周勇 作品数:17 被引量:45 H指数:6 供职机构: 军事医学科学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 化学工程 生物学 更多>>
应用PKA抑制法测定C1抑制剂功能活性 1991年 本文介绍了一简便、快速测定 Cl-INH 功能活性的方法。此法是向待检血浆中加入一定量的 PKA,在37℃培育一定时间后,测定残留的 PKA 活性,利用 Cl-INH 对 PKA 抑制作用来定量测定 Cl-INH 功能活性。结果表明该方法重复性好 Cl-INH 功能活性与其相应的抗原量完全相符(r=0.913,n=40)。用此法测定25份正常人血浆,18份 HAE 病人血浆,其活性分别为117.2±22.3%和20.08±10.6%。 周勇 程雅琴rHuEPO体内生物学活性检测方法比较 被引量:2 2000年 目的 比较网织红细胞法与多血症小鼠法检测rHuFPO体内生物学活性。方法 对量效线性范 围、相关系数(r值)、方法重复性和可信限率(FL%)进行比较。结果 网织红细胞法比多血症小鼠法操作更简便,重复性更好(CV分别为8.90%和23.18%),线性范围更宽(1.8~8.OIU),线性关系更好,可信限率更低(分别为26.59%和38.58%)。结论 网织红细胞法可以取代多血症小鼠法作为常规的rHuEPO的质控手段。 王箐舟 程雅琴 周勇 王威关键词:网织红细胞 RHUEPO 应用MTT比色法测定EPO体外生物学活性 被引量:6 1995年 EPO依赖细胞珠在EPO浓度梯度中培养72小时,再加入MTT培养5小时,离心弃上清后,加入有机溶剂溶解MTT代谢产物,以OD值对EPO浓度梯度作量效曲线,定量地测定EPO生物学活性。本法重复性好,与其它体外生物学活性测定方法所测定结果相符。 周勇 张燕军 张丽君 程雅琴 丁锡申关键词:红细胞生成素 生物学活性 MTT比色法 重组人促红素体内、体外生物学活性差异成因分析 被引量:6 2008年 目的分析造成重组人促红素(rHuEPO)体内、体外生物学活性差异的原因。方法按《中国药典》三部(2005版)方法检测rHuEPO样品体内、体外生物学活性,并通过等电聚焦电泳分析、唾液酸含量、纯度、N-糖链糖基化和相对分子质量检测,探讨样品体内、体外生物学活性产生差异的原因。结果体内、体外生物学活性有差异的rHuEPO样品中,存在糖链末端N-乙酰神经氨酸残基不完整的rHuEPO成分。纯度、N-糖链糖基化和相对分子质量检测结果未见异常。结论为提高rHuEPO产品质量,应在生产过程中有效去除N-乙酰神经氨酸残基不完整的rHuEPO。 周勇 王箐舟 肖林 杨鹏云 黄培堂 王军志关键词:重组人促红素 生物学活性 第一批重组人红细胞生成素国家标准品的研制 被引量:3 2001年 目的 建立符合国家标准品要求,用于重组人红细胞生成素(rHuEPO)质量控制的rHuEPO国家标 准品。方法 用英国 NIBSC提供的 WHO rHuEPO(87/684),采用经典的多血症小鼠-”Fe体内生物学活性测定法, 对我国第一批重组人红细胞生成素国家标准品(980528)进行了标定。用阿根廷INSTTTUTO SIDUS S.A.进行了复 核标定。结果 该批国家标准品效价为82IU/瓶,生物学活性稳定。结论980528批rHuEPO可作为国家标准品, 用于重组红细胞生成素制品体内生物学活性测定。 程雅琴 周勇 王箐舟 刁勇 古卓良关键词:重组人红细胞生成素 国家标准品 重组人红细胞生成素对慢性肾衰大鼠的疗效 1999年 建立慢性肾衰贫血大鼠的动物模型后 ,分别用基因重组人红细胞生成素 (r Hu EPO)按 45 0 IU /kg、15 0 IU /kg、 5 0 IU /kg 3组剂量连续 14d皮下注射上述大鼠 ,同时设立阳性对照组及阴性对照组。结果发现r Hu EPO只能治疗肾衰造成的贫血 ,而对肾衰无治疗作用。 王箐舟 王威 陈雪岩 程雅琴 侯继锋 云志宏 沈琦 周勇 卢连玉关键词:RHUEPO 慢性肾衰 贫血 长效人红细胞生成素的制备和质量控制进展 2008年 长效人红细胞生成素是一类刺激体内红细胞生成的蛋白类激素,与普通人红细胞生成素不同,其大大延长了体内半衰期,可减少注射次数,提高患者的依从性且具有更佳的疗效。此文综述了近几年长效人红细胞生成素的研究和质量控制进展。 周勇 王箐舟 王军志 黄培堂关键词:生物学活性 ^(59)Fe摄入法和ELISA法测定重组人红细胞生成素活性的比较 被引量:1 1996年 对重组人红细胞生成素(rhEPO)活性测定的两种方法进行了比较。认为标准方法(^(59)Fe摄入法)结果准确,但操作复杂。而ELISA法必须与其它纯度检查法如SDS-PAGE、IEF、HPLC等相结合才能得出准确结果。对于高纯度结构完整的rhEPO分子,两种方法结果应一致。 刁勇 古卓良 周勇 程亚琴 聂海洋 吴刚关键词:红细胞生成素 活性测定 ELISA 重组人红细胞生成素质量控制体系研究 被引量:3 2007年 目的研究重组人红细胞生成素(rHuEPO)质量控制体系。方法用网织红细胞分析仪测活法测定rHuEPO体内生物学活性。比较不同的等电聚焦电泳条件、蛋白含量测定方法和牛血清白蛋白检测方法。按rHuEPO特点进行其他项目的检测。结果采用全自动网织红细胞计数仪检测rHuEPO体内生物学活性方法简便可靠;电泳时添加尿素可增加区带清晰度和条带清晰度;采用BSAELISA检测牛血清白蛋白含量可准确定量;免疫印迹试验可有效地检测rHuEPO成品质量。结论本研究建立了一套完善的rHuEPO质量控制体系。 周勇 王箐舟 王军志 黄培堂 程雅琴 陈震 沈琦关键词:重组人红细胞生成素 生物学活性 毛细管电泳-激光诱导荧光法测定基因工程人细胞生成素的N-连接糖谱 2003年 目的 建立重组人红细胞生成素 (EPO)中影响体内生物学活性的含唾液酸和去唾液酸的N 连接糖的糖谱。方法 用肽糖苷酶F释放EPO中与天冬酰胺连接的寡糖 ,再用唾液酸酶脱去糖末端的唾液酸 ,采用荧光试剂APTS标记后 ,以毛细管凝胶电泳 激光诱导荧光法分离和检测糖的各种形态。结果 EPO样品含有大致相同的N 连接糖谱 ;去唾液酸后的N 连接糖组分的保留时间延长 ;体内生物学活性不同的样品 ,其N 连接糖也有差异。 结论此法可用于判断EPO产品的来源及批间差异 ,与肽图相结合可作为EPO的指纹鉴别图谱 。 周国华 张晓丹 刁勇 周勇 罗国安 程亚琴关键词:重组人红细胞生成素