周金伟
- 作品数：7 被引量：72H指数：5
- 供职机构：四川农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金四川省科技厅科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- CRISPR/Cas9基因组编辑技术及其在动物基因组定点修饰中的应用被引量：26
- 2015年
- CRISPR/Cas系统是细菌和古生菌中抵抗外源病毒或质粒入侵的获得性免疫系统,利用CRISPR RNAs(cr RNAs)引导Cas核酸酶沉默入侵的核酸。通过分子生物学改造使Ⅱ型CRISPR/Cas系统成为一种高效的基因组定点修饰技术,并且比锌指核酸酶(Zinc-finger nucleases,ZFNs)和TALE核酸酶(Transcription activator like effector nucleases,TALENs)结构更简单,更容易设计和应用。文章主要介绍了CRISPR/Cas9系统成为高效基因组定点修饰技术的发展历程、Ⅱ型CRISPR/Cas的工作原理和改造过程以及在动物基因组定点修饰的应用,剖析了该技术存在的问题和现有改进方案,并与成功案例相结合展望了CRISPR/Cas9系统的应用前景,以期为动物性状改良和人类疾病动物模型的创立提供新思路。
- 周金伟徐绮嫔姚婧余树民曹随忠
- 关键词：人类疾病动物模型
- 黄芪多糖对奶牛口蹄疫疫苗免疫抗体水平的影响被引量：3
- 2014年
- 本试验旨在研究不同剂量的黄芪多糖对荷斯坦奶牛口蹄疫疫苗免疫效果的影响,为临床用药提供实验依据。试验选取年龄、胎次、体重相近的荷斯坦奶牛40头,随机分为4组(每组10头)。各组每天分别在精料中添加0、5、10、15 g黄芪多糖,连续给药7 d。给药第4 d各组奶牛进行亚洲I型、O型口蹄疫疫苗免疫。分别于试验第0、4、18、32、46、104 d采血测定奶牛口蹄疫亚洲I型、O型抗体水平。结果显示:在日粮中添加黄芪多糖对奶牛接种口蹄疫疫苗后抗体的产生均有促进作用,均显著(P<0.05)提高亚洲I型和O型口蹄疫抗体水平,且与剂量呈正相关。结果表明黄芪多糖能显著(P<0.05)增强奶牛口蹄疫疫苗的抗体水平,可以作为免疫增强剂用于奶牛口蹄疫的防治。
- 申义君王斌周金伟沈留红余树民彭广能曹随忠
- 关键词：黄芪多糖奶牛口蹄疫抗体
- 类转录激活因子效应物核酸酶(TALENs)的构建及其在基因组定点修饰中的应用被引量：5
- 2013年
- 类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nucleases,TALENs)是一种新发现的基因组定点修饰工具。TALENs由TALE蛋白及II型核酸内切酶Fok I组成,其中TALE由多个重复的氨基酸序列构成,对DNA序列的识别达到一个重复单元结合一个碱基的程度,它在结合Fok I内切酶后就形成了具有DNA定点修饰功能的TALENs。该文主要介绍TALENs的构建及其在基因组定点修饰中的应用。
- 周金伟王灵慧申义君余树民曹随忠
- 关键词：基因敲除
- 牦牛SPAG11基因克隆与生物信息学分析被引量：1
- 2016年
- 【目的】克隆牦牛(Bos grunniens)精子相关抗原11(Sperm-Associated Antigen 11,SPAG11)基因,并了解其分子结构特征,为进一步研究牦牛SPAG11生物学功能奠定基础。【方法】从牦牛睾丸中提取总RNA,RTPCR扩增并克隆SPAG11C、SPAG11 D和SPAG11E基因,测序后进行生物信息学分析。【结果】克隆出牦牛SPAG11基因3个亚型:SPAG11C、SPAG11 D和SPAG11E,序列大小分别是351,408和261bp,分别编码117,129和80个氨基酸,其中SPAG11 D和SPAG11E序列包含1个完整开放阅读框(ORF),SPAG11C序列包含部分ORF。牦牛SPAG11C、SPAG11 D和SPAG11E核苷酸序列与黄牛(Bos taurus)相应序列相似性最高,而与黄牛β-防御素1相似性较低(<50%)。3个蛋白亚型均具有β-防御素家族基本特性,生物信息学分析显示其均含有磷酸化位点。【结论】成功克隆牦牛SPAG11C、SPAG11 D和SPAG11E基因,明确了其编码蛋白的分子结构特征。
- 徐绮嫔王寒李计尚周金伟张于沈留红余树民彭广能曹随忠
- 关键词：牦牛Β-防御素生物信息学
- 溶菌酶对围产期奶牛血清中两种补体及三种细胞因子质量浓度的影响被引量：5
- 2014年
- 为了探讨溶菌酶对围产期(产前第21天到产后第21天,表示为-21st^21st d,下同)奶牛免疫抑制的缓解作用及其相关机制,选择18头围产期奶牛,分为3组,每组6头,Ⅰ组:每头奶牛每日饲喂基础日粮+2g溶菌酶,Ⅱ组:每头奶牛每日饲喂基础日粮+4g溶菌酶,Ⅲ组作为对照组,只饲喂基础日粮,试验期为45d。应用ELISA双抗体夹心法检测试验牛血清中C3、C4及IFN-γ、TNF-α、IL-6的质量浓度。结果显示,Ⅰ、Ⅱ组奶牛在-10th^7th d阶段,血清中C3、C4的质量浓度明显高于对照组(P<0.05)。Ⅱ组血清中IFN-γ、TNF-α和IL-6的质量浓度均低于对照组,即IL-6的质量浓度从-14th到21st d与对照组存在极显著差异(P<0.01),TNF-α的质量浓度从0到21st d与对照组差异均极显著(P<0.01),IFN-γ的质量浓度虽然与对照组差异不显著(P>0.05),但其含量也明显低于对照组;而Ⅰ组IFN-γ、TNF-α和IL-6的质量浓度与对照组均差异不显著(P>0.05)。结果表明,溶菌酶对围产期奶牛的免疫抑制有缓解作用,且Ⅱ组的缓解作用明显优于Ⅰ组,这可能与溶菌酶能增加血清中C3、C4的质量浓度和降低IFN-γ、TNF-α和IL-6的质量浓度有关。
- 李刚诗王晓艳钟志军彭广能唐天亮谷武阳解冰冰石先鹏周金伟曹随忠符华林刘长松
- 关键词：溶菌酶围产期奶牛补体3补体4Α-肿瘤坏死因子
- 黄芪多糖对泌乳期奶牛血清生化指标的影响被引量：12
- 2014年
- 本试验旨在探讨黄芪多糖（Astragalus polysaccharides,APS）对泌乳期奶牛血清生化指标的影响。选用年龄、胎次和体重相近的健康荷斯坦奶牛40头,采用单因子完全随机试验设计,随机分为4组,每组10头奶牛,Ⅰ组为空白对照组,饲喂不含APS的基础日粮;Ⅱ-Ⅳ组分别饲喂添加10、50和100g/（头·d）APS的基础日粮,试验期20d。结果表明,随着APS添加剂量增加,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、γ-谷氨酰转移酶（γ-GGT）、碱性磷酸酶（ALP）、肌酸磷酸激酶（CK）活性及总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、总胆固醇（CHO）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血糖（GLU）含量均无明显变化,与对照组相比差异均不显著（P〉0.05）;随着APS添加剂量增加,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组血清中甘油三酯（TG）含量呈下降趋势,且给药第10天时显著低于对照组（P〈0.05）。综上所述,生产中以黄芪多糖推荐剂量饲喂奶牛安全可靠,达到10倍推荐剂量时也无安全性问题,黄芪多糖可作为一种安全的抗氧化剂和免疫增强剂应用于奶牛养殖。
- 文月玲申义君周金伟王斌沈留红余树民曹随忠
- 关键词：黄芪多糖奶牛泌乳期安全性
- 黄芪多糖对泌乳期奶牛抗氧化能力的影响被引量：25
- 2014年
- 本实验旨在研究黄芪多糖对泌乳期荷斯坦奶牛抗氧化能力的影响。试验选取年龄、胎次和体重接近的泌乳期荷斯坦奶牛35头,随机分为5组(每组7头),各组每天分别在精料中添加0、5、10、50、100 g黄芪多糖,连续饲喂14 d。分别在第0、14和24 d采血测定血清总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果显示:在日粮中添加适量的黄芪多糖显著提高(P<0.05)泌乳期奶牛血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,同时显著降低(P<0.05)血清中丙二醛(MDA)的含量。结果表明,日粮中添加黄芪多糖有提高泌乳期奶牛抗氧化能力的作用,适宜添加剂量在10 g^50 g/头·d。
- 申义君周金伟王斌李计尚沈留红余树民曹随忠
- 关键词：黄芪多糖奶牛泌乳期抗氧化
