吕继洲
- 作品数：86 被引量：95H指数：7
- 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家质检总局科技计划项目浙江省重大科技专项基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测技术的建立和应用被引量：2
- 2019年
- 为快速和准确检测炭疽杆菌,本研究以炭疽杆菌染色体上的BA5345基因和pXO1质粒上的PA基因为靶基因设计特异性引物和探针,建立了炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与常规PCR方法一起对临床样品进行检测。结果显示,所建立方法特异性强,与蜡样芽胞杆菌群中其他芽胞杆菌无交叉反应;对BA5345基因和PA基因的最低检测限分别为8.0和7.8拷贝·μL^-1,标准曲线相关系数大于0.99,组内和组间CV均小于1.5%。对35份污染皮毛样品检测显示BA5345基因和PA基因的检出率分别为80.0%和82.9%,与常规PCR检测方法相比,敏感性更高。本研究为炭疽杆菌的检测和流行病学调查提供了一种快速、准确的检测方法。
- 王素华帅江冰李舟袁淑辉吴绍强吕继洲赵治国
- 关键词：炭疽杆菌
- 真鲷虹彩病毒LAMP检测方法的建立被引量：1
- 2018年
- 为建立一种检测真鲷虹彩病毒的环介导等温扩增(LAMP)方法,满足口岸、养殖场对该病的快速监测的需求,本研究比对分析了Gen Bank中公布的真鲷虹彩病毒基因组序列,筛选其主要衣壳蛋白MCP基因保守区序列,进行LAMP引物设计,建立了真鲷虹彩病毒LAMP检测方法。对扩增条件进行优化,确定最佳反应条件为62℃,45 min。灵敏度试验结果显示,该方法最低检测限为100拷贝/μL目的基因。特异性试验结果显示,该方法不与流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、蛙病毒3型(FV3)、甲鱼虹彩病毒(STIV)发生交叉反应。结果表明,本研究建立的LAMP方法具有良好的敏感性和特异性。对5份疑似真鲷虹彩病毒感染的临床样品进行检测,发现检测结果与世界动物卫生组织(OIE)推荐的PCR方法检测结果符合率为100%。研究表明,本方法具有灵敏度高、特异性强,以及仪器设备简单、操作便捷、结果直观等优点,非常适合作为初筛手段,应用于养殖场、口岸等一线的疫病监测。
- 袁向芬石素婷吕继洲吴绍强
- 关键词：水生动物疫病环介导等温扩增
- 蜱传反刍动物艾立希体巢式PCR检测方法的建立及应用被引量：2
- 2019年
- 为建立一种快速、敏感检测反刍动物艾立希体的方法,本研究根据GenBank中登录的反刍动物艾立希体pCS20基因保守区设计2对特异性引物,经各反应条件的优化,建立了反刍动物艾立希体巢式PCR检测方法。结果显示,该方法可以特异性检测反刍动物艾立希体DNA,而对牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、牛环形泰勒虫和弓形虫的检测均为阴性,具有良好的特异性;该方法灵敏度可达1.04×101拷贝/μL,是反刍动物艾立希体实时荧光PCR检测试剂盒的10倍,是常规PCR的1 000倍。对50只血蜱、花蜱和微小牛蜱DNA进行检测,巢式PCR、反刍动物艾立希体实时荧光PCR检测试剂盒和常规PCR的阳性检出率分别为26.0%,14.0%和0.0%。本试验建立的巢式PCR检测方法适用于反刍动物艾立希体病的早期诊断和分子流行病学调查,为蜱传反刍动物艾立希体病的防控提供技术支持。
- 王素华袁淑辉吴绍强吕继洲帅江冰张晓峰赵治国
- 关键词：巢式PCR蜱传
- 草原革蜱和边缘革蜱的分子生物学鉴定被引量：9
- 2013年
- 本研究旨在建立草原革蜱和边缘革蜱的分子生物学鉴定方法,并探讨其系统发生关系。在新疆从动物体表采集寄生蜱,形态学鉴定后,PCR扩增获得2种革蜱的16S rRNA及线粒体色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列,测序后进行同源性分析。用Mega 5.0和Mrbayes 3.2软件分别构建系统进化树,草原革蜱16S rRNA序列与GenBank数据库中已知草原革蜱16S rRNA序列聚类,而边缘革蜱COⅠ序列与GenBank数据库中已知边缘革蜱COⅠ序列聚类,与形态学鉴定结果一致。本研究结果表明,在传统形态学分类的基础上,结合分子生物学鉴定方法能简易、准确鉴定草原革蜱和边缘革蜱。
- 吕继洲王振宝袁向芬吴绍强
- 关键词：RRNA草原革蜱分子鉴定
- 锦鲤肌肉细胞系及其体外培养的方法和应用
- 本公开涉及锦鲤肌肉细胞系及其体外培养的方法和应用。本公开特别涉及一种锦鲤肌肉细胞系，及其体外培养方法和应用。
- 景宏丽陈冬杰高隆英孔玉方王娜张旻吴绍强吕继洲
- 用于鉴定草原血蜱的靶序列、引物、鉴定方法及试剂盒
- 本发明提供了用于鉴定草原血蜱的靶序列、引物、鉴定方法及试剂盒，属于蜱虫检测与鉴定技术领域。所述靶序列为用于鉴定草原血蜱的特异性DNA序列，如SEQ ID NO.1所示，是首次扩增出的草原血蜱COI全长序列的一段。通过分析...
- 林祥梅吕继洲张舟吴绍强王慧煜王彩霞
- 文献传递
- 一种高通量等温扩增荧光检测分析装置
- 本发明公开了一种高通量等温扩增荧光检测分析装置，采用圆盘结构作为反应试剂加热模块，允许通过结构叠加，实现更高通量扩增。加热孔位兼容不同体积的反应试管，由此允许实现不同体积下的等温扩增检测。采用中心加热棒作为主加热器、边缘...
- 刘国宪吕继洲刘琼瑶娄志英
- 猪流行性腹泻病毒荧光RPA检测方法
- 本发明涉及生物技术领域，具体公开了用于RPA技术快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)中的M基因的引物、探针组合及检测方法。正向引物序列如SEQ ID No.1所示，反向引物序列如SEQ ID No.2所示，探针序列如SE...
- 吕继洲袁向芬范燕茹吴绍强冯春燕
- 文献传递
- 布尼亚病毒基因重排机制研究进展被引量：2
- 2019年
- 近年来,发热伴血小板减少综合征(俗称"蜱咬病")、施马伦贝格病等的发生引起人类对布尼亚病毒的广泛关注。布尼亚病毒是一类传染性强、致死率高的负链RNA病毒。由于其基因组的分段性质,使它的病毒成员之间易发生基因重排,产生致病力增强和宿主范围增加的新病毒,对人类公共卫生构成了重大威胁。从自然界中的布尼亚病毒重排现象、布尼亚病毒的基因重排机理以及基因重排的潜在致病危害等方面对相关研究进行综述,并对下一步的重排机制研究及疫苗研究提出展望,旨为该病的预防与控制提供理论依据。
- 石坤林祥梅吕继洲邓俊花吴绍强
- 关键词：布尼亚病毒基因重排分子机理
- 用于检测施马伦贝格病毒的荧光定量RT-PCR引物和探针
- 本发明提供了一种用于检测施马伦贝格病毒的荧光定量RT-PCR引物和探针，所述引物和探针的核苷酸序列如SEQ ID No.1-3所示。本发明提供的引物和探针的检测灵敏度可达10<Sup>-7</Sup>SBV RNA标准品...
- 张永宁吴绍强林祥梅吕继洲王彩霞邓俊花袁向芬
- 文献传递
