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张曼
作品数:
4
被引量:7
H指数:2
供职机构:
北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
胡美浩
北京大学生命科学学院蛋白质工程...
隋广超
北京大学生命科学学院
陈来同
北京大学生命科学学院
黄春媚
北京大学生命科学学院
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北京大学
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胡美浩
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张曼
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黄春媚
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陈来同
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北京大学学报...
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中国生物化学...
年份
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1999
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1996
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去B链羧端三肽人胰岛素的分离纯化及其性质研究
被引量:5
1996年
将去B链羧端三肽人胰岛素原基因克隆到表达质粒pBV220上,在大肠杆菌系统中经温度诱导表达,表达产物占细胞总蛋白量的12%,表达产物经SephadexG-50柱层析分离以及胰蛋白酶和羧肽酶B的酶促转化等步骤,可得到去B链羧端三肽人胰岛素,其纯度达93%,其氨基酸组成与预期值相符,但其受体结合活性仅是标准猪胰岛素的45%.
陈来同
黄春媚
张曼
杨志茹
胡美浩
关键词:
胰岛素
人胰岛素
提纯
纤溶酶原激活物抑制因子-1突变体E350G,E351K的构建及性质研究
1996年
利用PCR扩增和合成突变引物的方法,将PAL-1的Glu350和Glu351分别突变为Gly和Lys,在大肠杆菌中表达并分离纯化突变体PAL-1(E350G,E351K),用盐酸胍激活并以ELISA法确定它与野生型rPAI-1的相对含量。通过对u-PA,t-PA抑制的动力学研究表明,突变体与野生型rPAI-1相比,对u-PA和t-PA的抑制活性都有明显下降,由活性态向潜伏态转变的半寿期也由0.83h缩短为0.57h。
隋广超
张曼
胡美浩
关键词:
PAI-1
纤溶酶原激活物
突变体
重组抗人活化血小板单链抗体-尿激酶原导向溶栓剂的基因构建及表达
被引量:2
1999年
为了获得特异性高的导向溶栓药物,应用PCR技术,得到抗人活化血小板单抗(SZ-51)的Fab′基因片段。再用酶切方法,将Fab′中CH1基因片段替换成合成的连接分子(linker)基因,构建成单链抗体基因,并插入到人尿激酶原分泌肽基因及低分子量单链尿激酶(scu-PA-32k)之间,最终构建成重组抗人活化血小板单链抗体-尿激酶原融合蛋白基因。此融合蛋白基因在昆虫细胞中得到表达。纯化的表达产物SDS-PAGE鉴定,其分子量约为60kD,与预期值相符。其比活为9000IU/mg蛋白。ELISA法初步证明此重组的融合蛋白具有与活化血小板抗原结合特异性。
张曼
方巧君
胡美浩
关键词:
血小板
单链抗体
尿激酶原
重组PAI-1在大肠杆菌中表达条件的研究及其对t-PA,u-PA抑制的分析
1996年
带有表达质粒pBV220/PAI-1的大肠杆菌中,在菌体密度为A600nm=0.3~0.4时诱导,表达重组PAI-1(rPAI-1)的效率最高。在诱导后的6h以内,rPAI-1的百分含量持续升高。rPAI-1经分离纯化并用盐酸胍激活后,能够与t-PA及u-PA反应。
隋广超
张曼
胡美浩
关键词:
抑制活性
纤溶酶原激活物
T-PA
U-PA
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