吴素霞
- 作品数：31 被引量：72H指数：5
- 供职机构：河南大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生文化科学生物学政治法律更多>>
- 人骨髓间充质干细胞源性多巴胺神经元的结构和功能特征(英文)被引量：5
- 2008年
- 背景:研究人骨髓间充质干细胞定向分化为多巴胺神经元及分化后细胞的功能特征,对细胞移植治疗包括帕金森病在内的神经精神性疾病具有重要临床意义。目的:采用脑源性神经营养因子、forskolin及多巴胺联合诱导人骨髓间充质干细胞向多巴胺神经元定向分化,观察诱导产生的多巴胺神经元的结构和功能。设计:随机对照观察。单位:郑州大学及河南大学。材料:实验于2005-03/2006-09在郑州大学和河南大学实验室完成。实验用骨髓取自15名健康志愿者。脑源性神经营养因子、多巴胺、forskolin及单克隆抗体酪氨酸羟化酶为美国Sigma公司产品。方法:①通过密度梯度离心获取人骨髓中的单个核细胞,贴壁培养纯化骨髓间充质干细胞。采用50μmol/L脑源性神经营养因子,10μmol/Lforskolin和10μmol/L多巴胺联合对骨髓间充质干细胞进行诱导。②诱导2周后应用电子显微镜观察细胞超微结构;免疫细胞化学染色检测神经元烯醇化酶(NSE)和酪氨酸羟化酶(TH)的表达;采用RT-PCR检测多巴胺神经元分化过程中转录因子Nurr1,Ptx3,Lmx1b及酪氨酸羟化酶mRNA表达;同时以未诱导的细胞为对照,应用高效液相色谱检测细胞多巴胺的释放水平。主要观察指标:①细胞超微结构。②NSE和TH的表达变化。③细胞内关键转录因子及酪氨酸羟化酶mRNA变化。④细胞释放多巴胺情况。结果:①细胞超微结构:诱导2周后细胞胞浆中有大量密集的呈扁平囊状的粗面内质网及其间的一些游离核糖体以及神经微丝的形成。②NSE和TH表达的变化:免疫细胞化学染色结果表明诱导分化后NSE和TH阳性细胞的表达随诱导时间的延长逐渐增高(P<0.001)。③细胞内酪氨酸羟化酶及关键转录因子变化:RT-PCR结果显示细胞均可表达Nurr1,Ptx3,Lmx1b和酪氨酸羟化酶的mRNA。④细胞释放多巴胺情况:诱导2周后的细胞多巴胺释放水平高于未经诱导的细
- 柴立辉吴素霞陈宗德曹孟德马远方
- 关键词：多巴胺神经元骨髓间充质干细胞分化脑源性神经营养因子
- 体外诱导人骨髓间充质干细胞向多巴胺神经元分化的研究被引量：7
- 2007年
- 通过体外诱导人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs)向多巴胺(dopamine,DA)神经元分化,探讨人BMSCs来源的DA神经元的功能特征及其分化机制,为临床上细胞移植替代治疗诸如帕金森氏病(parkinson’sdisease,PD)等神经精神性疾病提供一种理想的细胞来源。通过密度梯度离心获取人骨髓中的单个核细胞,贴壁培养纯化BMSCs。50μmol/L脑源性神经营养因子(brain derivedneurotrophy factor,BDNF),10μmol/Lforskolin(FSK)和10μmol/LDA联合对BMSCs进行诱导。电子显微镜观察诱导2周后细胞是否具有神经元的超微结构特点;免疫细胞化学染色和RT-PCR检测DA神经元分化过程中的标志物酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达以及转录因子Nurr1、Ptx3和Lmx1b的表达;高效液相色谱(highperformance liquid chromatogram,HPLC)检测诱导2周后的细胞多巴胺的释放水平。结果表明,诱导2周后,电镜下细胞胞浆中有大量密集的呈扁平囊状的粗面内质网及其间的一些游离核糖体以及神经微丝的形成。RT-PCR结果显示NSE(neuron specificenolase)、Nurr1、Ptx3、Lmx1b和TH的mRNA均有表达;免疫细胞化学染色结果表明诱导2周后TH阳性细胞(24·80±3·36)%的表达较诱导3d后(3·77±1·77)%明显提高(P<0·01);HPLC检测到诱导2周后的细胞DA释放水平[(1·22±0·36)μg/mL(n=6)]高于未经诱导的细胞[(0·75±0·22)μg/mL(n=6)(t=-2·79,P=0·038)]。由此得出,BDNF、FSK和DA可以在体外诱导人BMSCs向DA神经元分化,并具有DA神经元的功能特征,是临床用于治疗神经精神性疾病的理想细胞来源。
- 柴立辉吴素霞鄢文海马远方
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化多巴胺神经元脑源性神经营养因子
- 医学整合的现状与思考被引量：5
- 2014年
- 医学整合作为生物-心理-社会医学模式的必然产物,愈来愈受到人们的重视。医学整合作为一个世界性的难题,已经有很多医学院校和医院将其付诸行动,并积极探索医学整合的方法和模式,获得了一些有益的经验和教训。但医学整合的道路是漫长而曲折的,还需要我们继续积累经验,不断修正观念,最终获得这场革命的胜利。
- 吴素霞柴立辉
- 关键词：生物-心理-社会医学模式课程改革
- OCILRP2-Fc抑制小鼠树突状细胞的发育成熟
- 研究背景:树突状细胞(dendritic cells,DC)是体内唯一能够激活初始T淋巴细胞的抗原提呈细胞,在连接固有免疫和适应性免疫中起桥梁作用。DC的发育分化是一个十分复杂的过程,许多因素参与调控DC的发育分化过程。...
- 李伟华柴立辉吴素霞杨菲刘广超马远方
- 关键词：树突状细胞脂多糖核因子КB
- 文献传递
- 神经受体在人骨髓源性神经细胞上的表达
- 2011年
- 目的:检测神经受体在人骨髓源性神经细胞上的表达,探讨人骨髓间充质干细胞(hBMSC)体外诱导分化为神经细胞的方法及人骨髓源性神经细胞的功能特征。方法:分离纯化hBMSC,流式细胞仪检测CD34、CD45、CD44、CD117在hBMSC上的表达;应用DMSO/BHA/FSK/BDNF联合诱导hBMSC向神经细胞分化;免疫细胞化学染色检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)和多巴胺D2受体(DRD2)的表达;RT-PCR检测DRD2、γ-氨基丁酸A(GABAA)受体-α2亚基、5-羟色胺2(5-HT2)受体mRNA的表达。结果:流式细胞仪检测显示hBMSC的间充质干细胞相对特异性抗原CD44、CD117表达阳性,造血干细胞特异性抗原CD34、CD45表达阴性;hBMSC经DMSO/BHA/FSK/BDNF诱导培养3d后,免疫细胞化学染色结果显示有NSE、DRD2阳性细胞;RT-PCR检测结果显示DRD2、GABAA受体-α2亚基、5-HT2受体的mRNA表达阳性。结论:hBMSC经DMSO/BHA/FSK/BDNF诱导可分化为神经细胞,并表达DRD2等多种神经受体,有望成为应用细胞移植治疗神经精神性疾病的理想细胞来源。
- 吴素霞柴立辉鄢文海邢莹
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化神经细胞神经受体
- 破骨细胞抑制凝集素相关蛋白2的真核表达及多克隆抗体制备被引量：1
- 2014年
- 目的:为了获得真核表达的重组蛋白OCILRP2-Fc和OCILRP2特异性抗体,用于OCILRP2生物学功能的进一步研究。方法:构建了融合人IgG Fc段的小鼠OCILRP2真核表达载体pIg-CD5-OCILRP2,将pIg-CD5-OCILRP2转染CHO细胞,G418筛选稳定表达细胞株;Protein A亲和层析从CHO细胞培养上清中纯化重组蛋白OCILRP2-Fc并免疫家兔制备OCILRP2多克隆抗体。ELISA检测抗血清和多克隆抗体的效价,Western blot验证多克隆抗体的特异性,并应用该抗体检测OCILRP2在树突状细胞(Dendritic cells,DC)中的表达。结果:ELISA结果表明OCILRP2-Fc稳定表达细胞株经过多次传代培养后仍然具有较高的蛋白表达水平;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示纯化后的蛋白只有单一条带出现,且该条带可以被抗人IgG检测到;重组蛋白OCILRP2-Fc免疫家兔获得的抗血清和纯化后得到的OCILRP2多克隆抗体效价分别为1∶1 280 000和1∶320 000,Western blot证明该抗体可以和免疫原OCILRP2-Fc及NIH/3T3细胞中表达的OCILRP2特异性结合。应用该抗体检测OCILRP2在DC的表达发现OCILRP2在成熟DC的表达明显高于不成熟DC。结论:获得了真核表达的重组蛋白OCILRP2-Fc和高效价的OCILRP2特异性抗体,为进一步研究OCILRP2在免疫应答中的功能奠定了基础。
- 吴素霞柴立辉王战争刘广超田文志马远方
- 关键词：真核表达多克隆抗体树突状细胞
- 体外诱导人骨髓间充质干细胞向多巴胺神经元分化的研究
- 目的:通过体外诱导人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向多巴胺(do- pamine,DA)神经元分化,探讨BMSCs分化为神经元后的功能特征。方法:通过...
- 柴立辉吴素霞鄢文海邢莹马远方
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化多巴胺神经元脑源性神经营养因子
- 文献传递
- 沉默TNFAIP8基因对宫颈癌HeLa细胞生物学特性的影响被引量：8
- 2015年
- 目的 :通过沉默肿瘤坏死因子α诱导的蛋白8(tumor necrosis factor alpha induced protein 8,TNFAIP8,TIPE)的表达,研究其对宫颈癌He La细胞生物学特性的影响,并探讨TNFAIP8在He La细胞增殖、迁移及凋亡中可能的作用机制。方法 :构建特异性针对TNFAIP8基因的慢病毒载体,感染He La细胞后沉默TNFAIP8基因的表达,分别采用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测TNFAIP8 m RNA及蛋白在He La细胞中的表达情况。划痕实验及平板克隆形成实验检测沉默TNFAIP8基因表达对He La细胞的迁移和增殖能力的影响。MTT法及锥虫蓝染色计数法检测血清饥饿处理后He La细胞的存活能力,FCM法检测血清饥饿状态下He La细胞的凋亡情况。结果 :实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测结果表明,TNFAIP8-shR NA转入HeL a细胞后,TNFAIP8 mR NA(P<0.05)及蛋白的表达水平均被明显下调。划痕实验和克隆形成实验结果显示,沉默TNFAIP8基因在HeL a细胞中的表达,明显抑制了HeL a细胞的迁移和增殖能力(P值均<0.05)。血清饥饿处理后的HeL a细胞中,TNFAIP8沉默组细胞的存活能力显著降低,而凋亡率显著增加(P值均<0.05)。结论 :TNFAIP8作为一种致癌基因能促进人宫颈癌He La细胞的迁移和增殖,并抑制He La细胞的凋亡。
- 吴素霞张赛男李伟华杨菲冯世明柴立辉
- 关键词：宫颈肿瘤
- 人骨髓间充质干细胞分化神经元样细胞表达单胺类受体mRNA被引量：1
- 2009年
- 目的检测体外人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)经DMSO/BHA联合诱导后所分化的神经元样细胞表达单胺类受体基因的状况,以探讨体外诱导hMSCs向神经元样细胞分化的条件和机制。方法采用密度梯度离心法和贴壁培养的方法分离纯化hMSCs,DMSO/BHA联合诱导分化,免疫细胞化学法检测神经元特异性烯醇化酶(neurone specific enolase,NSE)的表达,RT-PCR检测5-HT2受体和多巴胺2受体(DRD2)mRNA。结果分离纯化的hMSCs加入诱导剂后,hMSCs形成多极神经元的形态;免疫组化结果显示NSE蛋白表达阳性;RT-PCR结果显示诱导后细胞表达5-HT2受体的mRNA,而不表达DRD2的mRNA。结论DMSO/BHA可诱导hMSCs表达5-HT受体基因,但不表达DRD2受体基因。
- 段萍许燕吴素霞韩雪飞鄢文海邢莹
- 关键词：分化神经细胞5-HT受体
- OCILRP2-Fc对小鼠内毒素血症的保护作用
- 研究背景:固有免疫系统识别病原菌的成分尤其是革兰阴性菌的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)可以启动机体的炎症反应,严重时可发生败血症,导致感染性休克、多器官功能衰竭、弥漫性血管内凝血等。通过干扰LPS...
- 杨菲柴立辉吴素霞李伟华马远方
- 关键词：脂多糖败血症核因子-ΚB
- 文献传递
