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宋杰: 作品数：23 被引量：100H指数：5; 供职机构：河北师范大学生命科学学院更多>>; 发文基金：石家庄市科技局科技攻关项目河北省科技攻关计划河北省自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生自然科学总论更多>>

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中华鳖常见疾病的诊断及其综合防治被引量：18: 2009年; 结合常见的鳖病病原、病症,对PCR、核酸杂交及ELISA等快速诊断技术进行分析,寻找适合中华鳖病原的早期预警方法,进而探讨优良的中华鳖养殖管理模式及鳖病的综合防治方法,以期应用于生产,促进养鳖业的快速发展。; 钱明明宋杰武斌王海静赵宝华; 关键词：中华鳖病原

ILTVgB基因重组BCG菌株的构建及其免疫原性被引量：1: 2009年; gB基因是传染性喉气管炎病毒(ILTV)的主要保护性抗原基因,本试验以ILTV基因组为模板,利用PCR特异扩增出gB基因,将其连接到含有人结核分枝杆菌启动子hsp70基因和堪萨斯分枝杆菌α信号肽基因的表达载体pRR3上,从而构建了大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pR-α-gB,再电转化至BCG中,形成重组菌株rBCG-gB。热激后gB蛋白在耻垢分枝杆菌M.smegmatismc2155中高效表达,并且通过ELISA和Western blotting检测能够被抗ILTVgB蛋白的单克隆抗体识别。将106CFU的重组菌株rBCG-gB皮下注射免疫3周龄的SPF鸡,分别测定了淋巴细胞指数(SI)、吞噬细胞的吞噬能力以及血清中IL-2和IFN-γ的水平,结果表明重组菌株rBCG-gB作为载体疫苗具有较强的免疫反应。动物保护试验结果表明,重组菌株rBCG-gB对鸡具有一定的免疫保护效果,能够保护SPF鸡抵抗ILTV强毒株的攻击,血凝抑制试验表明血凝抑制抗体滴度能够显著增加。; 宋杰苏钢裴艳涛赵宝华; 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒免疫原性

从动物组织中提取病毒基因组RNA的方法: 本发明公开了一种从动物组织中提取单链RNA病毒基因组的方法，包括以下步骤：(1)组织匀浆取病变组织剪碎后加入无菌水，匀浆器内高速匀浆至单细胞悬液；(2)细胞裂解、病毒释放将所得单细胞悬液反复冻融、超声破碎，使细胞裂解、病...; 赵宝华宋杰黄文娟; 文献传递

河北省仔猪黄白痢流行病学调查及致病菌的分离与鉴定被引量：4: 2007年; 仔猪黄白痢是危害养猪业的一种常见疾病.通过对河北省不同地区17家猪场的走访调查,探讨仔猪黄白痢大规模爆发的原因和防治对策,并从某猪场发病仔猪的排泄物中分离得到1株菌,经形态学、生物化学和分子生物学实验鉴定,该分离株为革兰氏阴性菌,克氏三糖铁培养产酸产气,LTB与M17873核苷酸序列同源性为100%,该菌株确定为产肠毒素型大肠杆菌.; 宋杰柏佳宁赵宝华; 关键词：仔猪黄白痢伤亡率 LTB基因同源性

猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白的表达与纯化被引量：2: 2012年; 根据GenBank报道的PRRSV VR2332基因序列设计引物,经RT-PCR扩增,得到大小约为390 bp的阳性产物;利用BamHⅠ,EcoRⅠ位点将N蛋白基因片段克隆到pET-28a载体,构建原核重组表达质粒pET-N,转化BL21(DE3)并进行SDS-PAGE,Western blot分析.结果表明:克隆的N蛋白基因与GenBank报道的VR2332基因同源性为93.83%;重组菌株经IPTG诱导后,N蛋白基因得到了高效表达;经筛选得到最佳诱导条件,即1 mmol/L IPTG诱导6 h,蛋白表达量可达菌体蛋白总量的52.635%,SDS-PAGE后切胶回收可得到纯化的N蛋白,为进一步制备免疫胶体金试纸条或ELISA试剂盒提供基础.; 姚瑶宋杰赵宝华赵洪明; 关键词：N蛋白 WESTERN BLOT

表达ST1-LTB-α-β融合蛋白基因工程菌株的构建: 赵宝华王金锋徐书景田莉瑛王永鑫宋杰; 该课题采用分子生物学技术构建含有ST1-LTB-α-β融合基因的重组菌株，SDS-PAGE和Westernblot分析ST1-LTB-α-β融合蛋白的表达，对重组菌株进行甲醛灭活，免疫昆明小鼠后攻毒，分析该重组菌株的保护...; 关键词：; 关键词：分子生物学融合蛋白表达

PEPECO45Ler基因突变菌株的构建及其免疫原性研究: 赵宝华边艳青夏玉凤刘晶芝马同锁裴艳涛胡奕宋杰冯书章刘军; 该课题首先利用猪致病性大肠杆菌(PEPEC)O45的主要毒力基因表达的产物免疫小鼠，制备了多克隆抗体；然后根据同源重组原理，利用自杀性载体pCVD442技术，敲除了位于染色体上的ler基因；构建了PEPEC1er基因缺失...; 关键词：; 关键词：多克隆抗体基因工程弱毒疫苗

人源温和气单胞菌溶血素基因的克隆与表达被引量：4: 2008年; 根据GenBank报道的人源温和气单胞菌溶血素(hly)基因序列设计引物,经PCR扩增,得到大小约为1470 bp的阳性产物.利用BamHⅠ,HindⅢ位点将hly基因片段克隆到pMD19-T载体,构建得到重组质粒pWT-hly,并比较所克隆基因序列的同源性.然后将该基因克隆到原核表达载体pET-28a,构建原核重组表达质粒pWET-hly,转化BL21(DE3)并进行SDS-PAGE分析.结果表明:克隆的hly基因与GenBank报道的溶血素基因同源性为96.19%;重组菌株经IPTG诱导后,hly基因得到了高效表达.; 武斌于宙亮于珊水小溪宋杰赵宝华; 关键词：温和气单胞菌溶血素基因克隆

褐牙鲆腹水症病原菌的分离鉴定及其灭活疫苗的研制被引量：5: 2009年; 从患腹水病褐牙鲆体内分离致病菌,通过生理生化和分子生物学方法进行鉴定;该菌的16SrDNA序列与标准株同源性达99.8%,证明该菌为嗜水气单胞菌。制备灭活疫苗后分别注射小鼠和牙鲆,测定其免疫效果。试验结果表明,用所制备的灭活疫苗免疫小鼠,其保护率达到90%,免疫牙鲆的保护率达到80%;采用渗透压差法浸泡免疫牙鲆在攻毒后发病率仅为6%,攻毒后保护率为85%;通过间接ELISA检测表明受免动物体内产生了较高水平的抗体;剖检及病理切片结果表明免疫过的动物内脏健康无异样,而未免动物肝脏充血,肠腔有积水。说明该疫苗安全有效。; 孙祎敏李楠宋杰李晓玥申红旗王风敏李全振曹杰英赵宝华; 关键词：褐牙鲆腹水症嗜水气单胞菌 ELISA 灭活疫苗