- 脂质体转染细胞周期素B1反义脱氧寡核苷酸对HL60细胞增殖调控的影响被引量:2
- 2004年
- 目的 :探讨脂质体转染细胞周期素B1(cyclinB1)反义脱氧寡核苷酸 (ASON)对HL6 0细胞增殖调控的作用。方法 :用针对cyclinB1mRNA 5’端编码区起始密码子 (ATG/AUG)的ASON ,通过脂质体导入HL6 0细胞共培养后 ,用流式细胞术 (FCM)和RT -PCR分别检测cyclinB1蛋白和mRNA的表达水平 ,电镜和原位细胞凋亡检测法(POD)、FCM及DNA凝胶电泳法检测细胞凋亡。结果 :CyclinB1ASON组与SON及空白对照组相比 ,ASON能特异地抑制cyclinB1蛋白及mRNA水平的表达 ,当ASON的浓度达到一定程度时 ,HL6 0细胞的增殖及集落形成率均明显受抑制 ,出现细胞凋亡 ,并且此作用随ASON浓度的升高而增强。结论 :CyclinB1的特异ASON能封闭其蛋白及mRNA的表达水平 ,可剂量依赖性地抑制白血病细胞增殖 ,诱导细胞凋亡。
- 贾晋松徐世荣贾存荣马劼马卫东姚银荣王毅石翠英
- 关键词:细胞周期蛋白B1反义脂质体
- 自体外周血干细胞移植治疗恶性淋巴瘤1例
- 2003年
- 贾存荣刘敬闪张金彩张虹姚银荣王毅郭晓楠任金海
- 关键词:恶性淋巴瘤自体外周血干细胞移植
- 细胞周期素A的特异反义脱氧寡核苷酸对K562细胞增殖的调控作用被引量:1
- 2004年
- 目的 探讨细胞周期素A(CyclinA)的特异反义脱氧寡核苷酸 (ASON)对K5 6 2细胞增殖的调控作用。方法 采用反义技术将CyclinA特异的ASON与K5 6 2细胞共培养后 ,用台盼蓝拒染法绘制生长曲线、并做CFU K5 6 2克隆培养 ,流式细胞术进行A蛋白检测。结果 CyclinA特异的ASON组与正义脱氧寡核苷酸 (SON)组及空白对照组相比 ,能特异地抑制CyclinA蛋白水平的表达 (P <0 .0 1) ;而且当ASON的浓度达到一定程度时 ,K5 6 2细胞的增殖及集落形成率均明显受抑制 (P <0 .0 1)。结论 ASON能特异封闭CyclinA蛋白水平 ,并能抑制K5 6 2细胞的增殖 ,但有明显的浓度依赖性。
- 贾存荣徐世荣马劼史丽萍王毅姚银荣
- 关键词:细胞周期素A反义核酸白血病
- 脂质体转染细胞周期素A反义脱氧寡核苷酸对HL-60细胞增殖及凋亡的调控作用被引量:5
- 2003年
- 目的 探讨脂质体转染细胞周期素A(cyclinA)反义脱氧寡核苷酸 (ASON)对HL 6 0细胞增殖及凋亡的影响。方法 采用脂质体转染技术将cyclinAASON与HL 6 0细胞共同培养 ,用MTT法绘制细胞生长曲线 ,用电镜、细胞原位凋亡检测 (POD)等方法观察细胞凋亡 ,用流式细胞术 (FACS)及RT PCR法检测cyclinA、bcl 2表达 ,并通过裸鼠成瘤实验验证cyclinA在白血病发生中的作用。结果 脂质体转染cyclinAASON组和cyclinAASON组的HL 6 0细胞生物抑制率分别为 6 8.9%和 2 4 .8% (P <0 .0 1)。脂质体转染cyclinAASON组cyclinA及bcl 2表达水平 (1.1%和 2 1.9% )较对照组 (38.8%和6 5 .0 % )明显减低 (P值均 <0 .0 1) ,并能检测出DNA断裂 ,观察到凋亡细胞。裸鼠实验中发现脂质体转染cyclinAASON组与对照组相比 ,其成瘤率低 ,成瘤时间延长 ,同一时间成瘤的瘤体体积明显缩小。结论 脂质体转染cyclinAASON能在体外及动物体内明显抑制白血病细胞的生长 ,且有诱导细胞凋亡的作用 ,可能会成为基因治疗的一个新靶点。
- 马劼徐世荣贾存荣贾晋松王毅石翠英石万通姚银荣赖永榕
- 关键词:反义脱氧寡核苷酸HL-60细胞增殖细胞凋亡
- 三氧化二砷对HL60细胞作用后细胞周期素相关基因的表达被引量:3
- 2003年
- 目的 应用微阵列基因芯片比较三氧化二砷 (As2 O3)对HL60细胞作用后细胞周期素相关基因表达谱的变化。方法 As2 O3作用于HL60细胞 ,TRIzol试剂一步法提取作用前后HL60细胞的mRNA ,经逆转录反应 ,用Cy3标记的脱氧三磷酸尿苷 (Cy3 dUTP)和Cy5 dUTP两种不同的荧光染料将处理前后的HL60细胞mRNA分别标记成两种DNA探针 ,并与载有一组靶基因的表达谱芯片进行杂交 ,通过扫描分析筛选As2 O3作用前后HL60细胞表达有差异的基因 ;用电镜和原位凋亡检测法、流式细胞术及DNA凝胶电泳等方法检测细胞凋亡。结果 筛选出HL60细胞在As2 O3作用前后表达有差异的基因共 82条 ,主要涉及细胞周期调控类、凋亡相关蛋白及应激反应蛋白类、信号传导类等基因 ,其中表达上调的有 34条 ,表达下调的有 48条。流式细胞仪检测发现终浓度 1 5μmol/L的As2 O3对HL60细胞诱导凋亡的作用很强。对照组的细胞凋亡率为 1 7% ,而实验组细胞的凋亡率为 2 6 1 %。结论 细胞周期素B1、增殖细胞核抗原、类胰岛素生长因子结合蛋白等可能参与As2
- 贾晋松徐世荣马劼贾存荣姚银荣王毅
- 关键词:砷剂细胞周期蛋白类
- 冷冻红细胞临床输注效果观察
- 1999年
- 蔡计荣李素敏姚银荣王万彤孙丽华崔佳
- 关键词:冷冻红细胞输注红细胞输血疗法
- 冷冻保存红细胞的实验室研究
- 1999年
- 蔡计荣李素敏赵丽华王毅何路军汤玉泉姚银荣王万彤
- 关键词:红细胞冷冻保存
- 献血者外周血LAK细胞抗肿瘤活性初步研究
- 1995年
- 献血者外周血LAK细胞抗肿瘤活性初步研究河北省血液中心050071李婉娴,徐树臣,贾存荣,姚银荣,鄂春慧河北医学院张元杏,韩彩芝自从Rosenberg采用患者自体LAK细胞合用白细胞介素-2(interleukin2,IL-2)治疗恶性肿瘤取得满意疗...
- 李婉娴徐树臣贾存荣姚银荣鄂春慧张元杏韩彩芝
- 关键词:杀伤细胞肿瘤免疫疗法
- 细胞周期素G_1反义硫代脱氧寡核苷酸抑制HL-60细胞在裸鼠体内生长的实验研究被引量:2
- 2003年
- 目的 探讨细胞周期素G1 (cyclinG1 )反义硫代脱氧寡核苷酸对HL 6 0细胞在裸鼠体内生长的抑制作用。方法 将裸鼠随机分成对照组、正义寡核苷酸 (SON)组、反义寡核苷酸 (ASON)组 ,其中SON组和ASON组接种转染的HL 6 0细胞 (HL 6 0 S和HL 6 0 AS)前接受 3Gy的6 0 Co照射 ;将各组HL 6 0细胞接种于裸鼠皮下连续观察裸鼠的出瘤时间、瘤体大小 ,计算抑瘤率 ;病理切片用苏木精 伊红染色 ,电镜观察移植瘤组织的结构和细胞形态变化 ;用流式细胞仪 (FCM)和RT PCR分别检测cyclinG1 蛋白和mRNA水平的表达 ;电镜和FCM检测细胞凋亡。结果 ①cyclinG1 ASON组与SON组和对照组比较 ,对HL 6 0细胞在裸鼠体内生长有明显抑制作用 ,抑瘤率为 6 9.4 %。成瘤率、瘤重、瘤体积明显小于SON组和对照组。②镜下见cyclinG1 ASON组的HL 6 0细胞部分细胞形态发生改变 ,核分裂象少见 ,细胞的异型性较小 ,并且有凋亡细胞出现。结论 cyclinG1 ASON能明显抑制HL 6 0细胞在裸鼠体内的生长 ,并且促使部分细胞发生凋亡。
- 贾晋松徐世荣贾存荣马劼哈森姚银荣王毅石翠英
- 关键词:HL-60细胞裸鼠白血病
- 自身免疫性溶血性贫血病人的输血对策
- 2002年
- 何路军姚银荣
- 关键词:病因临床输血自身免疫性溶血性贫血