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摇晃蛋白信号链分子在神经元迁移中作用的研究: 大脑是人类高级认知功能的物质基础，神经元迁移是大脑发育的一个至关重要的环节。许多信号通路参与了神经元的迁移过程，其中最重要的信号通路为摇晃蛋白（Reelin）信号级联反应。尽管已经发现了许多摇晃蛋白信号通路的组成部分并对...; 卢习; 关键词：神经元迁移; 文献传递

Reelin引起神经元及放射状胶质细胞分枝: ＜正＞在大脑发育过程中,新生神经元沿着放射状胶质细胞的突起从它们的出生地室带迁移到达它们最终的位置,Reelin在神经元迁移过程中起着非常重要的作用,缺乏Reelin的reeler小鼠大脑皮质被反转。本研究利用子宫内电击...; 黄映雪卢习张伟陈树林赵善廷; 文献传递

鸡胚发育过程四种放射状胶质细胞标记物的对比分析: 2013年; 目的:比较脑脂结合蛋白(Brain lipid binding protein,BLBP)、放射状胶质细胞标记物2(Radial glial cell marker-2,RC2)、巢蛋白(Nestin)和胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)在鸡胚不同发育时期视顶盖胶质细胞(Glial cell,GC)中表达的差异。方法:从鸡胚发育的第8天(E8)开始到E18,分别进行取材、固定、包埋,振荡切片,采用免疫荧光技术对不同发育时期的鸡胚视顶盖的胶质细胞进行标记,同时采用活体原位电转的方法对E8、E10和E12的放射状胶质细胞(Radial glial cells,RGCs)进行标记。结果:从E8开始,BLBP、RC2、Nestin和GFAP均开始表达。BLBP和GFAP抗体标记GC从E8到E18均可表达,BLBP标记的细胞从E14开始出现变化,呈现迁移中神经元的特点,GFAP标记的细胞在E18开始出现变化,呈现星形胶质细胞形态。自E8-E16,RC2和Nestin标记RGCs,但E18时标记RGCs已不明显。结论:4种抗体均可标记E8-E18的GC,在E12之前4种抗体标记RGCs效果相似,而在E12后RC2,Nestin与BLBP标记RGCs开始出现差异,从E18开始GFAP开始标记星形胶质细胞(Astrocyte)。; 杜蕊杨慈清李玲玲段明慧卢习陈树林赵善廷; 关键词：鸡胚胎视顶盖星形胶质细胞免疫荧光技术

小鼠子宫内电转基因方法的建立被引量：1: 2013年; 目的：建立小鼠子宫内电转基因技术，比较分析转染绿色荧光蛋白（GFP）后对胚胎发育及相关蛋白表达的影响。方法：将怀孕15d的小鼠，水合氯醛麻醉后，取出两侧子宫，用毛细管注射针将2μg／μl的pCAGGS-GFP质粒0．5-1μl准确注射到胎鼠侧脑室，在电压40V、每次脉冲60ms，间隔940ms，电脉冲6次的条件下进行定时定位活体电转基因，电转后24h取材，甲醛固定冷冻冠状切片，DAPI染细胞核观察组织形态结构变化，荧光免疫组织化学检测α-SMA的表达差异。结果：妊娠15d孕鼠转染24h后小鼠成活率80％（8／10），胚胎成活率为54．2％（13／24），存活胚胎GFP阳性表达率为61．5％（8／13），GFP阳性表达胚胎脑组织切片，基因转染区域和正常组织区组织形态结构和α-SMA表达不存在差别。结论：成功建立了小鼠子宫内电转基因的方法。; 杨慈清李小英卢习付苏雷赵善廷林俊堂; 关键词：小鼠转基因方法

摇晃蛋白引起神经元分枝并促进树突发育: 2014年; 目的:研究摇晃蛋白与神经元迁移和发育的关系。方法:通过子宫内电击转染质粒pCAG-GFP到胚胎小鼠大脑皮质,标记迁移中的单个神经元。通过免疫组化染色,观察位于大脑皮质不同层中迁移和分化神经元的形态,统计分析神经元顶突起长度与神经元分枝的关系。结果:摇晃蛋白局限性分布于发育中大脑皮质的边缘带。当神经元顶突起接触到含摇晃蛋白的边缘带后,神经元顶突起缩短并开始出现分枝,而且,神经元的剩余顶突起的长度与总的分枝长度呈极显著负相关,且与分枝点的数目呈极显著负相关。结论:摇晃蛋白促进神经元顶突起的分枝并与树突的发育有关。; 卢习范力邵虹段明慧陈树林赵善廷

子宫内电击转染技术在神经元树突棘发育及神经纤维归巢研究中的应用: 2014年; 目的:建立鼠胚子宫内电击转染技术体系(In utero electroporation,IUE),探究该技术在研究神经元发育包括树突棘形成及神经纤维归巢(轴突投射)中应用的可行性。方法:构建带pCAG启动子表达绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的质粒,并将该质粒利用子宫内电击转染技术转染到孕期15.5 d(E15.5)鼠胚大脑皮质的新生神经元中。待小鼠出生后(P0)及第28 d(P28)用4%多聚甲醛活体灌注固定,振荡切片机切片,免疫荧光组织化学染色,激光共聚焦显微镜观察拍照。结果:在出生后P28小鼠被转染一侧的大脑皮质内有大量被GFP标记的细胞,呈现典型的神经元形态特征,从胞体发出大量树突,树突表面有大量大小不等、形态不一的小棘,被标记神经元的轴突通过胼胝体投射到对侧海马和大脑皮质。结论:子宫内电击转染技术能成功转染大脑皮质神经元,由CAG启动的GFP表达载体能够在被转染的神经元中长时程高效表达GFP,并标记被转染神经元的所有细胞结构包括树突、轴突及树突棘,该技术可用于研究各种不同基因在小棘发育及神经纤维归巢中的作用。; 段明慧卢习张伟李玲玲陈树林赵善廷; 关键词：树突棘绿色荧光蛋白

山羊黄体细胞的分离培养和鉴定方法的研究: 为了建立了山羊黄体细胞的培养模型,寻找黄体细胞的鉴定方法,通过RT-PCR检测黄体细胞、卵巢颗粒细胞和卵巢间质细胞孕酮合成酶3β-HSD和17β雌二醇合成酶17β-HSD7的mRNA表达,并结合细胞免疫组化对比检测黄体细...; 卢习; 关键词：黄体细胞催产素突触素山羊端粒酶; 文献传递

亚硝酸盐中毒抑制小鼠成体神经发生被引量：4: 2014年; 雄性成年昆明小鼠分为亚硝酸盐染毒组和生理盐水对照组,通过灌胃进行亚硝酸盐染毒,用BrdU腹腔注射和免疫组织化学方法研究齿状回神经干细胞的增殖和新生细胞的存活状况,用多重免疫荧光标记研究神经干细胞的分化和迁移方向。结果显示,染毒组小鼠齿状回颗粒层中的BrdU阳性细胞数量、存活率均极显著低于对照组(P<0.01),表明亚硝酸盐中毒对小鼠新生神经干细胞的增殖和存活产生了影响。染毒组BrdU/NeuN双阳性细胞的数量极显著低于对照组(P<0.01)。与对照组相比,染毒组中神经干细胞的迁移方向无显著性差异(P>0.05)。结果表明,亚硝酸盐中毒能显著抑制小鼠神经干细胞增殖,降低新生细胞的存活率。; 王久涛张伟安磊卢习宋玲珍张亚妹颜润川胡新德陈树林赵善廷; 关键词：亚硝酸盐中毒齿状回免疫组织化学

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卢习