吴大强 作品数:60 被引量:300 H指数:10 供职机构: 安徽中医药大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 安徽省自然科学基金 安徽省教育厅重点项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 农业科学 生物学 更多>>
鱼腥草素钠抑制铜绿假单胞菌致病相关运动能力的研究 被引量:6 2015年 鱼腥草素钠(sodium houttuyfonate,SH)是一种有效抑制致病菌感染的传统中药鱼腥草的活性成分的衍生物,但其抑菌机制尚没有被阐明。本研究通过铜绿假单胞菌运动能力试验发现,SH可在有效抑制与细菌致病性相关的浮泳运动、蹭行运动和集群运动能力。平板分析法实验结果表明24 h内SH对浮泳运动、蹭行运动和48 h内SH对集群运动的抑制趋势呈现显著的浓度依赖性特点;并且在1倍SH最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)(512 mg·L^(-1))条件下,细菌的运动能力和阳性对照阿奇霉素(1倍MIC 16 mg·L^(-1))样基本丧失。进一步,基因表达分析发现SH显著抑制铜绿假单胞菌的鞭毛和菌毛结构基因flgB和pilG的表达,提示SH抑制细菌运动能力的可能机制是通过抑制细菌运动相关的特殊结构鞭毛和菌毛的合成而产生。因此,该研究结果首次证明SH可有效抑制细菌的运动能力,并探讨了抑制机制,为该药物在临床上治疗条件性致病菌铜绿假单胞菌提供理论依据。 吴大强 黄卫锋 段强军 程惠娟 汪长中关键词:鱼腥草素钠 铜绿假单胞菌 正交设计优化根癌农杆菌介导的玉米遗传转化体系 被引量:2 2007年 采用GUS基因瞬时表达检测的方法,利用正交试验法对玉米根癌农杆菌介导的玉米遗传转化体系的菌液OD值、侵染时间、AS浓度、共培养时间4个因素在3个水平上进行优化试验。通过对试验结果进行直观分析,方差分析和因素内多重比较分析,得到了稳定的转化体系,即菌液OD值0.6,侵染时间30min,AS浓度200μmol/L,共培养时间2d。采用优化后的玉米转化体系进行试验,通过PCR验证,得到了转基因植株,初步建立了农杆菌介导的玉米遗传转化体系。 吴大强 汪结明 程潇 程备久 朱苏文 项艳关键词:玉米 正交设计 农杆菌 基于pH信号通路的白头翁汤正丁醇提取物对白念珠菌生物膜作用机制的研究 被引量:8 2019年 该文基于pH信号通路探讨白头翁汤正丁醇提取物(butyl alcohol extract of Baitouweng Decoction,BAEB)对白念珠菌生物膜的影响。以扫描电镜观察pH突变株生物膜形态结构; CLSM测量pH突变株生物膜厚度;酶标仪检测pH突变株生物膜活性;流式细胞仪检测pH突变株生物膜损伤; qRT-PCR法检测pH突变株生物膜相关基因的表达。结果显示,对生物膜结构,PHR1基因缺失造成结构缺陷,PHR1回补则基质较多; BAEB干预对该2株无明显影响。RIM101基因缺失或回补无明显结构损伤,但BAEB干预后,这2种菌株生物膜均被明显抑制。对生物膜厚度,PHR1基因缺失或PHR1回补的厚度降低;BAEB干预后,该2株厚度变化不明显。而RIM101基因缺失或回补对生物膜厚度影响不大;加入BAEB后,该2株生物膜厚度明显变薄。对生物膜活性,PHR1基因缺失、PHR1回补和RIM101基因缺失均造成活性降低,RIM101回补无明显变化;BAEB干预后,PHR1基因缺失、PHR1回补、RIM101缺失与RIM101回补的生物膜活性与干预前相比显著降低。对生物膜损伤程度,PHR1基因缺失、PHR1回补和RIM101基因缺失、RIM101回补均出现不同程度损伤;加入BAEB干预后,PHR1缺失或PHR1回补的损伤率差异并不大,但RIM101缺失或RIM101回补的损伤率显著升高。对基因表达水平,除HSP90基因上调外,PHR1缺失、PHR1回补、RIM101缺失、RIM101回补的ALS3,SUN41,HWP1,UME6和PGA10基因均出现了不同倍数的下调趋势。该研究表明,pH信号通路中PHR1和RIM101基因突变能提高菌株对于抗真菌药物BAEB的敏感性,从而抑制白念珠菌生物膜形成及相关基因的表达。 汪云霞 马克龙 马克龙 吴大强 王艳 汪天明 吴大强白头翁汤正丁醇提取物通过激活BMP信号通路治疗溃疡性结肠炎的作用机制研究 被引量:2 2024年 该研究旨在探讨白头翁汤正丁醇提取物(n-butanol extract of Pulsatilla Decoction,BEPD)通过激活骨形态发生蛋白(BMP)信号通路发挥对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用。C57BL/6小鼠分为6组:对照组、模型组、美沙拉嗪组及BEPD低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组小鼠连续7 d自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)建立UC模型,然后进行不同浓度的BEPD和美沙拉嗪灌胃治疗。记录各组小鼠体质量和疾病活动指数(disease activity index,DAI)。处死小鼠后,取结肠组织进行组织学分析,采用阿利新蓝/过碘酸雪夫(AB/PAS)染色法检测杯状细胞的数量及黏液分泌状况,免疫组化法检测结肠组织中增殖标志物ki67、活化半胱天冬酶3(cleaved caspase-3)、粘蛋白2(mucin 2,Muc2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达,免疫荧光法检测结肠组织中紧密连接蛋白的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β和IL-6的水平,Western blot检测小鼠结肠组织中与BMP通路相关蛋白的表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测小鼠结肠杯状细胞分化相关基因表达。在体外细胞学实验中,进一步验证BEPD含药血清对脂多糖(LPS)诱导下的LS174T杯状细胞屏障功能的保护作用及其机制。结果表明,BEPD显著缓解UC小鼠的一般症状,恢复杯状细胞分化功能,促进Muc2分泌和紧密连接蛋白的表达,并抑制炎症因子的分泌,同时激活BMP信号通路。因此,该研究提示BEPD可能通过激活BMP信号通路发挥治疗UC的作用,为药物干预UC提供了新的思路。 蒋晓娟 王亚东 孙娟 孙娟 马克龙 邵菁 吴大强 汪长中关键词:肠黏膜屏障 杯状细胞 一种念珠菌属真菌生物被膜胞外基质的提取方法 一种念珠菌属真菌生物被膜胞外基质的提取方法,包括成膜导管片的制得,以及将成膜导管片放于磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液或Tris‑HCl缓冲液中,接着先进行涡旋震荡,再进行超声处理,得到悬浮液;接下来将所述悬浮液与离子交换树... 邵菁 汪天明 施高翔 段强军 吴大强 笪文悦 汪长中 颜贵明文献传递 “以生为本,德才兼备”为理念的免疫学线上教学实践 被引量:2 2020年 “以德为先,能力为重,全面发展”是我国教育改革发展的战略主题。为切实贯彻党的教育方针,响应时代要求,落实医学人才“以生为本,德才兼备”的培养模式,本文总结了此次疫情下免疫学线上教学实践中采取的可行有效举措,为相关课程的教学改革提供参考和依据。 王艳 汪长中 官妍 邵菁 吴大强 叶树关键词:免疫学 线上教学 以生为本 德才兼备 白头翁汤正丁醇提取物对酸性条件下白念珠菌pH突变株黏附的影响 被引量:3 2019年 目的 基于pH信号通路探讨白头翁汤正丁醇提取物(butyl alcohol extract of Baitouweng Decoction,BAEB)对白念珠菌黏附的影响。方法 Spotassay检测酸性条件下pH突变株的活性;XTT法检测酸性条件下pH突变株黏附时的代谢活力;荧光显微镜观察酸性条件下pH突变株细胞黏附活力;正辛烷容纳法测定酸性条件下pH突变株疏水性;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测酸性条件下pH突变株黏附相关基因的表达。结果 512μg/m L BAEB对共培养24、48 h的pH突变株的活性影响不大;phr2/phr2在酸性条件下代谢活性低,512μg/m L BAEB可明显抑制白念珠菌野生株(WT)、PHR2回补菌株、rim101/rim101、RIM101回补菌株的代谢活性,对phr2/phr2代谢活性影响不大;512μg/m L BAEB可明显抑制WT、PHR2回补菌株、rim101/rim101、RIM101回补菌株的细胞黏附活力,phr2/phr2加药前后细胞黏附活性无明显变化;512μg/mL BAEB对WT、phr2/phr2、PHR2回补、rim101/rim101及RIM101回补菌株的细胞表面疏水性影响不明显;q RT-PCR法检测512μg/m L BAEB对pH突变株在酸性条件下黏附相关基因作用不明显,但1 024μg/m L BAEB则对大多数黏附相关基因有明显抑制作用。结论 BAEB在酸性条件下能一定程度抑制白念珠菌的黏附。 汪云霞 马克龙 马克龙 吴大强 王艳 汪天明 吴大强关键词:白头翁汤 正丁醇提取物 白念珠菌 中药通过免疫调节抗外阴阴道念珠菌病研究进展 2024年 外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)发生率近年来呈上升趋势,氟康唑等一线抗真菌药物因长期使用导致菌株耐药现象日益严重。中药治疗VVC具有低不良反应和低复发率、不易耐药等优势,其对于VVC的治疗除了一定程度直接作用于菌体外,主要通过调节机体免疫功能发挥效应。通过对近年来中药从免疫调节角度对VVC作用机制的最新研究进展进行综述,为中药干预VVC提供新的思路或借鉴。 吴惠 吴大强 邵菁 邵菁 汪长中关键词:外阴阴道念珠菌病 免疫调节 固有免疫 适应性免疫 蛇床子 姜黄素 正交设计在杨树最佳遗传转化体系的建立 2012年 本试验以建立的南林95杨高频再生体系为基础,利用正交试验设计,通过GUS组织染色分析法研究了预培养时间、菌液浓度、AS浓度、侵染时间和共培养时间5个因素在4个水平上对南林95杨遗传转化的影响,并探讨了南林95杨转化中添加卡那霉素的适宜浓度。运用DPS软件对试验结果进行分析,建立了杨树遗传转化体系。结果表明:外植体预培养7d,在含AS200μmol/L的菌液浓度为0.6的农杆菌液中侵染20min,共培养3d为最佳遗传转化体系,适宜的卡那霉素筛选浓度为50mg/L;本试验共获得6株转化植株,经GUS染色检测和PCR分析表明,GUS基因已初步整合进入南林95杨基因组中。 蔡诚 吴大强 纵方 项艳关键词:杨树 正交设计 农杆菌 HPLC法研究不同品种、不同生长期亳白芍的质量 被引量:2 2021年 对不同品种、不同生长期的亳白芍进行质量研究。采用高效液相色谱法对不同品种、不同生长期的亳白芍中芍药苷的含量进行比较研究,并按照《中国药典》2020年版对其他理化指标进行研究。所有样品的测定指标均符合2020年版《中国药典》一部要求。所有样品在与对照品相同位置上均显相同颜色斑点。4年生蒲棒和5年生线条亳白芍中含芍药苷较高。结果表明亳白芍最佳品种和采收年限为4年生蒲棒和5年生线条。 黄卫锋 李芳 吴大强 张振谯关键词:亳白芍 不同生长期 芍药苷