张金栋
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
- 供职机构：广州医学院实验医学研究中心更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 整合荧光素酶的稳定细胞克隆建立裸鼠肺癌静脉移植瘤模型的探索被引量：4
- 2012年
- 目的:应用建立的整合荧光素酶的稳定细胞克隆构建裸鼠肺癌模型,并用活体成像技术检测肿瘤成瘤及变化。方法:细胞计数分析其生长特性,体外测定不同数量的细胞的发光强度;尾静脉注射接种BLAB/c nu/nu裸鼠,活体成像系统监测裸鼠体内肿瘤的生长及转移,肿瘤组织切片验证移植瘤的病理特性。结果:在稳定表达荧光素酶的SPC-A-1-luc+细胞基因组中能有效扩增到荧光素酶基因;该细胞系具有与母细胞相同的生长曲线,体外检测发现其发光强度与细胞数量呈正相关;尾静脉接种裸鼠后肺部成瘤率为100%,且信号强度随时间递增。结论:建立了稳定整合Luciferase基因的肺腺癌细胞株SPC-A-1-luc+稳定克隆,尾静脉接种后可有效构建肺部肺腺癌成瘤模型,并可动态监测肿瘤的生长及转移。
- 张金栋吕景礼周问渠刘启才李晓艳
- 关键词：荧光素酶SPC-A-1细胞移植瘤活体成像
- 荧光素酶标记的肺癌细胞系的建立及动物模型验证被引量：3
- 2011年
- 目的建立一株稳定表达萤火虫荧光素酶的人肺癌细胞系并通过裸鼠成瘤模型进行验证。方法酶切并连接萤火虫荧光素酶基因到真核表达载体pRc/CMV2上构建pRc/CMV2-luc重组质粒,脂质体2000转染到肺癌细胞株A549,经G418筛选得到抗性克隆,荧光素酶活性检测筛选出荧光素酶活性最高的稳定细胞克隆。小动物活体影像系统检测确定稳定细胞克隆生物发光能力和细胞数量的关系,建立裸鼠皮下成瘤模型并分析移植瘤的发光强度和肿瘤生长的相关性。结果重组质粒pRc/CMV2-luc转染A549细胞后,经G418筛选的抗性克隆传代至40代时,确定3株荧光素酶活性较高的阳性克隆,最高的9号克隆,1×105个细胞的RLU值为9.44×105。小动物活体影像系统检测发现阳性克隆的发光强度与细胞数量呈正相关(R2=0.99);9号克隆皮下接种裸鼠形成接种瘤,其发光强度与肿瘤的生长正相关。结论成功构建了稳定表达萤火虫荧光素酶的A549细胞系,该细胞系可在小鼠活体水平动态监测其发生、发展。
- 刘启才郑国兵李晓艳彭燕张金栋周问渠李冰
- 关键词：荧光素酶肺癌细胞A549
- 利用荧光素酶标记的肿瘤细胞建立活体成像动物模型被引量：6
- 2013年
- 目的建立稳定表达荧光素酶的人乳腺癌细胞株并构建适用于小动物活体成像系统观察的裸鼠皮下移植瘤模型。方法采用脂质体将携带荧光素酶基因的质粒转染到人乳腺癌细胞株MCF-7中,G418筛选出稳定表达荧光素酶的单克隆细胞株。扩增后接种于裸鼠,建立裸鼠皮下移植瘤模型,通过活体动物成像系统监测肿瘤的生长过程。结果获得了高水平稳定表达荧光素酶的乳腺癌单克隆细胞株,该单克隆细胞株与母细胞系MCF-7具有相似的生长特性。将稳定表达荧光素酶的克隆接种于裸鼠皮下可成瘤,小动物活体成像系统能准确监测肿瘤细胞在体内的生长过程。结论成功建立了稳定表达荧光素酶的乳腺癌单克隆细胞株。采用活体动物成像系统构建的裸鼠皮下移植瘤模型是拓展肿瘤体内生长、转移及治疗相关研究的理想模型。
- 张绘宇郑国兵张金栋刘启才
- 关键词：荧光素酶生物发光移植瘤活体成像裸鼠
- 稳定沉默细胞周期素依赖性激酶-8基因抑制结肠癌细胞SW480生长的研究被引量：1
- 2013年
- 目的 观察细胞周期素依赖性激酶-8（CDK8）基因的稳定沉默对SW480增殖及生长的影响,并探讨其机制.方法 慢病毒感染SW480后筛选出单克隆；荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测基因表达；噻唑蓝（MTT）比色法和裸鼠成瘤检测细胞的增殖和移植瘤的生长；流式细胞术分析细胞周期和凋亡.结果 CDK8基因沉默组细胞培养4d后的生长抑制率为NC对照组的39.6％,裸鼠移植瘤的体积比NC对照组减小86.8％；CDK8基因沉默组细胞的凋亡率和G0/G1期细胞百分率分别为6.55％和56.46％；显著高于NC对照组（P＜0.05）.结论 CDK8基因稳定沉默能显著抑制SW480细胞的增殖和移植瘤的生长,细胞凋亡及细胞周期阻滞与CDK8沉默效应有关.
- 剧永乐张金栋朱达坚耿岩陈小伍刘启才
- 关键词：结肠癌慢病毒载体基因沉默
- 慢病毒介导的CDK8基因的稳定沉默抑制结肠癌细胞生长
- 研究目的： 探讨慢病毒介导的CDK8基因的稳定沉默在体外和活体水平对结肠癌细胞生长的影响，并阐明其分子机制。 方法: 1.表达luciferase的结肠癌细胞株的构建 将PRC/CMV2-luc真核表达质粒转染S...
- 张金栋
- 关键词：结肠癌分子机制慢病毒
- 文献传递
