细胞包装后,获得可表达人PGI基因siRNA的慢病毒载体及阴性对照;分别使用重组病毒(干扰组)、原始病毒(阴性对照组)和等量PBS(空白对照组)转染白血病KG1-α细胞,筛选稳定转染细胞株。RT-PCR和Western blot检测干扰组、阴性对照组及空白对照组KG1-α细胞PGI基因表达水平;CCK-8检测各组细胞增殖情况并作生长曲线。结果 PGI基因在白血病KG1-a细胞中高表达;成功构建了稳定低表达PGI的白血病细胞株(KG1-α-siPGI);低表达PGI基因的KG1-α细胞增殖能力较空白对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了低表达PGI基因的白血病KG1-α细胞株,干扰PGI基因的表达能够抑制KG1-α细胞的生长。
- 赵亮李静魏强游智梅夏菁李丹阳陈地龙
- 关键词:白血病慢病毒载体RNA干扰细胞增殖
- 寿胎丸对肾虚-黄体功能不全性流产大鼠Kisspeptin-10的影响被引量:14
- 2017年
- 目的:研究寿胎丸对肾虚-黄体功能不全性流产大鼠模型Kiss-1基因中Kisspeptin-10的影响。方法:对妊娠SD大鼠用羟基脲和米非司酮建立肾虚-黄体功能不全性流产动物模型,分别用寿胎丸水提液和地屈孕酮进行治疗,另设正常对照组。比较各组大鼠子宫和卵巢组织形态学变化、流产率、血清孕酮(P)及卵巢中Kisspeptin-10和Erk1/2的表达。结果:与模型组比较,寿胎丸能够明显改善孕鼠的一般情况、降低流产率,提高孕酮水平;改善子宫内膜及卵巢黄体的形态和功能;免疫荧光显示寿胎丸能提高黄体颗粒细胞Kisspeptin-10的表达;RT-PCR及Western blot结果显示寿胎丸能有效提高卵巢Kisspeptin-10和Erk1/2基因及蛋白水平的表达;同时寿胎丸能提高Erk1/2蛋白磷酸化,使其活性增强。结论:寿胎丸的保胎机制可能与提高大鼠卵巢组织中Erk1/2、Kisspeptin-10的表达,以影响孕酮的变化,改善黄体功能有关。
- 陈阳李丹阳李晓鹏吕艳伟洪蕾
- 关键词:习惯性流产孕酮
- 人参总皂苷TSPG+/-EPO对白血病细胞KG1α增殖分化的影响及其机制的研究
- 背景目的: 人参总皂苷(Total Saponins of Panax Ginseng,TSPG)是中药人参的主要活性成分之一,有研究表明其具有抗肿瘤尤其是血液系统肿瘤的药理作用。由于TSPG包含单体众多,结构复杂,使...
- 李丹阳
- 关键词:人参总皂苷
- 下调PGI/AMF基因协同人参皂苷Rh_2对白血病KG1α细胞作用的体外研究被引量:1
- 2014年
- 目的通过干扰RNA的方法下调人磷酸葡萄糖异构酶/自分泌因子(PGI/AMF)基因的表达,研究人PGI/AMF基因协同人参皂苷Rh2对白血病KG1α细胞的影响。方法将对数生长期KG1α细胞及转染细胞分成对照组和用药组,对照组常规培养,药物组细胞培养体系中分别加入30、45、60、75、90μmol/L的人参皂苷Rh2,各组分别培养24、48、72 h后,CCK-8检测人参皂苷Rh2对白血病KG1α及转染株细胞增殖的影响;台盼蓝检测人PGI基因对KG1α细胞增殖的影响;Antibody Array检测人参皂苷Rh2对Akt通路蛋白的影响;Western blotting检测下调PGI/AMF与人参皂苷Rh2在mTOR、Raptor、Rag蛋白表达变化方面的相关性。结果人参皂苷Rh2抑制KG1α的增殖;下调PGI/AMF使KG1α对人参皂苷Rh2更加敏感;下调PGI基因抑制细胞增殖;Antibody Array结果显示人参皂苷Rh2通过下调P38、mTOR、Akt、AMPKα、PARP、Bad的表达影响KG1α增殖;Western blotting结果显示下调PGI基因通过抑制mTOR、Rag、Raptor表达与人参皂苷Rh2产生协同作用调节人白血病细胞增殖。结论下调PGI基因协同人参皂苷Rh2抑制KG1α细胞的增殖。
- 游智梅陈地龙赵亮魏强夏菁李丹阳李静
- 关键词:人参皂苷RH2MTOR
- 石蒜碱在治疗动脉粥样硬化模型小鼠中的应用
- 本发明涉及生物医药领域,特别涉及石蒜碱在治疗动脉粥样硬化模型小鼠的应用。本发明公开了石蒜碱在延缓动脉粥样硬化发生发展方面的应用。通过采用石蒜碱对经长期高脂高胆固醇饮食构建的模型小鼠进行干预。结果表明,经过干预的小鼠的动脉...
- 阮雄中罗晓婷李丹阳
- 人参总皂苷TSPG联合EPO对白血病细胞KG1-α增殖的影响被引量:1
- 2014年
- 目的探讨人参总皂苷TSPG单独或联合人促红细胞生成素(EPO)对人白血病细胞KG1-α增殖的影响及机制探讨。方法体外培养KG1-α细胞,选取处于对数生长期的细胞用于实验。空白对照组予以常规培养;人参总皂苷TSPG组分别加入25、50、100、200、400 mg/L TSPG;人参总皂苷+EPO组加入上述等量TSPG,同时加入0.5 U/L EPO,并设置EPO对照组。培养3、7、14 d后用CCK-8法检测TSPG单独或联合EPO对KG1-α细胞增殖的影响;运用Real-time PCR技术检测EPOR、STAT5、Jak2、AKT等EPO/EPOR通路相关基因的表达。用Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、P53、P16等蛋白的表达,EPOR蛋白的表达及其活性。结果人参总皂苷TSPG在体外能明显抑制KG1-α细胞的增殖,100μmol/L为最适作用浓度,7 d为最适作用时间,如果在EPO存在的条件下,其最适浓度则降低到75 mg/L;与对照组相比,在EPO存在的条件下人参总皂苷TSPG诱导可明显使细胞阻滞于G0/G1期,若不使用EPO则TSPG对细胞周期无影响;Real-time PCR检测结果显示TSPG诱导组KG1-α细胞内EPOR、Jak2、STAT5等由EPOR介导的JAK-STAT通路相关基因的表达均随TSPG浓度增加而降低,其中高浓度具有明显差异(P<0.05);Western blot检测经单独使用TSPG处理了7 d的KG1-α细胞,与对照组相比,其EPOR及p-EPOR表达明显下调,Jak2、STAT5、p-STAT5、Bcl-2蛋白表达下调,而Bax、Cleaved Caspase-3表达增高,P53及P16无变化;然而添加了EPO处理的各组p-EPOR、Jak2、p-STAT5、P53及P16的表达明显增加,Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3的表达没有变化。结论 TSPG能下调细胞内由EPOR介导的Jak-STAT通路相关蛋白的表达,并降低EPOR的活性,进而下调Bcl-2、上调Bax和Cleaved Caspase-3来促进细胞凋亡;而添加了EPO后这种作用被拮抗,抑制细胞增殖的作用是通过上调P53及P16促进细胞衰老而产生的。
- 李丹阳夏菁冯子强石庆强游智梅刘泽洪陈地龙李静
- 关键词:人参总皂苷促红细胞生成素细胞衰老