唐存多
- 作品数：76 被引量：141H指数：6
- 供职机构：南阳师范学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划河南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- D-扁桃酸脱氢酶和L-亮氨酸脱氢酶级联催化的L-苯甘氨酸对映选择性生物合成被引量：2
- 2020年
- L-苯甘氨酸是重要的手性非天然α-氨基酸,可广泛用于合成多种食品添加剂及药物中间体,探索其绿色合成工艺具有重要的意义。本研究将新型高活性的D-扁桃酸脱氢酶(LhDMDH)和L-亮氨酸脱氢酶(EsLeuDH)偶联,在辅酶内循环的前提下,仅需较低浓度的辅酶即可实现生物催化D-扁桃酸合成L-苯甘氨酸。通过对加酶量、氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^+)浓度、NH+4浓度和底物浓度等因素进行优化,获得了一个最经济的反应条件:200 mmol/L的D-扁桃酸、6.5 kU/L的加酶量、0.1 mmol/L NAD^+、0.5 mol/L NH4^+的条件下、30℃,反应12h,在此条件下,产物的得率和对映体过量(e.e.)值分别可达98%和99%以上,具有较大的产业化潜力,为实现L-苯甘氨酸规模化的生物合成奠定了坚实的基础。
- 史红玲王文杰李祥焦铸锦刘钺唐存多阚云超姚伦广
- 关键词：生物催化级联反应
- 人溶菌酶-人碱性成纤维细胞生长因子融合基因在毕赤酵母中的表达
- 2012年
- 目的在毕赤酵母中表达人溶菌酶(Human lysozyme,hLY)-人碱性成纤维细胞生长因子(Human basic fibroblast growth factor,hbFGF)融合基因,并分析融合蛋白的hLY活性。方法从人全血中提取总RNA,以其为模板,采用RT-PCR法扩增编码hLY成熟肽的cDNA。利用重叠PCR技术将hly基因与hbfgf基因融合,中间引入凝血酶识别位点序列;将融合基因克隆至载体pPIC9K中,构建重组表达质粒pPIC9K-hly-thr-hbfgf,电转化毕赤酵母GS115,通过G418抗性筛选高拷贝重组子GS/hly-thr-hbfgf,甲醇诱导表达融合蛋白,Bradford法测定重组子发酵液上清中总蛋白含量,改良舒加法检测融合蛋白hHLY-THR-hbFGF的hLY活性。结果获得的融合基因序列与理论序列一致;经PCR鉴定,融合基因hly-thr-hbfgf已整合入GS115基因组内;表达的融合蛋白相对分子质量约为33 000,发酵液上清中总蛋白含量为196.20 mg/L,融合蛋白的hLY活性为40 U/ml。结论已成功地在毕赤酵母GS115中表达了具有hLY活性的hHLY-THR-hbFGF融合蛋白。
- 韦敬土刘晓彤邬敏辰唐存多
- 关键词：溶菌酶碱性成纤维细胞生长因子融合基因毕赤酵母
- 重组大肠杆菌全细胞催化D,L-扁桃酸对映选择性制备L-苯甘氨酸被引量：3
- 2021年
- 借助pACYCDuet-1和pET28a双质粒共表达系统,构建携带Agrobacteriumradiobacter来源扁桃酸消旋酶(Ar mandelate racemase,Ar MR)、Lactobacillus harbinensi来源D-扁桃酸脱氢酶(Lh D-mandelate dehydrogenase,Lh DMDH)和ExiguobacteriumsibiricumDSM17290来源L-亮氨酸脱氢酶(EsL-leucine dehydrogenase,Es LeuDH)编码基因的重组大肠杆菌,将其命名为E. coli BL21(DE3)/pACYCDuet-1-EsLeuDHLhDMDH:pET28a-ArMR。在低温、低浓度诱导剂的诱导下,该重组菌成功表达了具有各自催化活性的3种重组酶,其发酵液中Lh DMDH、Es LeuDH和Ar MR的活性分别为195.8、56.2 U/mL和174.5 U/mL。以诱导后的全细胞为催化剂、D,L-扁桃酸为底物,在D,L-扁桃酸初始浓度50 mmol/L、pH 9.5的500 mmol/L NH4Cl-NH3·H2O缓冲液体系下,180 r/min、30℃反应48 h后,L-苯甘氨酸得率可达77.48%,其对映体过量值大于99%。本研究具有较大的产业化潜力,为实现L-苯甘氨酸规模化的生物合成奠定了坚实的基础。
- 贾园园李祥张振华张闪杨露露唐存多
- 关键词：全细胞催化共表达级联反应
- 一种生物制药实验专用桌
- 本实用新型涉及一种生物制药实验专用桌，属于实验用具领域，所述的生物制药实验专用桌主要包括桌体、桌角、桌面、挡板、漏水槽、接水槽、灯罩、鹅颈管、紫外灯、喷淋头、储物箱、箱门、储物盒、凹槽、卡片槽、桌体右侧面、横梁、挂钩；在...
- 卜宾唐青海毛倩倩谷雅静唐存多焦铸锦姚伦广阚云超
- 文献传递
- 检测试剂包装盒
- 1．本外观设计产品的名称：检测试剂包装盒。;2．本外观设计产品的用途：本外观设计产品用于快速诊断猪流行性腹泻的检测试剂包装盒。;3．本外观设计产品的设计要点：色彩和图形的结合。;4．最能表明本外观设计设计要点的图片或照片...
- 唐青海卜宾阚云超姚伦广唐存多李晓楠王瑾刘宗才焦铸锦李丹丹
- 一种高效制备低聚甘露糖的复合酶制剂及其应用
- 本发明公开一种高效制备低聚甘露糖的复合酶制剂，包括含量为100-1000？IU/mL的β-甘露聚糖酶和50-2000？IU/mL的纤维素酶，以复合酶制剂总重量为基准还包括蛋白胨、淀粉、山梨酸钾和木糖醇。所述的纤维素酶为β...
- 唐存多邬敏辰阚云超姚伦广唐青海史红玲黄志刚焦铸锦
- 文献传递
- 犬细小病毒NY株VP2蛋白的原核表达及反应原性鉴定被引量：1
- 2015年
- 犬细小病毒(CPV)编码的VP2基因容易发生变异,导致病毒嗜性和致病性的改变。为制备一株高致病性的CPV毒株(NY株,基因型为2a型)重组VP2蛋白,构建重组原核表达载体pET28a-CPVVP2,转化E.coli BL21(DE3)表达菌株,通过不同温度、不同IPTG浓度和不同诱导时间等条件的优化进行表达蛋白,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果表明,重组CPV-NY毒株VP2蛋白(rVP2)的分子质量约为72ku,在不同温度条件下均以包涵体形式存在,在37℃条件下以终浓度为0.2mmoL/L IPTG诱导4h表达量达到最高。rVP2不仅与His标签mAb反应,也能与CPV特异性阳性血清反应,说明rVP2具有良好的反应原性,为CPV抗体检测试剂盒和基因工程疫苗的研究奠定了基础。
- 毛倩倩卜宾唐青海阚云超姚伦广唐存多焦铸锦杨建伟
- 关键词：VP2原核表达
- 9个梨品种综合品质评价分析被引量：14
- 2021年
- 采用主成分分析法和逐步线性回归对9个优良梨品种果实的主要性状[单果质量、果肉硬度、果形指数、可溶性固形物(total soluble solids,TSS)含量、可滴定酸(titratable acid content,TA)含量、石细胞含量、维生素C(vitamin C,VC)含量、糖酸比等29个指标]进行分析评价。结果表明:9个梨品种进行主成分分析,提取出7个主成分,累计方差贡献率为97.86%,可以在一定程度上概括这些性状的总体信息量;通过因子分析与逐步回归建立梨综合品质预测模型;依据不同主成分得分,筛选出单果质量、香气、硬度、果心横径/果实横径、固酸比、好果率1、L值和b*值7个果实综合评价简化指标,可为科学地评价不同品种梨的综合品质、生产推广和果实远销贮运提供理论参考。
- 牛佳佳张四普张柯徐振玉鲁云风唐存多苗建银
- 关键词：主成分
- 一种D-扁桃酸脱氢酶、基因、基因工程菌及其应用
- 本发明公开了一种具有如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的D‑扁桃酸脱氢酶（<I>Lh</I>DMDH）、编码该D‑扁桃酸脱氢酶（<I>Lh</I>DMDH）的基因（具有如SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列）、包...
- 唐存多史红玲阚云超姚伦广和子涵焦铸锦史鸿飞刘飞
- 文献传递
- 可视化检测Hobi‑like瘟病毒的反转录环介导等温扩增引物、试剂盒和检测方法
- 本发明属于病毒检测技术领域，具体涉及一种可视化检测Hobi‑like瘟病毒的反转录环介导等温扩增引物、试剂盒和检测方法。本发明合成特异性LAMP引物上游内引物FIP、下游内引物BIP、上游外引物F3和下游外引物B3，所述...
- 史鸿飞阚云超姚伦广唐存多焦铸锦冷超粮冀君岳超马娜
