张洁琼
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金吉林省科技厅科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- P53在电离辐射诱导的细胞周期解耦联中的作用
- 2008年
- 目的探讨p53基因在电离辐射（IR）诱导的MCF-7细胞周期解耦联中的作用。方法构建RNAi表达载体，经磷酸钙共沉淀法转染293T细胞形成病毒包装颗粒，感染MCF-7后采用Western blot检测P53蛋白的表达，建立p53基因沉默模型。将p53野生型（＋／＋）和沉默模型（-／-）经电离辐射处理后，采用流式细胞术分别测定细胞周期并分析细胞多倍体的变化。结果与p53^＋/＋组比较，p53^-/-模型组G0/G1期细胞百分数减少，S期、G2期增加（P〈0．01），倍体分析表明二倍体数减少，四倍体、八倍体均增加（P〈0．01）。在p53^＋/＋和p53^-/-细胞中，与假照射组比较，4Gy照射后G0／G1期、S期细胞百分数减少，而G2期增多（P〈0．01）；倍体分析表明，照射后二倍体数减少，四倍体、八倍体均增加（P〈0．01）。与p53^＋/＋IR组比较，p53^-/-＋IR组发生G0／G1期、S期细胞百分数减少，G2＋M期增多（P〈0．01），二倍体数减少，四倍体增多（P〈0．01），八倍体无明显差别。结论电离辐射可以诱导细胞发生G2期阻滞和细胞周期解耦联；P53在电离辐射诱导的MCF-7细胞G2期阻滞中发挥作用，而在细胞周期解耦联中可能不发挥作用。
- 马淑梅吴丽珉刘扬施丹易贺庆张洁琼汪海娇刘晓冬
- 关键词：P53基因RNA干扰电离辐射
- 电离辐射作用后p53对核仁素的调控作用研究
- 2008年
- 核仁素（Nucleolin），是细胞核仁中的一种磷酸化蛋白，主要定位于真核细胞核仁的颗粒区和致密纤维组分。研究发现Nucleolin除了在核仁中发挥作用外，还具有在核仁、细胞核、细胞质之间穿梭的特性。文献报道，电离辐射和抗肿瘤药物喜树碱可以使Nucleolin活化，Nucleolin和p53可以在体外直接相互作用，Nucleolin的穿梭功能依赖于p53和应激条件。
- 赵银龙马淑梅罗云霄刘扬张洁琼易贺庆施丹刘晓冬
- 关键词：电离辐射核仁素P53磷酸化蛋白抗肿瘤药物
- HCT116-p53^(-/-)细胞中p53基因突变子模型的建立
- 2008年
- 目的:合成p53基因突变子及构建真核表达载体,并在HCT116-p53-/-细胞中建立248W和273H突变子表达模型,为研究p53突变子在肿瘤发生中的作用及通过封闭p53突变子的方法进行肿瘤基因治疗提供实验基础。方法:以野生型p53基因为模板,采用引物重叠PCR定点突变技术,合成p53基因248W和273H突变子,并利用基因重组技术构建出表达载体,用脂质体转染法建立模型,Western blotting检测p53突变子蛋白。结果:经基因测序后证实第248位密码子由精氨酸(CGG)突变为色氨酸(TGG),第273位密码子由精氨酸(CGT)突变为组氨酸(CAT),说明成功合成p53突变子,构建的表达载体转染HCT116细胞后,经Western blotting检测,以特异表达条带与内参GAPDH的比值做为相对值进行半定量比较,特异蛋白表达显著升高,证实模型建立成功。结论:通过引物重叠PCR定点突变技术成功构建p53基因248W和273H突变子,并在HCT116细胞中成功表达。
- 马淑梅汪海娇刘扬张洁琼施丹易贺庆吴丽珉刘晓冬
- 关键词：基因P53定点诱变BLOTTING
