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张昆丽

作品数：8 被引量：24H指数：4
供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
发文基金：广西特聘专家专项经费资助项目国家自然科学基金广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 7篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 7篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 6篇荧光
  • 6篇荧光定量
  • 6篇病毒
  • 5篇禽呼肠孤病毒
  • 5篇转录
  • 5篇细胞
  • 5篇呼肠孤病毒
  • 4篇SPF鸡
  • 3篇实时荧光
  • 3篇实时荧光定量
  • 3篇转录水平
  • 3篇细胞因子
  • 2篇荧光定量PC...
  • 2篇实时荧光定量...
  • 2篇基因
  • 2篇鸡胚
  • 2篇鸡胚成纤维
  • 2篇鸡胚成纤维细...
  • 2篇白细胞
  • 2篇白细胞介素

机构

  • 8篇广西大学
  • 2篇广西兽医研究...

作者

  • 8篇张昆丽
  • 2篇罗思思
  • 2篇邓显文
  • 2篇范晴
  • 2篇谢芝勋
  • 2篇谢丽基
  • 2篇谢志勤
  • 1篇刘加波
  • 1篇庞耀珊
  • 1篇黄莉
  • 1篇滕丽琼
  • 1篇刘家波

传媒

  • 2篇南方农业学报
  • 1篇中国兽医学报
  • 1篇动物医学进展
  • 1篇畜牧兽医学报
  • 1篇中国畜牧兽医
  • 1篇中国兽医科学

年份

  • 3篇2015
  • 3篇2014
  • 2篇2013
共 8 条 记 录，以下是 1-8
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排序方式：
禽呼肠孤病毒感染SPF鸡后免疫器官中IL-18的定量检测被引量：1
2015年
【目的】掌握禽呼肠孤病毒(ARV)感染SPF鸡后免疫器官中白细胞介素18(IL-18)的相对动态转录时相,为揭示ARV的致病机制奠定基础。【方法】利用鸡IL-18实时荧光定量PCR检测分析ARV感染对SPF鸡免疫器官中IL-18m RNA动态转录水平的影响。【结果】SPF鸡感染ARV后,免疫器官发育不良,其脾脏、胸腺、法氏囊重量均低于对照组。与对照组相比,除感染后21 d的胸腺、法氏囊和35 d的脾脏、胸腺中IL-18表达下调外,其他时间点免疫器官中的IL-18均表达上调,且都在ARV感染后第1 d达峰值,上调倍数分别为3.59(脾脏)、7.99(胸腺)和8.35(法氏囊)倍。【结论】ARV感染可导致IL-18转录时相发生变化,推断IL-18与ARV对免疫器官的损伤与免疫抑制相关。
张昆丽谢芝勋黄莉谢丽基刘家波邓显文谢志勤范晴罗思思
关键词：禽呼肠孤病毒SPF鸡IL-18转录水平实时荧光定量PCR
鸡IL-6、IL-17和IFN-γ实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：7
2013年
【目的】建立针对鸡白介素6(IL-6)、白介素17(IL-17)和γ干扰素(IFN-γ)的实时荧光定量PCR检测方法,为细胞因子的定量检测及病毒致病机制的研究奠定基础。【方法】根据GenBank已发表的鸡IL-6、IL-17、IFN-γ和3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因保守序列,设计并合成4对相应的特异性引物,以鸡胚成纤维细胞的cDNA为模板构建重组质粒,对退火温度、引物浓度等SYBR Green I实时荧光定量PCR反应条件进行优化,建立各基因的标准曲线,并进行特异性、敏感性、重复性试验。【结果】GAPDH、IL-6、IL-17和IFN-γ的SYBR Green I实时荧光定量PCR扩增效率分别是98.2%、99.2%、102.0%和100.8%,相应的标准误差为0.00666、0.00813、0.00365和0.00458。特异性试验结果显示各基因的溶解曲线均呈单一溶解峰,敏感性试验结果表明各基因的检测下限均为100拷贝,重复性试验结果表明组内变异系数均小于2.00%。【结论】建立的SYBR Green I实时荧光定量PCR具有敏感性高、重复性好、特异性强等特点,为快速检测和定量鸡源IL-6、IL-17和IFN-γ的表达水平提供了技术平台。
张昆丽谢芝勋滕丽琼谢丽基刘加波范晴庞耀珊罗思思谢志勤邓显文
关键词：IL-6IL-17IFN-Γ实时荧光定量PCR
禽呼肠孤病毒感染鸡胚成纤维细胞后三种细胞因子基因mRNA转录水平的动态变化被引量：3
2014年
为了分析禽呼肠孤病毒(ARV)S1133株感染鸡胚成纤维细胞(CEF)对细胞产生的细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的影响,并探讨禽呼肠孤病毒的感染机制及病毒与宿主之间的作用关系,运用实时荧光定量RT-PCR技术,测定和分析了ARV-S1133感染CEF细胞后ARV结构蛋白σC和IL-1β、IL-6、TNF-α的动态转录水平。结果显示,ARV-S1133感染CEF后第10小时起病毒σC基因mRNA的相对表达量开始迅速上升,在第48小时达到最高峰(13 162.73倍);ARV-S1133感染后引起CEF中IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达量发生变化,这3个基因mRNA的表达变化趋势相似。IL-1β、IL-6、TNF-α基因mRNA转录水平在感染早期迅速上升,在感染后第6小时达到第1个峰值,随后下降,在感染中后期再次显著上升,在第48小时达到第2个峰值。IL-1β、IL-6、TNF-α在感染后第6、24、36和48小时的mRNA转录水平与对照组差异极显著(P<0.01)。结果表明,ARV感染后可诱导CEF分泌IL-1β、IL-6、TNF-α的水平上调,进而发生炎症反应,说明IL-1β、IL-6、TNF-α可能与禽呼肠孤病毒的复制和致病机制相关。
张昆丽谢芝勋黄莉谢丽基刘家波邓显文谢志勤范晴罗思思
关键词：禽呼肠孤病毒白细胞介素1Β白细胞介素6实时荧光定量RT-PCR
禽呼肠孤病毒感染对体外细胞和SPF鸡细胞因子mRNA转录影响的初步研究
禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)是重要的家禽病原体之一,主要感染鸡和火鸡,引起鸡病毒性关节炎、矮小综合征、呼吸障碍综合征、免疫抑制等,给全球养禽业造成巨大的经济损失。但目前关于ARV主要的研究方向是病...
张昆丽
关键词：禽呼肠孤病毒细胞因子荧光定量PCRMRNA转录
文献传递
鸡白细胞介素1β、白细胞介素18、肿瘤坏死因子α基因荧光定量PCR检测方法的建立被引量：7
2013年
本研究根据GenBank上公布的鸡白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因序列,在保守区域各设计合成1对特异性引物,以鸡胚成纤维细胞的cDNA为模板构建重组阳性质粒。采用梯度稀释重组标准品质粒DNA,构建SYBR GreenⅠ染料法荧光定量PCR标准曲线。结果显示,各基因的熔解曲线均呈单一熔解峰,IL-1β、IL-18、TNF-α和GAPDH的扩增效率分别是101.2%、95.6%、100.1%和98.2%,相关系数分别为0.9996、0.9998、0.9957和0.9989。敏感性试验结果表明,该检测方法在35个Ct值内可检测到100个模板拷贝数;重复性试验结果表明,组内变异系数均小于1.4%。本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法可用于鸡IL-1β、IL-18和TNF-αmRNA的检测,为导致免疫抑制性疾病病毒感染宿主细胞后细胞因子表达的定量分析奠定基础。
张昆丽谢芝勋滕丽琼刘加波谢丽基庞耀珊范晴邓显文罗思思谢志勤
关键词：白细胞介素1Β白细胞介素18肿瘤坏死因子Α
禽呼肠病毒感染对SPF鸡外周血T细胞亚型变化和细胞因子转录的影响被引量：4
2015年
为探讨禽呼肠病毒(ARV)对SPF鸡外周血淋巴细胞中CD4+、CD8+T细胞数量变化和细胞因子mRNA转录水平的影响,利用流式细胞术和实时荧光定量PCR方法分别测定了ARV感染后1、7、14、21、28、35d感染组和对照组SPF鸡外周血淋巴细胞中CD4+、CD8+T细胞含量和细胞因子IL-1β、IL-6、IL-17、IL-18、IFN-γ、TNF-α基因mRNA相对转录时相。流式细胞术检测结果表明,SPF鸡感染ARV后7d和14dCD4+、CD8+T细胞比值高于对照组,其中感染7d,CD8+T细胞含量差异显著(P<0.05);感染后1、21、28、35d感染组CD4+、CD8+T细胞比值均低于对照组,感染1d后CD4+、CD8+T细胞含量均差异显著(P<0.05),说明外周血T细胞亚型变化是ARV感染的重要表现之一。实时荧光定量PCR结果表明,与对照组相比,感染组外周血淋巴细胞中IL-1β、IL-6(除7d外)、IL-18(除14d外)和TNF-α在整个感染过程中表达上调,IL-17和IFN-γ除感染1d外,均表达下调,说明IL-1β、IL-6、IL-17、IL-18、IFN-γ和TNF-α均参与了ARV的感染进程。
张昆丽谢芝勋黄莉谢丽基刘加波邓显文谢志勤范晴罗思思
关键词：禽呼肠病毒转录水平流式细胞术外周血淋巴细胞
禽呼肠孤病毒感染鸡胚成纤维细胞后IL-17、IL-18和IFN-γ mRNA转录水平的动态变化被引量：4
2015年
为了分析禽呼肠孤病毒(avian reovirus,ARV)S1133株感染鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibroblast,CEF)后,对其细胞因子IL-17、IL-18和IFN-γmRNA转录水平的影响,探讨禽呼肠孤病毒感染机制和宿主之间的作用关系。本试验将ARV-S1133感染CEF细胞后,运用荧光定量PCR技术,测定和分析ARV结构蛋白σC和CEF细胞的IL-17、IL-18及IFN-γ的mRNA动态转录水平。结果表明,ARV-S1133感染CEF细胞10h后病毒结构蛋白σC mRNA的相对表达量开始迅速上升,在48h达到最高峰(13 162.73倍);ARV-S1133感染后引起CEF细胞中的IL-17、IL-18和IFN-γmRNA表达量发生变化,IL-17和IFN-γmRNA转录水平在感染早期迅速上调,感染后6h达到第一个峰值,分别上调8.77倍和11.17倍,随后下降,在感染36、48、60h后大幅度上升,且在48h达到峰值,表达量分别为97.19倍和111.58倍。IL-18mRNA转录水平在整个感染过程中表达量较低,在感染6h后微量上调(1.39倍),在感染中后期,其表达量呈下调趋势,感染48h时,IL-18mRNA表达量最低,与对照组相比下调0.19倍;5个不同滴度的ARV病毒感染CEF细胞24h后,3个细胞因子mRNA的表达量与病毒滴度线性相关,IL-17和IFN-γmRNA转录水平与病毒滴度正相关,IL-18mRNA转录水平与病毒滴度负相关。结果表明,ARV感染后可诱导CEF分泌IL-17、IL-18、IFN-γ的mRNA转录水平上调,说明IL-17、IL-18、IFN-γ可能与禽呼肠孤病毒的复制和致病机制相关。
张昆丽谢芝勋黄莉谢丽基邓显文谢志勤刘家波范晴罗思思
关键词：禽呼肠孤病毒IL-17IL-18IFN-Γ转录水平
禽呼肠孤病毒感染对SPF鸡跗关节细胞因子mRNA转录的影响被引量：4
2014年
禽呼肠孤病毒(ARV)是威胁全球肉鸡生产的重要致病性病原之一,感染后引起鸡的病毒性关节炎和免疫抑制等,给全球肉鸡产业带来重大的经济损失。本研究用ARV标准强毒株S1133经足垫注射感染7日龄SPF鸡,在感染后1、7、14、21、28、35d分别采集对照组和试验组各3只SPF鸡跗关节,并测定IL-1β、IL-6、IL-17、IFN-γ和TNF-α基因的相对转录动态,初步探讨ARV感染对鸡跗关节中上述细胞因子mRNA转录时相的影响,为阐明ARV感染的致病机制研究奠定基础。结果表明,ARV感染可引起跗关节中上述细胞因子在不同时间点相对转录量上调,且在整个感染过程中具有持续性上调趋势,其中感染21、28、35d后,IL-1β、IL-6、IL-17、IFN-γ、TNF-α的相对转录量与对照组相比显著上调(P<0.01),且IL-1β、IL-6、IL-17、IFN-γ呈逐渐上调趋势,表明IL-1β、IL-6、IL-17、IFN-γ、TNF-α参与了ARV感染对鸡跗关节的损伤过程,本研究结果为进一步阐明禽呼肠孤病毒的致病机理奠定了基础。
张昆丽谢芝勋黄莉谢丽基刘加波邓显文谢志勤范晴罗思思
关键词：禽呼肠孤病毒SPF鸡细胞因子跗关节荧光定量PCR
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