叶卫翔 作品数:12 被引量:46 H指数:5 供职机构: 深圳出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 国家自然科学基金 深圳出入境检验检疫局科研项目 更多>> 相关领域: 理学 轻工技术与工程 生物学 医药卫生 更多>>
双抗体夹心ELISA法测定食物中大豆过敏原蛋白成分 被引量:9 2009年 通过建立双抗体夹心ELISA法测定食物中大豆过敏原蛋白成分,为进出口食品中大豆过敏原成分检测和食物过敏性疾病的预防提供技术基础。提取大豆总蛋白,免疫小鼠制备抗大豆总蛋白的多克隆抗体,用该抗体做包被抗体,并用生物素标记该多抗作为捕捉抗体,从而建立双多抗体夹心ELISA法;检测该方法的灵敏度,同时检测10种食品中是否含有大豆过敏原蛋白成分。SDS-PAGE电泳结果显示大豆过敏原总蛋白在120、60、35、30、28、18ku处条带明显;免疫印迹显示,这些条带与制备的高效价抗大豆蛋白的多抗具有明显的阳性反应。检测食品中大豆过敏原蛋白成分双抗体夹心ELISA法最低检出限为~100ng/mL,标准曲线在100ng/mL~12.8μg/mL范围内线性良好;10种进口食品检测结果与食物过敏原标签标注内容相符。 陈家杰 朱海 叶卫翔 吉坤美 刘志刚关键词:ELISA 多克隆抗体 食物过敏 液相色谱三级四极杆质谱法快速测定动物组织中维吉霉素M_1残留量 被引量:3 2010年 建立了鸡肉、鸡肝、鸡肾、猪肾和牛肾样品中维吉霉素M1残留的液质联用确证方法。用乙腈萃取样品中维吉霉素M1残留,然后用水稀释和正己烷脱脂后,进样分析。采用YMC-PackProC18色谱柱进行分离,在正离子模式下采用电喷雾电离串联质谱仪进行测定。方法的定量限分别为:鸡肉25μg/kg、鸡肝100μg/kg、鸡肾100μg/kg、猪肾150μg/kg、牛肾100μg/kg。方法的回收率为:鸡肉86.8%-108%,鸡肝81.8%-109%,鸡肾85.5%-102%,猪肾82.7%-102%,牛肾80.7%-103%;室内相对标准偏差为:鸡肉4.3%-6.7%,鸡肝3.3%-7.3%,鸡肾2.8%-4.6%,猪肾1.9%-4.1%,牛肾3.4%-6.9%。该方法简便、快速、准确,各项技术指标满足国内外法规的要求,可用于动物组织样品中维吉霉素M1残留量的快速确证检测。 陈小霞 岳振峰 叶卫翔 赵凤娟 饶丽 葛丽雅 欧阳姗关键词:动物组织 蜜蜂主要变应原酸性磷酸酯酶基因的克隆及原核表达载体的构建 2010年 目的克隆蜜蜂Apis cerana cerana主要变应原酸性磷酸酯酶(Api m3)基因,构建其原核表达载体。方法根据已知序列设计带有酶切位点的特异性引物,以提取的蜜蜂总RNA为模板RT-PCR扩增目的基因,并进行序列分析。将基因片段亚克隆到PET-28a表达载体上。结果获得蜜蜂Api m3基因,构建了其原核表达载体。基因分析显示该基因全长1 167 bp,编码388个氨基酸,推测分子质量单位为45.279 9 ku,等电点为5.53。序列分析显示与Gen-Bank中已知基因的同源性为97%。结论成功克隆蜜蜂Api m3基因并构建原核表达载体,对进一步进行变应原表达和免疫学活性鉴定有积极意义。 张强 叶卫翔 刘志刚 陈思 罗新萍 黄钟关键词:蜜蜂 基因克隆 原核表达载体 非传统食品安全问题分析与应对措施 本文介绍了非传统食品安全问题及其产生原因,针对食品生产企业在非传统食品安全事件所起作用进行了定性分析,提出实施食品安全防护计划将有助于解决个别企业的非传统食品安全问题。同时指出,食品生产者自律是消除非传统食品安全问题的关... 李和平 叶卫翔 黄斌 孙霓关键词:食品安全法 液相色谱串联质谱法快速测定牛奶与鸡蛋中的维吉霉素M_1残留量 被引量:9 2009年 建立了牛奶和鸡蛋样品中维吉霉素M1残留的液质联用确证方法。用乙腈萃取样品中的维吉霉素M1残留,水稀释后,正己烷脱脂,以YMC—Pack Pro C18色谱柱为分离柱,在正离子模式下以电喷雾电离串联质谱仪进行测定。方法的线性范围为2.5~25μg/L,定量下限为50μg/kg。在50、100、200μg/kg 3个浓度水平进行加标回收实验,回收率为72%~99%,相对标准偏差为2.7%~6.1%。该方法简便、快速、准确,各项技术指标满足国内外法规的要求,可用于牛奶和鸡蛋样品中维吉霉素M1残留的快速确证检测。 陈小霞 岳振峰 叶卫翔 赵凤娟 张建莹 侯乐锡 林黎关键词:牛奶 鸡蛋 动物组织中氨苯砜及其代谢产物残留量的液相色谱串联质谱法测定 被引量:11 2009年 建立了动物组织中氨苯砜及其代谢产物N-乙酰氨苯砜的液相色谱-电喷雾串联质谱检测方法(HPLC-ESIMS/MS)。采用YMC-Pack ProC18(3μm,100mm×2.0mmi.d.)反相色谱柱,以碱性乙腈为提取液,以HLB和MCX固相萃取柱为净化柱,乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速0.3mL/min,以正离子多反应监测模式测定,同位素内标法定量,进样量15μL。方法的定量下限为0.5μg/kg,线性范围为0.5~5.0μg/kg,加标回收率为92%~103%,相对标准偏差为4.8%~11.0%。该法具有灵敏、准确等优点,适用于动物组织中氨苯砜及其代谢产物N-乙酰氨苯砜残留的确证检测。 田云 岳振峰 叶卫翔 赵凤娟 侯乐锡 饶丽 郑必胜关键词:氨苯砜 动物组织 一种呋喃妥因残留酶联免疫检测试剂盒 本发明公开了一种呋喃妥因残留酶联免疫检测试剂盒,包括:a)酶标板,所述的酶标板包被有呋喃妥因代谢物AHD或者呋喃妥因代谢物衍生物跟蛋白质的偶联抗原;b)标准溶液,所述标准品为邻硝基苯甲醛先溶于二甲亚砜,再跟海特因衍生物反... 朱海 岳振峰 叶卫翔 范放 汤慕瑾 张恒 郑晓燕文献传递 环介导等温扩增技术LAMP检测霍乱弧菌mdh基因及其检测试剂盒 本发明属于生物技术应用领域,用于测定微生物,涉及一种基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术的霍乱弧菌快速检测技术。本发明通过计算机软件分析霍乱弧菌... 匡燕云 叶卫翔 范放 朱海 吕敬章 赵芳 洪小柳 刘慧玲 万志刚 马淑棉 黄李华 宋志强文献传递 检测氯丙嗪的时间分辨荧光免疫分析试剂盒及其检测方法 一种检测氯丙嗪(CPZ)的试剂盒及其检测方法,属于时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术领域,用于对肉类,鱼类等动物性食品中氯丙嗪含量的检测。本发明配制的试剂盒,采用TRFIA检测CPZ,测定的基础是标记免疫反应。微孔板... 岳振峰 于国君 叶卫翔 匡燕云 黄飚 张珏 张艺 陈蕴 金坚 朱海文献传递 金属硫蛋白MT-2a与Cd(Ⅱ)和Cu(Ⅰ)络合的电喷雾质谱表征 被引量:2 2009年 采用电喷雾质谱法(ESI-MS)研究金属硫蛋白(MT,存在α和β两种结构域)-2a与金属离子Cd(Ⅱ)和Cu(Ⅰ)的络合作用。MT-2a由反相色谱分离纯化制得,并以电喷雾质谱鉴别。通过ESI-MS考察MT-2a与不同量的Cd和Cu的络合,结果表明,Cd(Ⅱ)能够优先与MT的α结构域络合,形成M42+S11结构,并且该络合过程存在着明显的协同效应;Cd(Ⅱ)与MT的β结构域的络合形式为M24+S9,其呈现出明显的随机松散络合特性;Cu(Ⅰ)优先与MT的β结构域络合,其络合形式由Cu4逐渐过渡到更高结合态;在Cu(Ⅰ)含量较高的条件下,Cu(Ⅰ)与MT呈现出多种络合方式。 沈金灿 叶卫翔 康海宁 葛丽雅 庄峙厦 王小如关键词:电喷雾质谱 金属硫蛋白 络合作用