徐少元 作品数:9 被引量:40 H指数:5 供职机构: 中山大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
反复种植失败妇女“种植窗”时期子宫内膜组织的细胞骨架蛋白质的差异表达 被引量:5 2014年 目的探讨体外受精-胚胎移植治疗周期中反复种植失败(RIF)和已生育正常妇女"种植窗"时期(LH+6~LH+9d)子宫内膜组织蛋白质表达的差异。方法选择RIF妇女和正常对照妇女各4名分为实验组和对照组。采用胶内差异双向电泳、(2D-DIGE)和基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术鉴定子宫内膜组织的差异表达蛋白质。结果两组之间获得16个差异表达蛋白质(其中6个下调表达,10个上调表达),其中10个参与细胞骨架构成,分别是:波形蛋白、埃兹蛋白、Septin 2蛋白、radixin蛋白、纽蛋白、角蛋白8、角蛋白10、角蛋白18、角蛋白19及肌动蛋白。结论本研究结果证实"种植窗"时期RIF妇女子宫内膜组织存在多个细胞骨架蛋白质表达的异常,可能是子宫内膜细胞"质膜转换"缺陷和胚胎种植失败的重要原因。 刘倍余 李洁 黎明涛 胡坤华 夏婷婷 徐少元关键词:种植窗 子宫内膜容受性 反复种植失败 HCG对人子宫内膜细胞VEGF表达调控的初步研究 被引量:5 2015年 目的:探讨人子宫内膜细胞体外培养模型中,HCG对VEGF表达的调控作用和机制。方法:采用机械分离加梯度离心法分别获得腺上皮与基质细胞进行体外原代细胞混合培养;实验设对照组、HCG组(对照组使用常规DF/12培养液提取总蛋白;HCG组在DF/12培养液中加终浓度为20U/ml HCG)。采用Q-PCR测定子宫内膜细胞中VEGF mRNA表达水平。免疫组化或荧光法进行LH-R和VEGF蛋白质定位表达,Western blot法测定蛋白半定量表达。结果:子宫内膜腺上皮与基质细胞均存在LH/HCG-R和VEGF蛋白表达。HCG对子宫内膜细胞VEGF蛋白的峰值作用时间点为24h。与对照组相比,20IU/ml HCG体外干预24h后,子宫内膜细胞VEGF mRNA和蛋白质水平均显著上调(Q-PCR:1 vs 2.0132±0.6024;WB:0.4069±0.1897 vs 0.7781±0.1651)(P均<0.05)。结论:成功建立了人子宫内膜细的体外培养模型,并完成HCG的干预实验。HCG与HCG/LH-R结合后上调子宫内膜细胞VEGF的基因和蛋白质水平表达。 徐少元 李洁 郭鲁燕 陈晓燕 张颖关键词:人子宫内膜细胞 HCG VEGF 人绒毛膜促性腺激素与胚胎种植 被引量:5 2013年 人绒毛膜促性腺激素(HCG)是一种由早期胚胎滋养球细胞和胎盘滋养层合体细胞分泌的、两个亚基以非共价健结合的糖蛋白激素。目前认为它是滋养层细胞和众多胚胎源性物质中最早出现的标志物。 李洁 陈晓燕 徐少元关键词:人绒毛膜促性腺激素 胚胎发育 子宫内膜容受性 胚胎种植 LH/HCG受体在人子宫内膜细胞StAR、AnnexinIV和VEGF蛋白质表达调控作用中的实验研究 目的 探讨在体外培养模型中,HCG干预下LH/HCG受体在人子宫内膜细胞Annixin Ⅳ、StAR、VEGF表达调控中的作用 方法 采用机械分离加梯度离心法分离获得上皮与基质细胞并进行原代细胞混合体外培养;实验设对照组... 徐少元 李洁 陈晓燕人子宫内膜细胞体外培养模型的建立 被引量:1 2015年 【目的】构建人子宫内膜细胞体外培养模型。【方法】收集子宫内膜组织,采用酶消化、筛网滤过、梯度离心的方法获得腺上皮与基质细胞混合细胞进行体外原代培养,采用光学显微镜下观察体外培养的细胞形态,采用波形蛋白和角蛋白单克隆抗体进行免疫组化法鉴定子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞。【结果】倒置显微镜下发现子宫内膜细胞中腺上皮细胞和基质细胞呈混合生长,其中基质细胞占大部分,为72.0%;腺上皮细胞占小部分,为24.5%,基质细胞和腺上皮细胞免疫组化染色后呈阳性,细胞纯度分别为24.5%和70.5%,两种细胞加起来的纯度为95%。【结论】该方法操作简便,效率高,可建立一个稳定实用的人子宫内膜细胞体外培养体系。 徐少元 李洁 陈晓燕 陈淑琴 郭鲁燕关键词:细胞 细胞培养技术 上皮细胞 HCG对人子宫内膜细胞StAR、AnnexinⅣ和VEGF表达调控的初步研究 目的:探讨人子宫内膜细胞体外培养模型中,HCG对AnnixinⅣ、StAR、VEGF表达的调控作用和机制。材料:收集增殖中、晚期子宫内膜组织标本7例,均来自于中山大学附属第一医院妇产科,其中因不孕症经子宫腔镜下子宫内膜行... 徐少元关键词:人子宫内膜细胞 HCG STAR 促性腺激素释放激素及类似物对子宫内膜作用的研究进展 被引量:5 2013年 1971年Schally等首次从猪下丘脑分离得到十肽的下丘脑促性腺激素释放激素(gonadotropin—releasinghonmnel,GnRHI)。目前已知有22种不同分子结构的GnRH及其类似物, 徐少元 陈晓燕 李洁关键词:促性腺激素释放激素 类似物 子宫内膜 不明原因反复种植失败患者“种植窗”期血清雌二醇、孕酮增高与肿瘤坏死因子受体作用因子3表达异常的关系 被引量:2 2014年 目的探讨不明原因反复种植失败(RIF)和正常生育妇女(FC)“种植窗”期血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、E2/P水平和子宫内膜组织学时相、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和肿瘤坏死因子受体作用因子3(TRAF3)蛋白质的表达及其变化差异与反复种植失败的关系。方法2009年10月至2012年3月于中山大学附属第一医院募集34名女性自愿者(反复种植失败患者15例,生育对照组19名)。在黄体生成激素(LH)+6~LH+9t1检测血清E2、P水平,微创法取子宫内膜组织;应用Western blot进行TRAF3的蛋白质水平半定量分析,免疫组织化学技术分析ER、PR和TRAF3定位表达与图象半定量分析。结果“种植窗”期血清E2、P水平,子宫内膜腺上皮细胞ER、PR,基质细胞ER、PR在两组间差异无统计学意义,但RIF患者血清E2/P显著高于对照组(P=0.026)免疫组织化学法分析显示TRAF3主要定位于子宫内膜腔上皮和腺上皮细胞,基质细胞表达很弱;免疫组化染色光密度值分析和Western blot半定量结果均显示不明原因RIF组TRAF3表达显著降低(P=0.02)。结论“种植窗”期子宫内膜组织存在TRAF3的定位与半定量表达;E2/P升高可能影响子宫内膜组织局部分子的表达, 刘倍余 李洁 夏婷婷 徐少元人类子宫内膜容受性评估的研究进展 被引量:17 2013年 人类胚胎着床是一个复杂的程序化过程,涉及众多生物机制参与。其中胚胎质量与发育潜能和子宫内膜对胚胎容受性是影响着床成功的两个最重要因素。尽管现行辅助生殖技术在不孕不育症的治疗中已经取得了巨大进步,人们能够根据胚胎形态学选择具有发育潜能的胚胎进行移植,体外培养第3天和第5天胚胎种植率分别达到25%~35%,但是大约占移植数目2/3的胚胎丢失仍然是目前限制体外受精(IVF)成功的重要原因。 徐少元 刘倍余 李洁关键词:子宫内膜容受性 着床 胞饮突 基因组学 蛋白质组学