周永强 作品数:21 被引量:23 H指数:3 供职机构: 宁波大学生命科学与生物工程学院教育部应用海洋生物技术重点实验室 更多>> 发文基金: 宁波大学王宽诚幸福基金 浙江省公益性技术应用研究计划项目 宁波市农业科技攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
抗迟钝爱德华氏菌卵黄抗体制备及其抑菌、吞噬调理活性分析 被引量:2 2018年 迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)是常见人畜共患病病原.为获得高效抗E.tarda卵黄抗体(Immunoglobulin of Yolk,IgY),将纯培养的迟钝爱德华氏菌灭活,免疫蛋鸡,由蛋黄纯化IgY,用间接ELISA法检测IgY效价.对制备的IgY进行了抑菌活性检测和动物保护实验:分别将抗E.tarda IgY、普通鸡蛋IgY与E.tarda(2×10~3 CFU·mL^(-1))孵育,涂平板,菌落计数;分别将抗E.tarda IgY、普通鸡蛋IgY与E.tarda(2×108 CFU·mL^(-1))等体积混合后注射克氏原螯虾(Procambarus clarkia),记录各组成活率.检测抗E.tarda IgY的吞噬调理活性:分别将抗E.tarda IgY、普通鸡蛋IgY与E.tarda(103 CFU·mL^(-1))及小鼠血细胞混合后,接种平板培养、计数.结果发现:制备的IgY质量浓度为8.8 mg·mL^(-1),每个鸡蛋可以获得IgY约130 mg,效价为1:10 240;体外相对抑菌率为86.6%;对克氏原螯虾的平均保护率为66.7%;能促进细胞吞噬E.tarda,相对吞噬率为79.8%. 顾叶华 李登峰 周永强关键词:迟钝爱德华氏菌 卵黄抗体 抑菌活性 三疣梭子蟹呼肠孤病毒的鸡胚培养方法 本发明公开了三疣梭子蟹呼肠孤病毒的鸡胚培养方法,特点是采用SPF鸡胚作为三疣梭子蟹呼肠孤病毒的体外培养体系,选择3-4日龄健康鸡胚,将预先制备的三疣梭子蟹呼肠孤病毒接种液接种至鸡胚尿囊膜上,继续培养直至鸡胚出现死亡,收集... 李登峰 彭娇 刘联国 周永强 陈炯文献传递 抗鳗弧菌卵黄抗体及其制备方法、效价检测方法和应用 本发明公开了抗鳗弧菌卵黄抗体及其制备方法、效价检测方法和应用,特点是采用鳗弧菌为抗原免疫蛋鸡,收集高免疫鸡蛋,将免疫鸡蛋卵黄进行分离和纯化得到抗鳗弧菌卵黄抗体,包括制备鳗弧菌抗原并灭活步骤;将蛋鸡进行1次基础免疫和2~3... 李登峰 周永强 刘联国 郭安南 彭娇 陈炯 顾晓英文献传递 养殖三疣梭子蟹体内哈维氏弧菌的分离与致病性鉴定 被引量:8 2013年 养殖的三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)秋、冬季常发生非典型症状的死亡.本研究取濒死的三疣梭子蟹内脏及体腔液进行细菌分离,经纯化传代获得1株优势菌HY.HY菌的革兰氏染色呈阴性,菌体呈杆状、弧形或逗点状,无荚膜,无芽孢,极生单鞭毛,运动性强.生长特性和生化试验表明该菌生长需盐,最适生长的NaCl含量为30 mg/cm3;28℃下生长旺盛,能利用葡萄糖产酸但不产气,可以利用麦芽糖、蔗糖等糖类.测定了HY菌约930bp的16S rDNA序列,分类进化树显示其与哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)XC08001聚为一簇.综合形态、生化和16S rDNA序列分析结果确定HY菌为哈维氏弧菌.以2×106cfu/只(蟹)的HY菌悬液注射健康梭子蟹成蟹(平均体重为400±25 g/只),致死率为35%;菌液浸泡感染梭子蟹仔蟹的半数致死剂量(LC50)为8.25×105cfu/cm3.上述结果表明分离的哈维氏弧菌对三疣梭子蟹具有致病性. 周永强 李登峰 彭姣 Ester Johanna Shikongo 陈炯 刘联国 顾晓英关键词:海洋微生物学 三疣梭子蟹 病原 哈维氏弧菌 弗氏柠檬酸杆菌与迟钝爱德华氏菌拮抗菌的筛选与鉴定 被引量:4 2019年 鉴于弗氏柠檬酸杆菌和迟钝爱德华氏菌是"人-兽-鱼"共患性条件致病菌,因此利用微生物拮抗原理研发微生态制剂进行细菌病害的防治对环境具有友好性.分别以从患病中华鳖分离的弗氏柠檬酸杆菌和迟钝爱德华氏菌作为指示菌,初步筛选获得对这2种菌具有拮抗作用的菌株6-1-1M和7-1-1M.用点种法和纸片法进一步验证了其拮抗活性,测定了2株菌930 bp的16S r DNA基因片段序列,发现二者序列完全一致,系统进化分析表明其属于希瓦氏菌属(Shewanella sp.).安全性验证实验结果表明其无致病性,具有开发应用前景. 林威 李登峰 孙智同 周永强关键词:迟钝爱德华氏菌 拮抗菌 一种甲鱼系统性败血症球状病毒灭活疫苗及其制备方法 本发明公开了一种甲鱼系统性败血症球状病毒灭活疫苗及其制备方法,特点是该疫苗含有保藏号为CGMCCNo.5378的经灭活的甲鱼系统性败血症球状病毒,其制备方法包括将病甲鱼内脏剪碎加入TNE缓冲液中,离心取上清液,再离心取白... 李登峰 周永强 刘联国 彭娇文献传递 基于卵黄抗体的甲鱼系统性败血症球状病毒间接ELISA检测方法 本发明公开了基于卵黄抗体的甲鱼系统性败血症球状病毒间接ELISA检测方法,特点是包括将0.1ng/ul的甲鱼系统性败血症球状病毒抗原按100ul/孔加于聚苯乙烯96孔反应板中进行预包被,并采用牛血清白蛋白封闭液进行封闭的... 李登峰 彭娇 周永强 刘联国 陈炯 顾晓英文献传递 基于卵黄抗体的甲鱼系统性败血症球状病毒间接ELISA检测方法 本发明公开了基于卵黄抗体的甲鱼系统性败血症球状病毒间接ELISA检测方法,特点是包括将0.1ng/ul的甲鱼系统性败血症球状病毒抗原按100ul/孔加于聚苯乙烯96孔反应板中进行预包被,并采用牛血清白蛋白封闭液进行封闭的... 李登峰 彭娇 周永强 刘联国 陈炯 顾晓英文献传递 一种甲鱼系统性败血症球状病毒灭活疫苗及其制备方法 本发明公开了一种甲鱼系统性败血症球状病毒灭活疫苗及其制备方法,特点是该疫苗含有保藏号为CGMCCNo.5378的经灭活的甲鱼系统性败血症球状病毒,其制备方法包括将病甲鱼内脏剪碎加入TNE缓冲液中,离心取上清液,再离心取白... 李登峰 周永强 刘联国 彭娇文献传递 对虾白斑综合症病毒的鸡胚培养方法 本发明公开了对虾白斑综合症病毒的鸡胚培养方法,特点是采用SPF鸡胚作为对虾白斑综合症病毒的体外培养体系,选择预先培养了6-7天的健康鸡胚,将预先制备除菌了的对虾白斑综合症病毒接种液接种至鸡胚尿囊膜上,收集培养时间为5-1... 李登峰 刘联国 彭娇 陈炯 周永强 顾晓英文献传递