康铁利
- 作品数：10 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 艾塞那肽对大鼠胰岛β细胞瘤细胞株RIN-m5F葡萄糖激酶和葡萄糖转运蛋白2表达的影响
- 2015年
- 葡萄糖激酶（GK）和葡萄糖转运蛋白2（Glut2）作为葡萄糖“感受器”,通过调节胰岛素释放来调控血糖变化[1].艾塞那肽是胰高血糖素样肽1（GLP-1）的类似物,有报道其可保持胰岛细胞正常形态和功能、抑制凋亡、增加胰岛细胞数量并促进胰岛细胞葡萄糖依赖的胰岛素释放[2].本实验旨在观察艾塞那肽对RIN-m5F细胞胰岛素分泌功能和GK、Glut2 mRNA表达水平的影响.
- 康铁利张城硕孙宁于瑞赵博超张佳林
- 关键词：葡萄糖转运蛋白2胰高血糖素样肽葡萄糖激酶瘤细胞株胰岛素分泌功能胰岛素释放
- 雷帕霉素对肝移植受者外周血CD4+CD25highFoxp3+T细胞数量和功能的影响
- 目的研究表明CD4+CD25+调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)介导的免疫调节在诱导移植物免疫耐受中起重要作用。Tregs能下调机体对同种异体抗原的免疫应答。Tregs细胞在维持外周免疫耐受及稳...
- 张佳林褚志强李晓航张城硕李乐康铁利程颖刘永锋
- 肝移植术前择期肝动脉化疗栓塞术对肝细胞癌患者预后影响的系统评价
- 目的评价肝移植术前择期肝动脉化疗栓塞术(TACE)对肝细胞癌(HCC)患者预后的影响,以期为临床决策提供依据。方法检索EMBASE,Cochrane图书馆和PubMed,并辅以文献追溯、手工检索等方法收集2012年5月前...
- 张佳林周轶李晓航张城硕李乐康铁利
- Cre/LoxP系统联合SV40 LTag诱导可复性永生化大鼠皮肤成纤维细胞系的建立被引量：2
- 2011年
- 目的探索可复性永生化大鼠皮肤成纤维细胞的建立方法。方法采用胰酶消化法分离培养大鼠皮肤成纤维细胞;逆转录病毒载体(SSR69)转染成纤维细胞,筛选稳定表达SV40 LTag的永生化成纤维细胞;用表达Cre重组酶的腺病毒感染永生化成纤维细胞,筛选获得回复后成纤维细胞。对原代、永生化及回复后成纤维细胞,倒置显微镜下观察细胞生长状态;采用细胞生长曲线法测定细胞增殖能力。免疫荧光染色检测Vimentin在原代及永生化成纤维细胞中的表达情况,平板克隆实验评价回复后成纤维细胞的致瘤性。结果提取了大鼠皮肤成纤维细胞,并筛选出表达SV40 LTag的永生化成纤维细胞,二者形态无明显差异,均贴壁生长,呈长梭形或多角形,但永生化成纤维细胞体外增殖能力明显高于原代成纤维细胞(P<0.05),在体外培养传代>25代。细胞免疫荧光提示两种细胞均在细胞质内表达Vimentin。回复后成纤维细胞不表达SV40 LTag,其体外增殖能力与原代细胞无明显差异(P>0.05),无致瘤性。结论应用Cre/LoxP系统联合SV40 LTag可以建立可复性永生化大鼠皮肤成纤维细胞系。
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- 关键词：永生化
- 两种不同纯化大鼠胰岛细胞方法的比较被引量：2
- 2012年
- 目的比较分析OptiPrep和Ficoll两种介质纯化大鼠胰岛细胞的效果。方法将24只SD大鼠随机分成2组,采用明尼苏达大学改良方法提取大鼠胰岛细胞,消化分离胰岛细胞后,分别采用不连续密度梯度Ficoll离心法和OptiPrep离心法纯化胰岛细胞,比较纯化后胰岛细胞数量、纯度、存活率及功能,观察OptiPrep和Ficoll两种介质对大鼠胰岛细胞纯化效果的影响。结果与Ficoll组相比,OptiPrep组胰岛细胞的产量(分别为304±13.57和346±9.09)和纯度(分别为88.25%±2.22%和94.00%±0.82%)均显著增加(P<0.05);OptiPrep组与Ficoll组胰岛细胞的存活率(分别为93.50%±1.29%和91.50%±1.29%)和功能(胰岛素释放指数分别为3.04±0.05和3.02±0.06)的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 OptiPrep法纯化大鼠胰岛细胞比传统的Ficoll法更有优势,而且OptiPrep价格相对便宜,可以作为纯化大鼠胰岛的常规方法。
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- 关键词：胰岛细胞纯化
- 肝移植术前择期肝动脉化疗栓塞术对肝细胞癌患者预后影响的系统评价
- 目的 评价肝移植术前择期肝动脉化疗栓塞术(TACE)对肝细胞癌(HCC)患者预后的影响,为临床决策提供依据.方法 检索EMBASE,Cochrane图书馆和PubMed,并辅以文献追溯、手工检索等方法收集2012年5月前...
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- 1种新型功能性杂交胰岛β细胞系的建立被引量：1
- 2013年
- 目的通过应用基因转染及细胞融合技术构建永生化细胞,建立1种功能良好、无致瘤性、增殖可控的杂交胰岛β细胞系。方法通过脂质体介导逆转录病毒载体SSR69转染至原代成纤维细胞中,筛选稳定表达SV40 LTag的永生化细胞。提取大鼠胰岛,通过胰蛋白酶及DNA酶裂解成单胰岛细胞。对永生化成纤维细胞及单个胰岛β细胞进行电融合,通过有限稀释法获得杂交胰岛β细胞克隆。比较杂交及正常β细胞内胰岛素的含量及对葡萄糖刺激胰岛素释放反应。通过RT-PCR及Westernblot分析杂交胰岛β细胞中SV40 LTag、insulin、葡萄糖激酶(GK)及葡萄糖转运体-2(Glut-2)基因的表达。结果建立的永生化成纤维细胞系的增殖能力明显优于原代成纤维细胞(P<0.05)。成功获得杂交胰岛β细胞克隆,其细胞呈短梭形或扁圆形,且具有贴壁生长等特性。透射电子显微镜下可见细胞内胰岛素分泌颗粒,杂交与正常胰岛β细胞之间细胞内胰岛素含量、胰岛素释放指数及insulin、GK、Glut-2蛋白及mRNA表达水平无统计学差异(P>0.05),但2种细胞内insulin、GK、Glut-2的表达水平显著高于RIN-m5F细胞(P<0.05)。结论可通过永生化成纤维细胞及单个胰岛β细胞电融合诱导生成杂交胰岛β细胞,且杂交细胞能够对葡萄糖的变化产生应答反应。
- 李晓航张佳林李乐康铁利程颖石蕊张城硕赵宁刘永锋
- 关键词：胰岛移植永生化电融合
- Ghrelin对地塞米松诱导胰岛细胞凋亡保护作用的研究
- 目的糖皮质激素可引起糖耐量异常和胰岛素抵抗,甚至发展为类固醇糖尿病。糖皮质激素可通过cAMP/PKA信号通路、PI3K/AKT信号通路、通过调节bcl-2/bax的比率及线粒体的去极化等途径引起胰岛细胞凋亡。地塞米松是否...
- 张佳林李乐张城硕康铁利程颖石蕊赵宁刘永锋
- 建立新型功能性杂交胰岛β细胞系的研究
- 【目的】应用条件基因敲除技术—Cre/LoxP位点重组酶系统,联合基因转染和细胞融合技术介导细胞永生化,建立增殖可控、功能良好的杂交胰岛β细胞系,为解决胰岛β细胞短缺提供一种新的思路。【方法】提取胎鼠皮肤成纤维细胞,脂质...
- 张佳林李晓航李乐康铁利程颖石蕊赵宁刘永锋
- 胃饥饿素通过抑制丝裂原活化蛋白激酶p38拮抗地塞米松诱导胰岛β细胞凋亡被引量：1
- 2015年
- 糖皮质激素在治疗疾病的同时,也会诱导胰岛细胞凋亡,导致类固醇糖尿病的发生.近年来研究表明胃饥饿素能够促进胰岛β细胞的增殖,抑制包括细胞因子、化疗药物及高糖等条件诱导的胰岛β细胞株的凋亡[1-3].本实验旨在探讨胃饥饿素是否保护胰岛β细胞拮抗地塞米松诱导凋亡的不良反应,同时确定丝裂原活化蛋白激酶p38 （p38MAPK）通路在其中的作用.
- 张城硕李乐张佳林李鑫康铁利程颖刘永锋
- 关键词：丝裂原活化蛋白激酶P38胰岛Β细胞凋亡地塞米松诱导饥饿拮抗类固醇糖尿病
