目的:探讨伴微乳头成分的肺腺癌(pulmonary adenocarcinoma with a micropapillary pattern,MPPAC)EGFR、KRAS基因突变情况及其临床病理学特征。方法:根据2011年的肺腺癌新分类诊断标准,以是否伴有微小乳头状结构(micropapillary pat tern,MPP),将144例肺腺癌病例分为MPP阳性组77例和MPP阴性组77例。MPP阳性组中又按MPP所占比例分为(+、++、+++)三亚组。RT-PCR法检测两组EGFR、KRAS基因突变情况。结果:在144例肺腺癌病例中EGFR突变62例(43.1%),KRAS突变9例(6.25%),EGFR突变与性别(P=0.018)和肿瘤体积(P=0.016)有关。MPP阳性组EGFR突变率高于MPP阴性组(P<0.001);KRAS突变率低于MPP阴性组(P=0.016)。EGFR基因突变频率在MPP三亚组中无明显不同(P=0.932)。结论:伴微乳头结构的肺腺癌EGFR突变频率高于肺腺癌其它亚型,KRAS突变频率低于肺腺癌其它亚型,说明其有独特的分子生物学特点。
目的:探讨伴微乳头成分的肺腺癌(pulmonary adenocarcinoma with a micropapillary pattern,MPPAC)上皮间质转化和增殖调亡特征,为临床评价其恶性潜能提供理论依据。方法:根据2011年发表的肺腺癌新分类诊断标准,以是否伴有微小乳头状结构(micropapillary pattern,MPP)将120例肺腺癌病例分为64例MPP阳性组,56例MPP阴性组。免疫组织化学法检测Vimentin、E-cadherin、Capase-3、pEGFR的表达。结果:120例肺腺癌病例中pECFR在女性(P=0.035)、非吸烟(P=0.017)患者中高表达。Vimentin在MPP阳性组的表达(28.1%)高于MPP阴性组(16.1%)并且其多表达于微乳头结构腔内散落的细胞;Caspase-3在MPP阳性组高表达(P=0.001)。结论:微乳头结构的腔内散落细胞表现间质表型有利于癌细胞浸润转移,伴乳头结构的肺腺癌有其独特的分子生物学特征。
目的:建立RNAi抑制柯萨奇病毒腺病毒受体(coxsackievirus and adenovirus receptor,CAR)基因表达的肺鳞状细胞癌NCI-H520稳定表达细胞系,将CAR基因沉默的NCI-H520细胞移植于裸鼠体内构建移植瘤模型,观察裸鼠体内成瘤率及对瘤体生长等方面的影响。方法:将针对CAR mRNA序列设计的小干扰RNA重组质粒分别以脂质体转染至NCI-H520细胞,并经G418抗性筛选得到稳定细胞系;用平板克隆形成实验观察RNAi抑制CAR基因表达对NCI-H520细胞增殖的影响;通过动态观察瘤体的生长,进一步验证CAR对肺癌的增殖是否有促进作用。结果:筛选出抑制CAR基因表达效果最佳的一组shRNA,并建立了能稳定而有效抑制CAR基因表达的肺鳞癌NCI-H520细胞系。平板克隆形成实验显示,shRNA-2抑制CAR基因表达后NCI-H520细胞的增殖能力有所下降,但其差异无统计学意义(P>0.05);且在肿瘤形成实验中,实验组瘤重显著低于对照组(P<0.01)。结论:裸鼠肺癌移植瘤模型构建成功,为今后肺癌的研究奠定基础。利用RNAi有效抑制了CAR基因的表达,并抑制NCI-H520细胞在裸鼠体内瘤体的生长,CAR有望成为肺癌基因治疗的靶点之一。
