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犬细小病毒Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用被引量：7: 2010年; 根据GenBank中CPV VP2蛋白基因序列,选择CPV VP2基因保守序列,分别设计1对特异性引物和TaqMan探针,建立了CPV Taq Man荧光定量PCR检测方法。对CPV Taq Man荧光定量PCR的反应体系和反应条件进行优化,并对其特异性和敏感性进行了测定,建立标准曲线。结果,CPV Taq Man荧光定量PCR对CPV检测阳性,并能对10拷贝/μL的CPV模板检测阳性,标准曲线的相关系数为0.9992,但对非CPV模板检测阴性。结果表明,所建立的CPV Taq Man荧光定量PCR具有很好的特异性和敏感性,标准曲线具有很强的实用性。同时对CPV Taq Man荧光定量PCR与CPV PCR进行了比较试验,结果前者比后者的敏感性高100倍。采用CPVHA、CPV PCR与CPV Taq Man荧光定量PCR对55份临床样品进行检测,CPV HA对30份样品检测阳性,CPVPCR对40份样品检测阳性,CPV Taq Man荧光定量PCR对47份样品检测阳性。这表明,CPV Taq Man荧光定量PCR对样品的检出率最高,具有特异、敏感、快速的特点,适用临床样品的检测。; 刘海防胡传伟谢之景姜世金张兴晓倪长鹏贾赟杨笃宝; 关键词：犬细小病毒实时定量PCR TAQ

一例杜泊绵羊脱肛的治疗引起的思考: 2007年; 脱肛亦称直肠脱．是直肠末端的黏膜层脱出肛门或直肠的一部分，甚至大部分脱出，而不能自主缩回的疾病。该病在生产实践过程中经常发生，如果不给予高度重视将给畜牧生产带来重大经济损失。就本人在生产过程中遇到一典型病例报告如下。; 刘海防吕品孟宪峰; 关键词：杜泊绵羊脱肛畜牧生产直肠脱经济损失病例报告

猪瘟与附红细胞体病混合感染的诊治: 2007年; 1发病情况山东省泰安市宁阳某养猪场，饲养160余头育肥猪，2006年12月7日发现一圈猪舍中两头猪精神沉郁，食欲不振，高热，次日相继另有三头出现类似症状。随后请当地兽医治疗，用解热、抗病毒等药物治疗效果欠佳，投药后病情好转，停药又复发，病程持续数天至半月不等。80％发病猪只转归死亡，随后到我校动物医院就诊。; 刘海防吕品张辉; 关键词：附红细胞体病猪瘟诊治发病情况食欲不振

蓝狐细小病毒的分离鉴定及其VP1基因序列分析: 2009年; 从泰安地区送检的疑是细小病毒感染的蓝狐粪便中分离到一株病毒。经理化特性鉴定、血凝谱鉴定、人工感染蓝狐等鉴定,表明所分离病毒为细小病毒。并且根据GenBank上发表的犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)、猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)核酸序列,设计扩增VP1基因的引物,采用PCR技术扩增所分离细小病毒的VP1全基因,将PCR产物克隆入pMD18-T载体,进行测序分析。结果,所分离细小病毒的VP1基因全长2256bp,编码727个氨基酸,与CPV和FPV参照株的VP1基因同源性在98.7%～99.5%。VP1基因的系统发生分析表明所分离病毒与FPV的亲源关系最为密切。所分离病毒VP1蛋白375位氨基酸残基与CPV的VP1蛋白氨基酸残基一致,但其223位、236位、246位、466位、707位、711位氨基酸残基与FPVVP1蛋白的氨基酸残基一致,该病毒VP1蛋白序列表现出了过渡型序列特征,介于FPV与CPV间的过渡类型,这说明所分离病毒为蓝狐细小病毒(Blue fox parvovirus,BFPV),命名为BFPV-TA,蓝狐可能在CPV的起源过程起到重要的作用。; 刘海防胡传伟谢之景倪长鹏贾赟姜世金张兴晓杨笃宝; 关键词：VP1基因

猪传染性胃肠炎分子生物学诊断方法研究进展被引量：3: 2008年; 检测TGEV的方法主要有病毒的分离鉴定、免疫荧光抗体试验、病毒中和试验、电镜观察、免疫电镜观察、ELISA方法、核酸探针杂交技术、限制性酶切片段长度多态性(RFLP)分析,RT-PCR和荧光定量PCR等,伴随着对TGEV基因组分子生物学的深入研究,一系列分子生物学诊断技术不断出现,现对猪传染性胃肠炎病毒的分子生物学诊断方法的研究进展作以综述。; 徐丽秋贾赟刘海防高玉峰赵玉军; 关键词：猪传染性胃肠炎病毒分子生物学

猪巴氏杆菌病的诊治与体会被引量：5: 2006年; 巩庆亮刘海防吕品王洪; 关键词：猪巴氏杆菌病多杀性巴氏德氏菌巴氏杆菌属猪肺疫猪繁殖呼吸综合征仔猪副伤寒

蓝狐细小病毒泰安株分子生物学特征研究及其TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立: 本研究从泰安地区某蓝狐养殖场送检的疑是感染细小病毒的蓝狐病料中分离到一株细小病毒。经常规病毒学方法及分子病毒学方法鉴定,所分离到的细小病毒为蓝狐细小病毒/(Blue fox parvovirus,BFPV/),命名为BF...; 刘海防; 关键词：VP1基因 VP2基因 NS1基因实时定量PCR; 文献传递

狐源犬瘟热病毒泰安株(CDV-FOX-TA)的分离与鉴定被引量：3: 2008年; 从具有疑似犬瘟热症状的病狐血液中分离到1株病毒,该病毒在MDCK细胞上生长良好,并能形成稳定的CPE。经电镜观察、理化特性、滴度测定、动物回归试验、RT-PCR和荧光定量RT-PCR鉴定,证实分离到的病毒为1株犬瘟热病毒强毒株,命名为CDV-FOX-TA。; 杨笃宝吕品胡传伟贾赟谢之景曹涤非任月刘海防; 关键词：狐狸犬瘟热病毒

一例杜泊绵羊脱肛的治疗引起的思考: 2007年; 脱肛亦称直肠脱，是直肠末端的黏膜层脱出肛门或直肠的一部分，甚至大部分脱出．而不能自主缩回的疾病。该病在生产过程中经常发生，如果不给予高度重视将给畜牧生产带来重大经济损失。就本人在生产过程中遇到一典型病例报告如下。; 刘海防吕品孟宪峰; 关键词：杜泊绵羊脱肛直肠脱经济损失畜牧生产病例报告

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刘海防