孙丽娜
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 猪RBP-4基因原核表达载体的构建及表达被引量：1
- 2014年
- 为构建猪RBP-4基因原核表达载体,并在大肠杆菌中表达蛋白。取成年母猪正常卵巢组织提取总RNA,RT-PCR后回收扩增产物,构建表达载体pEASY-E1-RBP4,转化BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达。测序结果显示,RT-PCR获得的cDNA全长序列与GenBank中的序列基本一致。原核表达产物经SDS-PAGE电泳鉴定,其以包涵体形式表达。试验成功构建了猪RBP4基因原核表达载体,并在大肠杆菌中表达,为后续蛋白纯化及抗体的制备奠定基础。
- 孙丽娜李万宏陈树雄陈超陈璐李纯锦周虚
- 关键词：原核表达
- 神经生长因子对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响被引量：1
- 2014年
- 本研究旨在探索神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响。试验建立了小鼠卵巢颗粒细胞的原代培养体系,并通过免疫荧光技术对颗粒细胞进行鉴定和检测NGF及其受体在卵巢颗粒细胞上的表达,采用MTS法检测不同浓度的NGF对昆明小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响。卵巢颗粒细胞在10、50、100、500ng/mL NGF作用24h,用酶标仪测定细胞D490nm值,试验组与对照组相比均有促进增殖的影响(P<0.05),50ng/mL NGF试验组与对照组相比差异极显著(P<0.01)。结果表明,NGF在昆明小鼠的卵巢颗粒细胞中有表达,在一定浓度范围NGF可以促进卵巢颗粒细胞的增殖。
- 侯晓峰李万宏孙丽娜陈树雄陈璐李纯锦周虚
- 关键词：卵巢颗粒细胞神经生长因子增殖
- miRNA-205在猪卵母细胞成熟过程中表达规律及其调控作用的研究
- 2014年
- 本试验旨在探索miRNA-205在猪卵母细胞成熟过程中表达规律及其调控功能。应用生物学软件TargetScan和microRNA.org对miRNA-205靶基因进行预测,利用实时荧光定量PCR方法分别检测miRNA-205及其靶基因在猪卵丘卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)成熟过程中0、24和48h表达量。结果表明,miRNA-205在猪COCs成熟过程中表达呈上升趋势,0h表达量最低,48h表达量最高。添加FSH、LH和EGF的成熟液组与成熟基液组相比,miRNA-205表达量显著下调,长正五聚蛋白(PTX3)表达量极显著上调(P<0.01),PTX3与miRNA-205的表达量呈负相关,卵丘细胞扩散标记基因肿瘤致死因子(TNFAIP6)和透明质酸合成酶(HAS2)的表达量极显著上调(P<0.01)。由此推断,miRNA-205保守序列可能与PTX3基因3′-UTR区特异性结合参与卵丘细胞扩散的调控。
- 陈超李万宏孙丽娜陈树雄陈璐李纯锦周虚
- 关键词：MIRNA实时荧光定量PCR卵母细胞成熟
