曹锐峰
- 作品数：31 被引量：119H指数：7
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 不同剂量γ射线照射对体外培养胶质瘤细胞系的影响及对神经功能的保护作用被引量：7
- 2004年
- 目的:比较不同剂量γ射线对胶质瘤细胞系C6和SHG-44的影响,建立γ射线诱导胶质瘤细胞系C6和SHG-44凋亡研究的生物模型,探索γ射线照射对胶质瘤细胞周期的影响。方法:采用对数生长期的C6和SHG-44胶质瘤细胞经4,8,16,32和64Gy的γ射线照射后培养48h,用流式细胞仪进行细胞凋亡检测并分析细胞周期的改变。结果:不同剂量γ射线照射均可诱导C6和SHG-44胶质瘤细胞凋亡。C6细胞对照组、4,8,16,32和64Gy组照射后48h的凋亡百分数分别为(3.1±0.5),(16.7±0.6),(27.9±0.8),(27.3±0.4),(33.8±0.7)和(36.7±0.7),照射组凋亡率均高于对照组(t=30.16～67.65,P<0.01)。SHG-44细胞对照组,4,8,16,32和64Gy组照射后48h的凋亡率均高于对照组(t=35.51～103.79,P<0.01),但两组细胞的坏死比例均无明显增加(P>0.05)。SHG-44细胞对电离辐射更加敏感。两种细胞G0/G1期的细胞比例与γ射线照射剂量呈正相关;S期的细胞比例与照射剂量呈负相关。结论:以γ射线照射C6和SHG-44胶质瘤细胞可建立理想的射线诱导的细胞凋亡模型,γ射线照射可引起两种胶质瘤细胞系G1期阻滞和S期延迟。
- 曹锐峰曹云新章翔姬西团王西玲梁景文
- 关键词：Γ射线照射体外培养胶质瘤细胞神经功能肿瘤
- 星形胶质瘤细胞摄取BPA的时间及细胞周期相关性研究被引量：1
- 2004年
- 目的 研究两种星形胶质瘤细胞系C6和SHG 4 4摄取BPA(p boronophenylalanine)的孵育时间与细胞周期的相关性 ,探讨BPA的选择性作用机制。方法 细胞计数法测定C6和SHG 4 4胶质瘤细胞和星形胶质细胞的生长曲线 ;将三种细胞分别培养在含BPA的培养液中 (BPA浓度为 5mmol/L ,10 B浓度相当于 5 0 μg/ml) ,4、8、12、16、2 0和 2 4h后采用感应耦合等离子体原子发射光谱 (ICP AES)法测定细胞内硼的含量 ,绘制硼含量 时间曲线 ;含硼培养液孵育 2 4h后 ,流式细胞术分离G0 /G1和G2 /M期细胞 ,ICP AES法测定不同周期细胞硼的含量。结果 C6和SHG 4 4的倍增时间均为 18 5h,星形胶质细胞的倍增时间为 2 8h。相同时间下两种胶质瘤细胞硼含量均高于对照组的胶质细胞 ,差异有统计学意义 (P <0 0 1)。两种胶质瘤细胞G2 /M期比G0 /G1期硼含量明显增高 ,差异有统计学意义 (P <0 0 1) ,而星形胶质细胞两期硼浓度差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。两种胶质瘤细胞G2 /M期硼浓度均高于星形胶质细胞 ,差异有统计学意义 (P <0 0 1)。在G0 /G1期 ,C6和SHG 4 4与星形胶质细胞硼浓度比值分别为 1 4 6和 1 5 1,而在G2 /M期该比值则分别为 3 6 5和3 96。结论 实验中合成的BPA具备了应有的生物学活性 ,即对胶质瘤细胞的高选择性 ;
- 曹锐峰章翔陈伟江新标姬西团王西玲
- 关键词：神经胶质瘤BPA硼中子俘获疗法细胞周期
- BALB/c小鼠C6脑胶质瘤模型的建立及生长特性观察被引量：1
- 2003年
- 目的建立BALB/c小鼠C6脑胶质瘤模型,观察其生长特性。方法将体外培养的细胞数为1×103,1×104,5×104个分别悬浮于无血清DMEM培养液10μl中的C6胶质瘤细胞接种于BALB/c小鼠左顶枕区,观察不同C6细胞浓度实验鼠的生存状态及肿瘤生成率。对自然死亡荷瘤鼠行组织病理学和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组织化学检查。另外,在实验3d、6d、9d、12d、15d、20d时解剖实验鼠,对肿瘤体积进行统计测量。结果该方法建立的胶质瘤动物模型在组织病理学上接近人脑胶质瘤,且颅内生长稳定。3组成瘤率分别为65%、75%、80%。未见颅外转移病灶,实验周期短,重复性较好。结论BALB/c小鼠C6脑胶质瘤模型的肿瘤生长特性及病理特征与人脑胶质瘤相似,可作为临床胶质瘤基础研究的理想模型。
- 姬西团章翔费舟曹锐峰王西玲赵明梁景文
- 关键词：小鼠脑胶质瘤动物模型病理学
- 胶质瘤细胞系摄取BPA实验研究被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨孵育时间和细胞周期对胶质瘤细胞摄取BPA(p boronophenylalanine)的影响 ,进一步阐明BPA的胶质瘤细胞选择性作用机制。方法 将C6 ,BT 32 5 ,SHG 4 4胶质瘤细胞和原代大鼠星形胶质细胞培养在含BPA的培养液中 ,分别培养 4h、8h、12h、16h、2 0h和 2 4h后 ,采用感应耦合等离子体原子发射光谱 (ICP AES)法测定细胞内硼的含量。培养 2 4h后 ,流式细胞仪分选G0 /G1和G2 /M期的细胞 ,ICP AES法分别测定细胞内硼的水平。结果 三种胶质瘤细胞在每个检测时间点的细胞内硼含量均显著高于对照组胶质细胞 (P <0 .0 1)。三种胶质瘤细胞G2 /M期与G0 /G1期相比硼含量均明显增高 (P <0 .0 5 ) ,而星形胶质细胞两期差异不明显。C6、SHG 4 4和BT 32 5与星形胶质细胞G0 /G1期的硼浓度比分别为 1.4 6、1.5 1和 1.4 0 ,G2 /M期的硼浓度比分别为 3.6 5、3.96和3.76。结论 有丝分裂的过程可以加强胶质瘤对BPA的吸收 ,这一过程可能与胶质瘤细胞对BPA的主动运输有关。
- 曹锐峰章翔陈伟江新标姬西团王西玲梁景文
- 关键词：胶质瘤肿瘤细胞BPA细胞周期
- 硼中子俘获疗法诱导U251胶质瘤细胞凋亡
- 2007年
- 目的研究硼中子俘获疗法(BNCT)能否诱导体外培养的U251细胞发生凋亡,并探讨其诱导细胞凋亡的机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线,应用光镜、荧光显微镜、透射电子显微镜观察BNCT后细胞形态改变;使用流式细胞仪检测细胞凋亡率;利用细胞克隆形成实验分析细胞存活分数;用免疫组织化学方法检测相关蛋白表达的变化。结果在体外试验中BNCT对U251细胞的杀伤力强,并观察到了典型的细胞凋亡改变,4、8Gy照射后48h流式细胞仪检测,细胞凋亡率分别为60.2%、80.6%。在凋亡过程中,p53蛋白表达明显增高,而bc1-2蛋白表达下调。结论BNCT可诱导U251细胞发生凋亡,其机制可能与p53基因表达上调及bcl-2基因表达下调有关。
- 王鹏章翔江新标程光赵英梁景文曹锐峰王剑博
- 关键词：硼中子俘获疗法U251凋亡P53BCL-2
- 维生素C、氢化可的松、维拉帕米合用防治大鼠小肠缺血再灌注损伤被引量：3
- 2002年
- 目的 探讨维生素 C、氢化可的松、维拉帕米三药联合应用对小肠缺血再灌注损伤的防治作用及其起作用的机制 ,为临床用药提供参考 .方法 采用大鼠常温小肠缺血 6 0min-再灌注 (I/R)模型 ,治疗组动物于再灌注前 1 0 min尾静脉依次给予维生素 C (2 0 0 mg· kg- 1)、维拉帕米 (0 .5 2 mg·kg- 1)和氢化可的松 (1 0 .42 mg· kg- 1) ,开夹后立即再次注入上述剂量维生素 C和维拉帕米 .观测动物血压、微血管通透性、组织水含量及再灌注 1 2 0 min死亡率等指标 .结果 治疗组再灌注 1 2 0 min死亡率为 0 ,而 I/R组死亡率为 1 0 0 % ,两组有显著差异 (P<0 .0 5 ) ,治疗组死亡率明显降低 ;至开夹 90min和 1 2 0 min时 I/R组血压几乎为 0 ,治疗组仍保持在较高水平且趋于稳定 ,与 I/R组有显著差异 (P<0 .0 1 ) ;三药合用使组织水肿程度显著减轻 (P<0 .0 1 ) ,组织微血管通透性有所降低 (P<0 .0 5 ) .结论 维生素 C、维拉帕米、氢化可的松三种药物联合应用可明显减轻大鼠小肠缺血 /再灌注损伤 ,这与维生素 C的自由基清除作用。
- 曹锐峰李志超贾斌
- 关键词：小肠缺血再灌注损伤维生素C维拉帕米
- EAAT2过表达对匹鲁卡品诱导小鼠癫痫持续状态模型的保护作用(英文)
- 2007年
- 目的研究兴奋性氨基酸转运体2(EAAT2)过表达对癫痫发作及SE诱导的海马神经元死亡的作用。方法实验采用野生型或者EAAT2转基因FVB/N小鼠,腹腔注射匹鲁卡品诱导癫痫持续状态(SE)。SE后3d,取脑、固定、切片,进行EAAT2、生长抑素的免疫组化染色以及甲酚紫染色,分别对海马CA1和齿状回门区阳性神经元进行计数。结果与野生型动物相比,EAAT2在转基因小鼠海马中表达显著增加。野生型小鼠达到SE或者死亡所需的总匹鲁卡品剂量为344±40.3mg/kg,,而EAAT2转基因小鼠达到同等效应所需剂量为657±119.9mg/kg,显著高于野生型所用剂量(P<0.05)。SE后3d,野生型小鼠海马CA1区锥体细胞层神经元相对数量为0.56,而转基因动物中为0.9,显著高于野生型动物(P<0.05)。同时,野生型和转基因小鼠癫痫后齿状回门区中间神经元相对数量分别为0.11和0.67,转基因组数量显著高于野生型组(P<0.05)。野生型小鼠癫痫后齿状回门区生长抑素阳性神经元数量为0,但是,在EAAT2转基因小鼠,数量为0.4,显著高于野生型(P<0.05)。结论EAAT2过表达对SE产生及其诱导的神经元死亡具有显著保护作用。过表达的EAAT2可能通过加强细胞外谷氨酸转运而调控其兴奋毒性。
- 曹锐峰章翔章薇林源王丽娜
- 关键词：海马匹鲁卡品转基因小鼠模型
- 脑胶质瘤动物的模型建立及cyclin D1表达的观察被引量：2
- 2003年
- 目的 :建立类似人脑胶质瘤动物模型 ,观察cyclinD1在肿瘤组织中的表达 .方法 :借助动物立体定向仪 ,将体外培养大鼠C6胶质瘤细胞接种于Wistar大鼠左侧尾状核区 .接种后观察实验大鼠生存状态 ,分别于接种后 7,1 5d进行MRI检查 .对每例荷瘤鼠死后进行解剖 ,行组织病理学和GFAP免疫组化检查 .随后对不同存活期大鼠cyclinD1表达进行检测 .结果 :该方法建立的胶质瘤动物模型在组织病理学上接近人脑胶质瘤 .而且具有颅内生长稳定 ,成瘤率高 ,重复性好 .在每例胶质瘤组织中cyclinD1均呈阳性表达 ,主要在细胞胞核表达 ,不同存活期荷瘤鼠其瘤组织中cyclinD1表达量不同 ,存活时间较长者 ,其表达量明显减少 .结论 :此类模型肿瘤生长特性及病理特征与人脑胶质瘤相似 .
- 姬西团章翔赵明曹锐峰王西玲林绿标程光梁景文
- 关键词：神经胶质瘤立体定位技术细胞周期蛋白D1CYCLIND1
- 胶质瘤细胞系对γ射线辐射敏感性实验研究被引量：3
- 2003年
- 目的 :探讨γ射线杀伤胶质瘤细胞的剂量 效应关系、时间 效应关系和杀伤作用的机制 ,比较两种不同种属来源的胶质瘤细胞系对γ射线照射的敏感性 .方法 :以胶质瘤细胞系C6和SHG 4 4为实验对象 ,应用60 Co放射源产生的γ射线行单次照射 ,设对照组、4Gy ,8Gy ,1 6Gy ,32Gy和 6 4Gy组 .照射后光镜下观察细胞形态改变并进行细胞凋亡检测 ,流式细胞术测定照射后不同时间和不同剂量照射时瘤细胞坏死、凋亡和存活的比例 .结果 :照射后 2 4h ,32Gy和 6 4Gy组两种细胞均可见多数细胞出现明显的类似凋亡的细胞形态学改变 ,Hoechst33342染色可见细胞核呈致密浓染 .随着照射后观察时间的延长 ,两种细胞的凋亡率逐渐提高 ,6h后各时间点细胞凋亡率均高于对照组 ,差异有非常显著性 (P<0 .0 1 ) .两种细胞在照射后 4 8h凋亡率与 4 8h前各时间点相比明显增高 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1 ) .4 8h后各个时间点的凋亡率与 4 8h相比 ,无显著差异 (P >0 .0 5 ) .随着照射剂量的增加 ,照后 4 8h两种细胞凋亡率均逐渐增高 ,与对照组相比差异有非常显著性 (P <0 .0 1 ) ,但 32Gy以上剂量照射后细胞凋亡率趋于稳定 .在各种照射剂量下两种胶质瘤细胞坏死率与对照组相比均无显著差异 (P >0 .0 5 ) .SHG 4 4细胞与C6细胞相比 ,在吸?
- 曹锐峰章翔曹云新姬西团王西玲梁景文郭国桢
- 关键词：神经胶质瘤脱噬作用细胞系Γ射线杀伤作用
- 小鼠神经干细胞的生物学特性观察
- 2004年
- 目的探讨小鼠神经干细胞体外原代培养的生长特性。方法用无血清与单细胞克隆技术对小鼠胚胎脑组织进行分离、培养,用光镜、免疫组织化学进行鉴定,并对其不同生长时期的生物学特性进行透射电镜观察。结果鼠胚胎分离细胞具有连续分化及克隆能力,克隆球和早期的原始细胞神经上皮干细胞蛋白(nestin)抗原呈阳性。成熟分化后胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及神经丝-200(NF-200)抗原呈阳性。不同期电镜结果:培养2周的神经干细胞较原始,核大,细胞质少,细胞器不发达。将其继续培养到4周,部分细胞内可见到发达的细胞器,并在分化细胞中观察到神经微管、微丝、胶样丝和细胞间连接样结构。结论胚胎脑组织在体外培养并克隆成神经球,具有很强的增殖能力,是多分化潜能干细胞。
- 姬西团章翔林绿标费舟王西玲梁景文曹锐峰潘灏
- 关键词：神经干细胞免疫组化透射电镜胎鼠
