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刘秀娟
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
供职机构:
中国医科大学附属第一医院
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发文基金:
国家教育部博士点基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
梁英健
中国医科大学附属第一医院
马晓春
中国医科大学附属第一医院
穆恩
中国医科大学附属第一医院
章志丹
中国医科大学附属第一医院
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2013
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高糖培养脂多糖刺激下肺脏微血管内皮细胞通透性改变及DDAH/NOS/NO失平衡在其发生机制中的作用
被引量:4
2013年
目的探讨高糖对脂多糖(LPS)刺激下血管内皮细胞损伤的影响及其机制。方法将人肺脏微血管内皮细胞(PMVEC)分为正常糖组(NG组)、正常糖+LPS刺激组(NGL组)、高糖组(HG组)、高糖+LPS刺激组(HGL组),分别给予含10%小牛血清的正常糖(5.5mmol/L)或高糖(33mmol/L)培养5d,加入10mg/LLPS刺激细胞24h。采用免疫荧光染色观察细胞纤维肌动蛋白(F-actin)的分布及变化;扫描电镜观察细胞膜窗孔数量及孔径变化;细胞迁移实验(Transwell)测定单层内皮细胞的辣根过氧化物酶(HRP)通透性;硝酸盐还原法(Griess法)检测细胞培养上清液中一氧化氮(NO)含量;蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)测定细胞二甲基精氨酸-二甲胺水解酶2(DDAH2)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的蛋白表达。结果与NGL组比较,HGL组PMVEC的F-actin分布排列紊乱,细胞膜窗孔异常增大、增多,细胞单层对HRP通透率增加[(53.62±6.70)%比(23.63±3.92)%,P〈0.01],细胞DDAH2表达(积分A值)减少(0.33±0.08比0.77±0.14,P〈0.01),iNOS表达(积分A值)增加(1.40±0.29比1.04±0.09,P〈0.01),eNOS表达(积分A值)减少(0.67±0.09比0.91±0.17,P〈0.05),上清液NO含量(μmol/L)增多(20.36±2.25比7.99±0.33,P〈0.01)。结论高糖加重LPS刺激下体外培养PMVEC的F—actin分布紊乱、单层细胞通透性增加;NO调节紊乱可能参与了PMVEC损害的发生。
刘秀娟
穆恩
梁英健
章志丹
马晓春
关键词:
高糖
内皮细胞通透性
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