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方曙光

作品数：6 被引量：17H指数：3
供职机构：华东理工大学更多>>
发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 5篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 4篇生物学
  • 2篇化学工程
  • 2篇轻工技术与工...

主题

  • 6篇酵母
  • 6篇毕赤酵母
  • 5篇重组毕赤酵母
  • 5篇RETEPL...
  • 4篇酵母表达
  • 4篇毕赤酵母表达
  • 3篇瑞替普酶
  • 3篇重组毕赤酵母...
  • 2篇细胞
  • 2篇细胞活性
  • 2篇活性
  • 2篇降解
  • 2篇发酵
  • 2篇发酵过程
  • 1篇蛋白胨
  • 1篇温度
  • 1篇流式细胞
  • 1篇流式细胞仪
  • 1篇流式细胞仪检...
  • 1篇控制策略

机构

  • 6篇华东理工大学
  • 1篇上海市工业微...

作者

  • 6篇方曙光
  • 5篇储炬
  • 5篇庄英萍
  • 5篇黄立
  • 5篇张嗣良
  • 1篇邹敏
  • 1篇严成钊

传媒

  • 3篇工业微生物
  • 2篇华东理工大学...

年份

  • 2篇2007
  • 4篇2006
共 6 条 记 录，以下是 1-6
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排序方式：
重组毕赤酵母表达瑞替普酶(Reteplase)过程中的降解控制被引量：5
2006年
在利用重组毕赤酵母表达瑞替普酶(Reteplase)时,遇到了较为严重的蛋白降解。为了抑制Reteplase的降解,分别研究了pH和氨基酸、蛋白胨等添加物对降解的影响。结果表明,摇瓶培养时用氨水调节pH,并将pH恒定在6.5能有效地抑制降解,这一结果在5L罐上也得到了验证,表达量提高到487mg/L。添加0.1%的Leu或Ala和将蛋白胨用量增加至6%时,Reteplase的降解也能得到有效的控制。
邹敏方曙光黄立庄英萍储炬张嗣良严成钊
关键词：蛋白胨毕赤酵母RPA
流式细胞仪检测重组毕赤酵母发酵过程中的细胞活性
2006年
建立了流式细胞仪检测重组巴斯德毕赤酵母(P.p astoris)细胞活性的方法,并在高密度发酵过程中得到应用。使用碘化丙锭染色法测定细胞活性,发现甲醇诱导时酵母细胞活性开始下降,随着细胞密度的增加,由于细胞胁迫和甲醇的影响,细胞活性明显下降,活细胞率最大下降了14%。与此同时,细胞生长减缓,目的蛋白发生降解,表明细胞活性与发酵过程中细胞的生长和目的蛋白生成等参数密切相关。实验证明:流式细胞仪可作为检测毕赤酵母发酵过程中细胞活性参数的一个便捷精确的有力工具。
方曙光黄立储炬庄英萍张嗣良
关键词：流式细胞仪毕赤酵母高密度发酵
甘油相控制策略对重组毕赤酵母表达瑞替普酶(reteplase)的影响被引量：1
2007年
研究了甘油补料策略对毕赤酵母表达reteplase(rPA)的发酵过程中细胞的生长和rPA表达的影响。通过将对甘油补料速率由10g/L.h-1增大到20g/L.h-1,细胞比生长速率,甘油的比消耗速率,甘油得率等都得到极大提高。而且,诱导期细胞生长,甲醇消耗和rPA的生成速率都增加,rPA的最大表达量从140.2mg/L增加到199.5mg/L。此另外,甘油补料时间也是影响rPA表达的重要因素,甘油补料时间短,细胞密度小,表达rPA少,甘油补料时间长,细胞密度增大,rPA的表达速率也增加,但是到诱导后期,细胞死亡率增大,蛋白酶释放增加,rPA的降解增强。
方曙光储炬黄立庄英萍张嗣良
关键词：毕赤酵母RETEPLASE甘油
重组毕赤酵母表达reteplase发酵过程中的降解现象被引量：3
2006年
研究了pH和温度对重组毕赤酵母表达retep lase(rPA)发酵过程中的降解现象。在低pH(4.5)诱导条件下,由于蛋白酶活性高,rPA降解严重,表达量几乎为0,提高诱导pH至6.5,蛋白酶活性降低,rPA的表达量最高达到122 m g/L。通过将诱导温度从30°C降低到20°C,rPA的表达量从153.2 m g/L提高到207.9 m g/L。降低温度能减少细胞死亡率,从而减少了发酵液中蛋白酶的释放,降低了蛋白酶的活性,抑制了对目的蛋白rPA的降解。另外,低温使胞内AOX酶活性提高,从而增强了rPA的表达。
方曙光储炬黄立庄英萍张嗣良
关键词：毕赤酵母RETEPLASE降解发酵
基因工程菌毕赤酵母（PICHIA PASTORIS）表达RETEPLASE发酵过程的研究
RETEPLASE(RPA)是组织型纤溶酶原激活剂(TISSUE-TYPEPLASMINOGENACTIVATOR，T-PA)的一种缺失突变体，由于在半衰期和疗效上比T-PA有一定的优越性，已成为最重要的新型溶栓药物之一...
方曙光
关键词：重组毕赤酵母细胞活性发酵过程
文献传递网络资源链接
温度对巴斯德毕赤酵母表达瑞替普酶(reteplase)的影响被引量：9
2007年
研究了温度对巴斯德毕赤酵母表达瑞替普酶(reteplase,rPA)的影响。结果发现,在BMMY摇瓶培养条件下,诱导温度在20℃、25℃,rPA表达量较高,分别是30℃诱导条件下(18.2mg/L)的1.4倍和1.34倍。在高密度发酵过程中,降低诱导温度(20℃、25℃),rPA的表达量在诱导表达84h时达到最高,分别为207.9mg/L和199.5mg/L,比30℃诱导条件下分别提高了35%和30%。通过对细胞活性、蛋白酶和AOX酶活性分析发现,降低温度不仅提高了发酵过程中酵母活细胞率,降低了蛋白酶的活性,减少了rPA的降解,而且提高了AOX酶活,增强了rPA的表达。
方曙光储炬黄立庄英萍张嗣良
关键词：毕赤酵母RETEPLASE降解温度
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