刘畅
- 作品数：18 被引量：133H指数：5
- 供职机构：南开大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划天津市科技计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 一例女性假肥大型肌营养不良患者的基因突变分析
- 目的 通过对一例女性假肥大型肌营养不良患者进行dystrophin基因突变分析,探讨其发病机制。方法 用MLPA法检测dystrophin基因是否有外显子缺失或重复,分析dystrophin mRNA明确该患者dystr...
- 邓慧婷刘畅张竹君
- 关键词：假肥大型肌营养不良女性染色体易位X染色体失活
- 文献传递
- 一种基于BICMOS工艺的低温度系数带隙基准电压源被引量：1
- 2016年
- 提出了一种高精度带隙基准电压源,电路采用了与温度成正比的电压补偿二极管压降的负温度特性,得到了与温度无关的基准电压源,并且利用双二极管串联模式提高了带隙结构的精度,并给出了计算和分析.电路采用0.5μm BICMOS工艺实现,仿真的结果表明,在3.3 V电压下,电路的功耗为25μW,在温度-40-125℃范围内,输出的电压为1.239 V,温度系数为10 ppm/℃.
- 郭振义林长龙刘畅孙帅梁科王锦李国峰
- 关键词：电压基准BICMOS低温度系数
- 不同转导方式及载体形式对TALENs在小鼠胚胎干细胞打靶效率的研究
- 2014年
- 通过同源重组进行小鼠胚胎干细胞基因敲除是目前应用最为广泛的基因敲除技术手段,但同源重组的效率却非常低.TALEs和FokI的剪切结构域融合的TALENs可以实现高效的基因敲除.已有报导表明,TALENs识别位点的DNA序列和长度,及间隔区的长短等条件影响TALENs打靶效率.但外源载体的导入方式及载体的形式(DNA或RNA)是否以及如何影响TALENs的打靶效率还不明确.用不同的转导方式将TALENs导入小鼠胚胎干细胞中,并检测TALENs切割识别位点的效率,实验发现Lipofectamine○R2000转染的TALENs比电转化能更高效地切割目的 DNA位点,而DNA质粒或体外转录的RNA表达的TALENs切割DNA位点的效率相近.数据表明,在应用TALENs进行基因敲除时,有必要选择合适的转导方式以提高突变效率.
- 牟春琳刘畅陈凌懿
- 关键词：胚胎干细胞细胞转染电转化
- 5’非翻译区条形码揭示2019新型冠状病毒毒力
- 2020年
- 2019年12月,中国武汉报道了2019新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)引起的肺炎。在前期研究中,我们在国际上首次报道了有关2019-nCoV的两个重要发现:①Beta冠状病毒B亚群存在大量的可变翻译;②2019-nCoV的S蛋白可能存在Furin蛋白酶切位点。本研究在国际上首次报道了2019-nCoV的5’非翻译区分析的结果:Beta冠状病毒可以根据其5’非翻译区条形码分为不同毒力的四个类;这四类对应Beta冠状病毒的四个亚群;已知的2019-nCoV与SARS冠状病毒的5’非翻译区条形码完全一样。作为本研究的最大贡献,我们在国际上首次提出5’非翻译区条形码可应用于病毒的检测、鉴定、分类以及进化研究。这种方法对于冠状病毒的预警和防控至关重要。本研究的最重要发现是内部核糖体进入位点很可能是影响冠状病毒毒力的重要因素。这个发现从分子水平揭示了2019-nCoV的毒力,并且为药物、抗体和疫苗的开发等应用提供直接指导。同时,我们提出一个基础理论方面的假说,起始密码子上游临近的茎环结构在真核生物的蛋白质翻译中起到重要作用。
- 段广有施劲松宣益波陈嘉源刘畅刘畅阮吉寿高山
- 关键词：冠状病毒毒力内部核糖体进入位点
- 类泛素修饰蛋白bISG15抗血清在体外修饰系统中的应用(英文)被引量：2
- 2008年
- ISG15由干扰素刺激基因15编码,是最早被发现的类泛素修饰分子.病毒感染以及干扰素刺激可以强烈诱导其表达.与泛素类似,ISG15可以共价连接到其他蛋白分子上进行修饰,但ISG15及其连接修饰的功能作用还有很多尚未知.最近的研究表明,ISG15及其修饰作用在先天免疫中起着重要的作用.将牛类ISG15基因克隆进入pET28a( +)原核表达载体,并且表达了可溶的融合有His-tag标签的bISG15融合蛋白.使用Ni-NTA葡聚糖进行纯化浓缩.纯化蛋白免疫Balb/c小鼠并获得抗血清.Western印迹实验显示,抗血清可以特异地识别在真核细胞中表达的bISG15 .浓缩的bISG15以及制备的抗血清用于建立bISG15的体外修饰系统.实验证明,使用该系统bISG15可以连接到细胞蛋白上进行修饰.
- 刘畅史颖姣宣成昊耿运琪乔文涛
- 建立79对引物多重PCR新体系检测DMD基因缺失
- 目的 建立79对引物多重PCR新体系,一次性完成DMD基因全部79个外显子缺失的检测,提高多重PCR对DMD基因缺失突变的检出率.方法 将DMD基因外显子分为八组,共设计79对引物一次性扩增DMD基因的全部外显子,再经3...
- 张竹君刘畅邓慧婷
- 牛免疫缺陷病毒基质蛋白和衣壳蛋白的可溶性表达
- 2005年
- 基质蛋白和衣壳蛋白是BIV的主要结构蛋白,在病毒感染及整个复制周期中起重要作用。本文采用 pTXB系统在大肠杆菌中表达出融合状态的牛免疫缺陷病毒 BIV基质蛋白 MA及衣壳蛋白 CA,经几丁质亲合、自剪切纯化后,获得不含融合片段的纯化产物。每克湿菌体MA产量可达毫克级,CA表达量达十毫克级。用原核表达获得的高纯度CA蛋白免疫大白兔获得的抗血清,经Western Blot 分析显示能够与病毒颗粒的 CA蛋白发生特异反应,证实表达产物具有良好的免疫原性和反应原性,可用于制备相应抗体,为研究 BIV相应基因表达变化,进行体外蛋白质相互作用试验提供工具。
- 朱义鑫张晓光杨怡姝刘畅乔文涛陈启民耿运琪
- 关键词：牛免疫缺陷病毒基质蛋白衣壳蛋白
- 类泛素蛋白ISG 15及其在先天免疫中的作用被引量：10
- 2006年
- 病毒感染和干扰素刺激高等动物细胞,均可以强烈地诱导表达干扰素刺激基因15编码的蛋白ISG15,它是最早发现的类泛素修饰蛋白.虽然针对泛素及其修饰功能已进行了广泛而深入地研究,但对于ISG15共价修饰以及它的生物学功能了解甚少,有待进一步探讨.该领域的研究近几年有所突破,发现了有关ISG15修饰的酶系统,ISG15及其修饰系统在先天免疫以及干扰素信号调节中的重要作用.简要介绍ISG15的发现历史、生化性质、基因调控特点以及ISG15修饰系统中所涉及的酶,总结目前研究ISG15及其修饰与调节先天性免疫相关过程的一些最新进展.
- 刘畅乔文涛王琛耿运琪
- 关键词：ISG15先天免疫
- 国际传播实践与战略传播思维被引量：3
- 2022年
- 习近平总书记在“5·31”重要讲话中指出,构建具有鲜明中国特色的战略传播体系。战略传播是指政府或组织为实现特定战略目标,动员协调各种资源,向特定目标受众传递信息、施加影响的过程,包括调查研究、战略策划、策略实施和效果评估四个环环相扣的环节。尽管战略传播概念提出时间相对较晚,但是,战略传播观念实际在二战后已广泛应用于国际传播实践,成效显著。当下我国国际传播实践面临更为复杂的局面,更应秉承战略传播思维,提升专业化程度,加强前期调研和主动策划,加强过程评估和效果评估。
- 张迪张迪刘畅
- 关键词：战略策划
- 基于“以学为中心”的医学微生物学课程教学改革与实践被引量：5
- 2022年
- “医学微生物学”是临床医学专业的核心课程,理论性和实践性较强。面向国家对医学人才培养目标的变化、如何在教学过程中以学为中心,以及注重学生能力素质的培养是本课程教学改革的重要环节。我们依据学情分析结果,通过翻转课堂、挖掘课程思政元素、基于问题的学习(problem-based learning,PBL)讨论课、虚拟仿真实验及临床见习课、开放性实验等教学手段综合运用进行课程的教学改革。实践证明,该教学改革体系使课程教学与医学人才培养挂钩,能够充分调动学生积极性、提高创新能力及服务意识,实现了师生共赢,圆满完成教学目标。
- 王艳凤赵国星刘畅刘艳华刘寅
- 关键词：医学微生物学以学为中心
