历俊华
- 作品数：88 被引量：346H指数：10
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 种植神经干细胞-许旺细胞的共聚物支架移植修复大鼠损伤脊髓被引量：4
- 2012年
- 背景:前期实验显示,在体外乙交酯-丙交酯共聚物支架与神经干细胞和许旺细胞有良好的相容性。目的:观察与许旺细胞共移植,神经干细胞是否能在乙交酯-丙交酯共聚物取向支架内存活、分化,乙交酯-丙交酯共聚物组织工程复合物是否能促进轴突再生及其髓鞘化。方法:制作成年Wistar大鼠T8段半横断脊髓损伤模型,随机分为3组:支架组植入乙交酯-丙交酯共聚物支架,神经干细胞组植入接种神经干细胞(标记绿色荧光蛋白)的乙交酯-丙交酯共聚物取向支架,联合组植入接种神经干细胞(标记绿色荧光蛋白)和许旺细胞的乙交酯-丙交酯共聚物取向支架。结果与结论:移植的神经干细胞可在大鼠脊髓内存活,并迁移至邻近脊髓,联合组标记绿色荧光蛋白阳性细胞存活率显著高于神经干细胞组(P<0.001)。联合组胶质纤维酸性蛋白/标记绿色荧光蛋白双阳性细胞多于神经元特异性烯醇化酶/标记绿色荧光蛋白双阳性细胞,神经干细胞组未发现神经元特异性烯醇化酶/标记绿色荧光蛋白双阳性细胞。联合组有少部分绿色荧光蛋白阳性细胞表达突触素,再生轴突和有髓轴突数量高于其他两组,但差异无显著性意义(P=0.058)。表明与许旺细胞共移植,可促进神经干细胞向神经元样细胞分化,少部分神经元样细胞还可能形成了突触连接;种植了神经干细胞和许旺细胞的乙交酯-丙交酯共聚物支架可促进轴突再生及其髓鞘化。
- 夏雷郝淑煜李德志陈刚高川川历俊华万虹
- 关键词：脊髓损伤细胞移植神经干细胞许旺细胞
- 转染绿色荧光蛋白的神经干细胞移植于半横断脊髓损伤处的体内外分化研究被引量：3
- 2010年
- 目的 观察转染绿色荧光蛋白（GFP）的大鼠脊髓神经干细胞移植于半横断脊髓损伤处的体内外分化情况.方法 将表达GFP的慢病毒载体转染胎鼠脊髓神经干细胞,体外用10%胎牛血清诱导分化.转染后的神经干细胞与PLGA支架移植于大鼠半横断脊髓损伤处,术后1个月和3个月取材,行GFAP、NF和CNP免疫荧光染色.结果 转染GFP的神经干细胞球表达强烈的绿色荧光,体外分化可见GFAP/GFP、NF/GFP和CNP/GFP双阳性细胞,GFAP/GFP双阳性细胞明显多于其他两种.移植后3个月,GFP阳性细胞在脊髓内明显减少,可见少数GFAP/GFP和CNP/GFP舣阳性细胞,未见NF/GFP双阳性细胞.结论 转染GFP的神经干细胞可在体外增殖和分化,但大部分分化成胶质细胞.移植于急性期脊髓损伤处的神经干细胞不被诱导分化成神经元样细胞,可被诱导分化成神经胶质细胞.
- 郝淑煜夏雷李德志历俊华杨飞王身国万虹
- 关键词：绿色荧光蛋白神经干细胞分化
- 神经干细胞-施万细胞-聚乳酸-羟基乙酸共聚物支架移植对脊髓损伤大鼠的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨种植神经干细胞(NSCs)与施万细胞(SCs)的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)支架移植促进脊髓损伤大鼠神经功能恢复的作用及机制。方法体外培养NSCs和SCs,以PLGA为支架移植入大鼠T8半横断脊髓损伤处。实验动物随机分为PLGA组、PLGA+NSCs组和PLGA+NSCs+SCs组。术前和术后进行皮层运动诱发电位(CMEPs)检查及BBB评分;然后在同侧或对侧进行T6再次半横断,并进行CMEPs检测及BBB评分。结果 CMEPs的恢复率及波幅在PLGA+NSCs+SCs组最高。移植后,大鼠BBB评分逐渐改善;在移植后第2周及以后,PLGA+NSCs组和PLGA+NSCs+SCs组的BBB评分显著高于PLGA组(P<0.001)。同侧再次半横断后,CMEPs消失,BBB评分快速恢复;对侧再次半横断后,大鼠双下肢完全瘫痪。结论种植NSCs和SCs的PLGA支架移植有利于脊髓损伤功能重建,再生轴突可能形成了功能性连接;但是同侧再生轴突对脊髓功能的恢复作用有限。
- 夏雷郝淑煜李德志陈刚高川川历俊华万虹
- 关键词：脊髓损伤神经干细胞施万细胞聚乳酸-羟基乙酸共聚物
- 大鼠骨髓基质细胞体外分化为内皮细胞静脉移植治疗大鼠局灶脑缺血动物行为学研究被引量：4
- 2006年
- 目的观察骨髓基质细胞体外诱导分化为内皮细胞后静脉移植治疗大鼠永久大脑中动脉闭塞(MCAO)模型动物行为学改善情况。方法利用高浓度(400μg/L)rhGM-CSF(重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)在体外诱导骨髓基质细胞分化为内皮细胞,在细胞移植前进行BrdU(10μmol/L)标记16 h备用。线栓法制作永久SD大鼠MCAO模型(n=45),模型动物随机分为3组:MCAO+移植细胞组(n=15):每只大鼠舌静脉移植3×106的诱导分化后的内皮细胞(相当于0.2 mL细胞悬液);MCAO+移植PBS对照组1(n=15):每只大鼠舌静脉移植0.2 mL的PBS;MCAO对照组2(n=10):血管闭塞后不给予任何干预治疗。在细胞移植前及移植后1、3、5、7、14 d分别采用下列动物行为学评价指标:姿势反射实验,肢体不对称应用试验,角落实验。结果细胞移植组动物行为学评分优于2个对照组,特别是在移植后第7天和第14天较2个对照组差异有统计学意义(P<0.05);细胞移植组在移植后动物行为学评分较移植前有改善,特别是在移植后第7天和第14天较移植后1、3、5 d有显著改善(P<0.05)。结论骨髓基质细胞体外诱导分化后的内皮细胞静脉移植可以改善大鼠局灶脑缺血的神经功能,在移植后第7天开始表现出神经功能的改善,第14天功能改善更明显,其机制尚需进一步研究。
- 王春雪姜华毛淑静万虹历俊华刘丽萍梁德君梁宪红翟晶王拥军
- 关键词：骨髓基质细胞内皮细胞局灶脑缺血动物行为学
- 儿童弥散内生型脑桥胶质瘤的自然病史及预后因素分析被引量：9
- 2015年
- 目的 探讨未经治疗的弥散内生型脑桥胶质瘤（DIPG）患儿的自然病史及预后因素.方法 对2010年10月至2012年6月就诊于首都医科大学附属北京天坛医院神经外科的20例DIPG患儿进行回顾性分析,纳入分析的预后因素包括：性别、年龄、有无外展神经麻痹、病变有无强化、病变是否包绕基底动脉、病变是否突破脑干表面向外生长、有无脑积水、病史长短以及就诊时的远期生活质量评估量表（KPS）评分.结果 中位生存期为23周,1年生存率为10％,2年生存率为5％.病变强化组的生存期比无强化组长,但差异无统计学意义（P＞0.05）.单因素分析结果表明,性别、病史长短和就诊时的KPS评分与预后相关（P=0.01）,而在多因素分析中,仅病史≤1.5个月及就诊时KPS评分≤70分为预后影响因素（P=0.05）.结论 对于DIPG患儿,病史和就诊时KPS评分是预后相关因素.早期有无外展神经麻痹及病变是否包绕基底动脉和预后无关.年龄、病变是否强化和脑积水的处理与否是否影响预后仍存争议.
- 泮长存汤劼李德志阴鲁鑫武文浩王宇历俊华万虹张力伟
- 关键词：自然病史预后
- β-catenin蛋白在成人脑干和幕上胶质瘤中的表达及其意义被引量：1
- 2009年
- 目的通过检测β—catenin蛋白在正常脑组织、脑干和幕上胶质瘤中的表达，探讨Wnt／β-catenin信号转导途径在脑干和幕上胶质瘤发生中的作用。方法采用免疫组织化学和Western blot方法检测β-catenin在6例正常脑组织、10例Ⅱ级脑干胶质瘤和10例Ⅱ级幕上胶质瘤中的表达。结果β—catenin在正常脑组织中为胞膜表达，在脑干和幕上胶质瘤中为胞质表达。半定量分析β—catenin电泳条带表明其在三组中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Wnt／β-catenin信号转导途径虽然参与了脑干和幕上胶质瘤的发生，但尚不能认为其是导致脑干胶质瘤患者较幕上胶质瘤患者预后差的决定性因素。
- 武文浩宋咏梅万虹历俊华马俊艳张力伟
- 关键词：神经胶质瘤脑干BLOT
- Wnt/β-catenin信号转导途径相关分子在脑干胶质瘤中的表达及其意义被引量：6
- 2015年
- 目的 通过检测Wnt/β-catenin信号转导途径相关分子在脑干胶质瘤中的表达,探讨其在脑干胶质瘤发生发展中的作用.方法 选取2009年5月至2011年5月首都医科大学附属北京天坛医院神经外科收集的24例脑干胶质瘤标本（包括16例低级别脑干胶质瘤和8例高级别脑干胶质瘤）和6例正常脑组织标本.采用Western blot及免疫组化方法检测Wnt-1、Wnt-2、β-catenin及C-myc在正常脑组织及不同级别的脑干胶质瘤中的表达,并分析其与临床病理相关因素之间的关系.结果 Wnt-1在高、低级别脑干胶质瘤中的表达均高于正常脑组织（P＜0.05）,而在高级别和低级别脑干胶质瘤中的表达差异无统计学意义（P＞0.05）;Wnt-2、β-catenin及C-myc在高级别脑干胶质瘤中的表达均明显高于其在低级别脑干胶质瘤和正常脑组织中的表达,并与Ki-67的表达呈正相关（P＜0.05）;Wnt-2及C-myc的表达与脑干胶质瘤患者的预后相关（P＜0.05）,而3-catenin随着表达的增高,总体生存期有缩短的趋势（P＞0.05）.结论 Wnt/β-catenin信号通路在脑干胶质瘤中可能被异常激活,在胶质瘤的发生及发展中发挥着重要作用;Wnt-2、β-catenin和C-myc可作为脑干胶质瘤预后标记分子,并有望成为脑干胶质瘤治疗的潜在靶点.
- 武文浩泮长存田永吉王宇张鹏徐骋宋咏梅历俊华万虹张力伟
- 关键词：神经胶质瘤脑干WNT信号通路Β-链蛋白
- 不同C6细胞种植量对大鼠生存期及脑干胶质瘤生长的影响被引量：1
- 2009年
- 目的观察不同C6细胞数量种植于大鼠脑干部位对大鼠生存期及肿瘤生长速度的影响。方法30只Wistar大鼠随机分成三组，分别将2×10^4（A组）、1×10^6（B组）个C6胶质瘤细胞和等量生理盐水（C组）注射到大鼠桥脑，种植后1、2、3和4周分别通过行为学、生存期、MRI及病理HE染色观察各组之间的差异。结果A组大鼠接种后16d出现行为学异常，而B组大鼠则于第9天出现。A组大鼠平均生存期为（30．80±3．002）d，B组为（19．65±2．277）d。MRI检查显示，接种后2周B组大鼠脑干肿瘤的体积明显大于A组（P〈0．05）。HE染色显示两组肿瘤特点无差异。结论种植2×10^4和1×10^6个细胞量均可成瘤，但接种细胞数量越多成瘤越快，生存期越短。提示我们在制模过程中，应根据具体的实验要求选用不同的细胞数量。
- 王宇田永吉万虹历俊华张力伟
- 关键词：脑干神经胶质瘤动物模型生存期
- 神经干细胞的体外克隆被引量：1
- 2003年
- 为建立神经干细胞体外稳定克隆的培养方法并对克隆进行鉴定,从胚胎大鼠脑组织中分离神经干细胞,采用无血清培养技术,在生长因子的作用下使其稳定增殖克隆。同时利用免疫荧光染色对神经干细胞进行鉴定。结果培养的神经干细胞增殖成神经干细胞球并传代,鉴定为nestin染色阳性细胞。说明利用无血清技术和特定生长因子,可使神经干细胞在体外稳定增殖克隆。
- 杨忠旭栾国明历俊华
- 关键词：神经干细胞免疫荧光染色
- BPI-1095对大鼠局灶性脑缺血后caspase-3蛋白表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的观察BPI-1095对大鼠脑缺血后神经元caspase-3蛋白表达的影响。方法大鼠大脑中动脉闭塞缺血模型(n=90),随机分成6组:BPI-1095大剂量组(240mg/kg)、BPI-1095中剂量组(80mg/kg)、BPI-1095小剂量组(27mg/kg)、阿司匹林组(80mg/kg)、安慰剂组、假手术组。分析梗死面积百分数并观察各组Caspas-3蛋白表达。结果BPI-1095大、中剂量组梗死面积百分数小于安慰剂组(P<0.05);各组脑组织缺血周边和皮层caspase-3表达阳性细胞较安慰剂组减少,大剂量组caspase-3阳性细胞减少最多(P<0.05)。结论BPI-1095对大鼠永久性大脑中动脉闭塞模型的局灶脑缺血有神经保护作用,其作用机制与下调凋亡相关蛋白caspase-3的表达有关。
- 李菁晶毛淑静万虹历俊华翟晶刘丽萍王春雪王拥军
- 关键词：脑缺血CASPASE-3缺血半暗带
