曹一博
- 作品数：15 被引量：147H指数：7
- 供职机构：北京林业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种与植物耐旱相关的转录因子VcMYB108及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种植物耐旱性相关的MYB转录因子VcMYB108及其编码基因与应用，涉及生物技术领域。本发明提供的VcMYB108蛋白是SEQ ID NO.2所示的蛋白质，VcMYB108蛋白的编码基因是SEQ ID NO...
- 张凌云王磊曹一博王爱斌
- 一种蓝莓原生质体瞬时转化的方法
- 本发明公开了一种蓝莓原生质体瞬时转化的方法。本发明属于生物技术领域，具体涉及一种蓝莓原生质体瞬时转化的方法。蓝莓原生质体的瞬时转化方法包括如下步骤：1)转化：将质粒/Ca<Sup>2+</Sup>溶液与蓝莓原生质体悬浮液...
- 张凌云赵鑫焱曹一博宋慧芳刘佳丽
- 青杄转录共激活因子PwMBF1c的功能研究与验证
- 2023年
- 克隆通过青杄干旱转录组筛选到的差异候选基因PwMBF1c,对其生物学功能进行分析和验证,以期能够解析青杄的耐旱机理,并为培育优良抗逆林木品种提供基因资源。利用RT-qPCR技术分析PwMBF1c对干旱、高温、低温及激素处理的响应。瞬时转化烟草叶片和洋葱表皮细胞检测PwMBF1c的亚细胞定位。利用酵母单杂验证PwMBF1c的转录活性。在拟南芥和马铃薯体系中验证了PwMBF1c抗旱应答的功能。PwMBF1c主要在成熟叶中表达,其转录水平受干旱、高温、水杨酸(SA)诱导上调;PwMBF1c的C端具有转录激活活性,而N端和全长不具有转录活性;PwMBF1c定位于细胞膜、细胞质和细胞核;过表达PwMBF1c显著提高了拟南芥和马铃薯的耐旱性。干旱胁迫下,与对照组Col-0和VC相比,过表达拟南芥株系PwMBF1c-L1和PwMBF1c-L2存活率更高,叶绿素含量较高,MDA含量较低;在PEG处理后,与野生型马铃薯Y5相比,过表达PwMBF1c显著提高了苗高。PwMBF1c的表达水平受干旱等多种逆境和激素的诱导,PwMBF1c主要定位于细胞膜、细胞质和细胞核,且该蛋白的C端具有转录激活活性。PwMBF1c能够显著提高转基因拟南芥和马铃薯的耐旱性。
- 刘奎李兴芬杨沛欣仲昭晨曹一博张凌云
- 关键词：胁迫响应基因表达耐旱性
- 青杄PSAK的克隆及生物信息学分析被引量：7
- 2012年
- 目的:获取青杄的PSAK全长cDNA序列,对其进行生物信息学分析,并鉴定其在青杄各组织中相对表达量。方法:以多年生青杄(Picea wilsonii)的cDNA文库为模板,通过RACE PCR的方法获取PSAK的末端序列,经过与EST序列拼接得到PSAK基因的cDNA全长序列。通过特异引物将其克隆在pEASY-T1载体上,基于其氨基酸序列,利用DNAMAN、ExPASy、SWISS-MODEL等工具对其进行生物信息学分析,进行了半定量RT-PCR与RT-qPCR实验来检测其在mRNA水平的组织表达情况。结果:青杄PSAK基因编码140个氨基酸,蛋白分子量为14.23kDa,理论等电点为10.29。蛋白的C端有较为保守的结构域,与拟南芥、烟草等物种具有较高的相似性。PwPSAK主要在青杄的针叶与茎中进行表达。结论:成功获取了PwPSAK的单克隆并进行了生物信息学分析,为青杄中PSAK后续的功能研究提供理论依据。
- 李长江曹一博张凌云
- 关键词：RACE克隆生物信息学RT-PCR
- 油茶生长发育过程中脂肪酸成分的测定分析被引量：28
- 2012年
- 为了研究油茶生长发育过程中脂肪含量及脂肪酸成分的变化,分析测定2个油茶品种在不同生长时期油茶籽中的脂肪酸成分。采用索氏提取法提取油茶籽中的脂溶性成分,经甲酯化处理后用气象色谱分离和鉴定,运用面积归一法确定各成分的相对百分含量。结果表明,在整个发育过程中油脂形成有2个高峰,分别在9月上旬和10月上旬;种子种脂肪酸的主要组成是不饱和脂肪酸,油酸含量最高,其次是亚油酸和油酸,饱和脂肪酸以棕榈酸和硬脂酸为主,其中油酸呈明显上升趋势,棕榈酸和亚油酸呈明显下降趋势,硬脂酸呈小幅上升趋势,亚麻酸呈小幅下降趋势。
- 王小艺曹一博张凌云陈永忠
- 关键词：油茶籽脂肪酸索氏提取法不饱和脂肪酸
- 青杄PwHAP5基因原核表达及多克隆抗体制备被引量：1
- 2022年
- 制备青杄(Picea wilsonii)PwHAP5基因的特异性多克隆抗体,为研究PwHAP5基因功能、分子机制奠定基础。经PCR扩增获得青杄花粉PwHAP5基因片段与载体pET-48b相连构建原核表达载体pET-48b-PwHAP5。经诱导产生重组蛋白PwHAP5,通过His-NTA镍柱纯化蛋白产物。蛋白经SDS-PAGE检测后再免疫兔子制备兔抗血清。血清经ProteinA纯化后,通过SDS-PAGE和Western blot检测抗体纯度和特异性。结果表明,成功构建了原核表达载体pET-48b-PwHAP5,制备了分子质量约为45 kD的重组蛋白PwHAP5。获得的青杄PwHAP5兔抗血清经间接ELISA法检测效价达1∶729000以上;制备的PwHAP5蛋白兔多克隆抗体能特异性识别抗原,效价高,满足后续研究PwHAP5蛋白在青杄生长发育中的功能等需求。
- 覃雪晶王雨涵曹一博张凌云
- 关键词：原核表达蛋白纯化多克隆抗体
- 抗裂与易裂枣内源激素含量和细胞壁代谢相关酶活性比较被引量：28
- 2014年
- 以枣抗裂果品种‘圆铃枣’和易裂果品种‘俊枣’为材料,测定了果实生长发育曲线、果形指数及种子败育率,并对果皮、果肉、种子中内源激素含量及果皮、果肉中细胞壁代谢相关酶的活性进行了检测。结果表明,‘俊枣’果形指数和种子败育率均显著高于‘圆铃枣’。果实发育后期‘俊枣’果皮中的GA3含量、果肉中的IAA含量明显高于‘圆铃枣’,而‘圆铃枣’果肉及种子中的ABA含量高于‘俊枣’;‘俊枣’果肉及种子中(GA3+IAA+ZT)/ABA的比值在整个果实生长发育期均高于‘圆铃枣’。果实生长发育后期‘俊枣’果皮中的果胶酶及纤维素酶活性高于‘圆铃枣’,且‘俊枣’果肉中的POD及PPO活性也较高。以上结果显示,枣果实生长发育后期易裂品种‘俊枣’果肉中的IAA积累较多,而抗裂品种‘圆铃枣’果肉及种子中ABA含量显著高于易裂品种;易裂品种‘俊枣’果肉及种子中(GA3+IAA+ZT)/ABA的比值较高,果皮中的果胶酶、纤维素酶活性影响裂果的发生,其POD及PPO活性相对较高。
- 曹一博李长江孙帆张凌云
- 关键词：裂果内源激素酶活性
- 青杄中sPPa1的cDNA序列克隆及其生物信息学分析
- 2012年
- 以青杄(Picea wilsonii)均一化cDNA文库为模板,通过RACE方法克隆得到青杄PPa1基因cDNA全长,对该cDNA序列、核苷酸序列的相似性、理化性质、疏水性、二级结构、三级结构及是否跨膜进行了分析预测;进行了多序列比对并构建了系统树,同时对PPa1在青杄各组织中的表达量进行了检测。结果表明:青杄PPa1基因共由216个氨基酸组成,分子量为24.55 kD,理论PI为5.83,属可溶性蛋白;二级结构主要由α-螺旋、不规则卷曲和β-折叠构成;PPa1在青杄花粉中表达量最高。研究为进一步研究青杄PPa1的功能奠定了基础。
- 曹一博刘亚静张凌云
- 关键词：克隆RACE生物信息学
- 枣果实发育过程中生理代谢与裂果的关系
- 以抗裂品种“圆铃枣”(Zizyphusjujuba Mill.cv Yuanlingzao)、易裂品种“俊枣”（Zizyphusjujuba Mill.cv Junzao）为实验材料，制作石蜡切片观察各时期样品的解剖结构...
- 曹一博
- 关键词：内源激素生理代谢果实发育过程
- 油茶生长发育过程中脂肪酸成分的测定分析
- 为了研究油茶生长发育过程中脂肪含量及脂肪酸成分的变化，分析测定2个油茶品种在不同生长时期油茶籽中的脂肪酸成分。采用索氏提取法提取油茶籽中的脂溶性成分，经甲酯化处理后用气象色谱分离和鉴定，运用面积归一法确定各成分的相对百分...
- 王小艺曹一博张凌云陈永忠
- 关键词：油茶籽脂肪酸索氏提取法不饱和脂肪酸
