孙铁成
- 作品数：9 被引量：19H指数：3
- 供职机构：国家人口计生委科学技术研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家社会公益研究专项计划河北省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种检测前列腺癌的ELISA试剂盒
- 本发明采用双向电泳方法比较了前列腺增生细胞BPH-1、雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP及雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3三种细胞蛋白的组成。通过经质谱分析及数据库检索，确定2个差异蛋白GRP78和Annexin A2...
- 王慧萍宁丽峰周越辛玲孙铁成于和鸣
- 侧脑室微量注射瘦素对OEP大鼠子宫腔液蛋白表达的影响
- 2010年
- 目的:探讨瘦素通过下丘脑-垂体轴对子宫的调节作用。方法:应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离OEP大鼠侧脑室微量注射瘦素及生理盐水6h后的子宫腔液总蛋白,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对差异表达的蛋白质点进行鉴定。结果:与生理盐水对照组相比,瘦素实验组有6个差异表达蛋白质,其中5个蛋白点升高,1个蛋白点降低。经过质谱分析结合数据库检索,获得有意义的蛋白点,上调蛋白点为补体B因子、冠蛋白、肌动蛋白结合蛋白、丝氨酸蛋白酶抑制剂B1、烯醇酶,下调蛋白点为补体C3。结论:这些差异表达蛋白涉及炎症反应、细胞分化、细胞迁移、细胞凋亡等功能,瘦素可能通过下丘脑-垂体轴从免疫、生殖等方面对子宫发挥调节作用。
- 程露阳董晓彤冯佩明王小强孙铁成杨松鹤乔跃兵
- 关键词：瘦素侧脑室注射双向电泳
- 瘦素经POMC神经元对神经内分泌-生殖轴的影响被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨瘦素(leptin)对神经内分泌-生殖轴的可能调节机制。方法:建立卵巢摘除补充雌激素(OEP)大鼠模型,动物随机分为leptin组、α-黑素细胞刺激素(α-MSH)组和生理盐水对照组,于侧脑室注射后1h、2h、4h和6h分别取血和脑组织。ELISA法检测血中促性腺释放激素(Gn-RH)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)浓度。Western印迹检测下丘脑组织中阿片促黑激素皮质素原(POMC)蛋白量的变化。结果:侧脑室注射leptin可促进GnRH、FSH、LH的分泌,而注射α-MSH则抑制GnRH、FSH和LH的分泌。注射leptin显著增加下丘脑中的POMC含量。结论:Leptin可能通过POMC神经元或与其他途径共同影响下丘脑-垂体生殖轴的分泌功能;POMC神经元发挥的调节作用可能晚于或弱于其它神经元。
- 杨松鹤赵连志王小强孙铁成程露阳乔跃兵
- 关键词：侧脑室注射瘦素Α-黑素细胞刺激素
- 一个未知的子宫雌激素反应蛋白ULF-250的鉴定被引量：4
- 2009年
- 鉴定一个未知的子宫雌激素反应蛋白ULF-250.去卵巢大鼠补充给予雌二醇造成子宫产生大量宫腔液(uterine luminal fluid,ULF),受雌激素调节的蛋白分泌其中.收集ULF分别进行SDS-PAGE和双向电泳(2-DE)分离;通过Western印迹和2D-Western确认抗ULF-250抗体识别的蛋白成分并与凝胶上的条带或斑点相对应;对目标蛋白分别用MALDI-TOF-MS和HPLC-ESI-MS/MS两种方法进行质谱分析并获得肽段序列数据;与蛋白数据库比对及文献检索鉴定未知蛋白.2D-Western显示抗ULF-250抗体特异识别的蛋白成分.从2D胶上切下对应的蛋白斑点进行MALDI-TOF-MS,结果提示:ULF-250是ebnerin/DMBT1.经SDS-PAGE分离的250 kD蛋白条带进行液-质联用分析,结果同样提示:ULF-250是ebnerin/DMBT1.与文献报道比较,ULF-250与ebnerin/DMBT1在子宫的组织定位和调节是相同的,认为ULF-250是子宫表达的ebnerin/DMBT1.通过2-DE结合质谱分析以及查阅文献,确认未知的雌激素反应蛋白ULF-250是ebnerin/DMBT1.此外,研究提示,该蛋白不仅在子宫上皮细胞表达而且分泌到子宫腔液中,其功能值得进一步研究.
- 程露阳杨松鹤孙铁成王小强胡玮齐晓伟于和鸣
- 关键词：双向电泳质谱
- 前列腺癌与良性前列腺增生细胞株差异核基质蛋白的鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的:鉴定人前列腺癌雄激素依赖性细胞株LNCaP、前列腺癌雄激素非依赖性细胞株PC-3与良性前列腺增生细胞株BPH-1之间差异表达的核基质蛋白(nuclear matrix proteins,NMPs)。方法:常规制备各细胞株NMPs,应用双向凝胶电泳对其进行分离;对差异表达的蛋白质点行MALDI-TOF-MS/MS质谱分析,数据库搜索并鉴定。结果:成功获得了分辨率高、重复性好的不同细胞株NMPs双向凝胶电泳图谱;初步鉴定出包含酶、调节蛋白、RNA结合蛋白及各种因子在内的12个差异表达的蛋白质,在癌细胞株中3个NMPs表达上调,9个下调。结论:人前列腺癌细胞与良性前列腺增生细胞之间NMPs表达存在明显差异;初步筛选出12个差异NMPs,其表达水平及功能与疾病的联系需进一步研究。
- 孙铁成辛玲宋黎明周越宁丽峰韩丽媛郭颖于和鸣王慧萍
- 关键词：良性前列腺增生核基质蛋白
- 一种检测前列腺癌的ELISA试剂盒
- 本发明采用双向电泳方法比较了前列腺增生细胞BPH-1、雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP及雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3三种细胞蛋白的组成。通过经质谱分析及数据库检索，确定2个差异蛋白GRP78和Annexin A2...
- 王慧萍宁丽峰周越辛玲孙铁成于和鸣
- 文献传递
- 双向电泳分离大鼠子宫组织提取物的最佳条件摸索
- 2010年
- 目的:建立并优化大鼠子宫组织提取物的双向电泳分离条件。方法:机械匀浆法制备子宫组织总蛋白提取物,采用不同方法处理样品及不同pH范围的固相梯度胶条进行双向电泳分析。结果:经丙酮沉淀处理的提取物在pH 5～8范围的固相梯度胶条进行双向电泳分离,可获得分辨率清晰和重复性较好的二维图谱。特别是在高分子量蛋白区域得到独立清晰的蛋白质斑点。结论:通过建立并优化双向电泳分离条件,为进一步分析生理与病理状态的子宫蛋白成分提供了技术支持。
- 程露阳杨松鹤孙铁成王小强于和鸣
- 关键词：子宫提取物双向电泳
- 过氧化物酶6在大鼠附睾中的表达及分布被引量：7
- 2010年
- 通过双向电泳结合质谱技术分离鉴定正常成年大鼠附睾头段与尾段管腔液中的蛋白组成,从附睾头段及尾段管腔液的22个差异蛋白点中鉴定出12个蛋白质.其中11个蛋白质在不同种属哺乳动物的附睾组织中已有鉴定报道,而过氧化物酶6(peroxiredoxin 6,Prdx6)为新发现的存在于附睾头段及尾段管腔液中的体液蛋白.采用RT-PCR、Western印迹及免疫组化技术,对该蛋白在大鼠附睾中的表达及分布进行了分析.实验表明,Prdx6与精子的成熟、贮存及保护有一定关系,其具体机制值得进一步深入研究.
- 王小强齐晓伟程露阳孙铁成舒如明王慧萍于和鸣
- 关键词：附睾双向电泳质谱
- 膜联蛋白A2和葡萄糖调节蛋白78表达与前列腺癌的关系被引量：1
- 2012年
- 目的分析膜联蛋白A2(Annexin A2)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)分别在人前列腺增生细胞系(BPH-1)、雄激素非依赖性前列腺癌细胞系(LNCaP)和雄激素依赖性前列腺癌细胞系(PC-3)中的差异表达。方法利用双向凝胶电泳结合质谱的蛋白质组学技术,分析Annexin A2和GRP78在三种细胞系的表达;分别采用免疫印迹法和免疫荧光染色法对其进行半定量和定位验证。结果 Annexin A2在BPH-1和LNCaP中低表达,在PC-3细胞中高表达;GRP78在PC-3、BPH-1及LNCaP中表达量逐渐升高(P<0.05)。结论 Annexin A2和GRP78的差异表达可能与前列腺癌发展的不同阶段激素依赖性有关,有望作为前列腺癌诊断和治疗的重要指标。
- 韩丽媛毛冬梅辛玲周越宁丽峰孙铁成郭颖于和鸣王慧萍
- 关键词：前列腺癌膜联蛋白A2葡萄糖调节蛋白78
