刘强 作品数:16 被引量:52 H指数:3 供职机构: 江苏大学附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省“333工程”培养资金资助项目 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
儿童维生素D浓度回顾性分析 2023年 目的回顾性分析在江苏大学附属医院就诊的1261例0~14岁儿童的维生素D(Vitamin D,VD)浓度,为儿童VD制剂的补充提供依据。方法选取2018年1月—2021年10月于江苏大学附属医院首次就诊并检测25-羟基VD[25-(OH)D]的1261例儿童作为研究对象,采集患儿的末梢血,用竞争法定量检测并比较其25-(OH)D浓度。结果研究对象的VD平均质量浓度为(29.61±12.24)ng/mL,最低值为10.94 ng/mL,最高值为110.6 ng/mL;缺乏率为0.16%(2例),不足率为8.72%(110例),正常率为90.96%(1147例),过量率为0.16%(2例)。分组的各个年龄段间VD浓度比较差异有统计学意义(P<0.05);不同性别间VD的浓度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。各季节间VD浓度比较差异有统计学意义(P<0.05);在各年龄组中,7~14岁组各季节间VD浓度比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论研究中的0~14岁儿童VD缺乏现象少见,但存在一定程度的VD不足,并随年龄增长呈上升趋势;7~14岁组不足现象较为严重,建议加强4岁以上儿童VD浓度的检测,以便及时有效地进行VD制剂的补充。 张龙锋 刘强关键词:维生素D 儿童 回顾性分析 骨形态发生蛋白在类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中表达 被引量:1 2020年 目的构建人外周血单个核细胞中骨形态发生蛋白(BMPs)(BMP2,BMP4,BMP6,BMP7,BMP9)mRNA的定量PCR检测方法;利用荧光定量PCR检测研究BMPs mRNA在类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中的表达情况。方法利用primer3在线软件设计BMP2,BMP4,BMP6,BMP7,BMP9的定量PCR检测引物并比对其扩增产物信息;收集类风湿性关节炎患者60例(RA组)和健康对照组30例(NC组)的外周血,利用人单个核细胞分离液分离单个核细胞并提取总RNA,然后逆转录成cDNA;最后利用定量PCR检测各标本中BMPs表达水平,采用2-△△Ct法计算各指标相对表达水平。结果(1)成功设计出BMP2,BMP4,BMP6,BMP7,BMP9的定量PCR引物,其扩增产物长度为168 bp^203 bp,扩增曲线提示目的基因与内参基因β-actin扩增效率一致(扩增曲线斜率差<0.1)。(2)RA组与NC组相比BMP2表达相对上调1.21(0.8)倍(t=0.22,P=0.005)、BMP6表达相对下调0.95(0.26)倍(t=0.176,P=0.043),差异有统计学意义。RA组与NC组相比BMP4表达下调0.41(0.33)倍(t=0.098,P=0.583)、BMP7表达相对下调0.49(0.58)倍(t=0.125,P=0.285)、BMP9表达相对下调0.39±0.21倍(t=0.084,P=0.76),差异均无统计学意义。(3)RA组按照DAS28评分分为RA1组(n=12,DAS28评分<2.6,病情缓解),RA2组(n=14,DAS28评分≥2.6且<3.2,低度活动),RA3组(n=16,DAS28评分≥3.2且<5.1,中度活动),RA4组(n=18,DAS28评分≥5.1,高度活动)。BMP2表达水平随着DAS28评分增高表达逐渐升高,BMP4,BMP6,BMP7,BMP9表达水平随着DAS28评分增高逐渐降低,RA各组BMPs表达差异有统计学意义(P=0.000)。(4)BMP2与DAS28评分呈显著正相关(r=0.886,P=0.000);BMP6与DAS28评分呈显著负相关(r=-0.825,P=0.000),差异均有统计学意义。结论RA组外周血单个核细胞中BMP2 mRNA表达明显上调,BMP6 mRNA表达明显下调,BMP4 mRNA、BMP7 mRNA、BMP9 mRNA表达差异无统计学意义,BMP2与DAS28评分呈显著正相关,但BMP6与DAS28评分呈显著负相关,提示BMPs作为RA患者的分子标志物具有潜在的� 刘强 顾金金 张龙锋关键词:骨形态发生蛋白 荧光定量PCR 类风湿性关节炎 miRNA-30a/30e腺病毒表达载体的构建 2013年 目的构建稳定表达成熟miRNA-30a和miRNA-30e腺病毒表达载体。方法小鼠基因组中分别扩增出带有酶切位点的mmu-miR-30a、mmu-miR-30e目的基因,目的基因连接到穿梭质粒pSES-HUS,带有目的基因的穿梭质粒重组到骨架质粒AdEasy1上,重组质粒转染到Hek-293细胞中包装成腺病毒载体,反复扩增之后获得高滴度的pAd-mmu-miR-30a、pAd-mmu-miR-30e腺病毒。用目的腺病毒分3组(RFP对照组,miR-30a组,miR-30e组)感染小鼠Mefs细胞,用荧光定量PCR方法检测mmu-miR-30a、mmu-miR-30e表达情况。结果分别扩增出带有酶切位点的357 bp mmu-miR-30a,324 bp mmu-miR-30e,并成功连接到pSES-HUS上,进一步与AdEasy1重组,包装得到腺病毒表达载体,通过荧光定量PCR检测,Mefs细胞中mmu-miR-30a升高26.46±7.46倍,mmu-miR-30e升高2.76±0.25倍。结论成功构建了成熟miRNA的腺病毒表达载体。 刘强 顾金金 罗敏 施琼关键词:荧光定量PCR 慢性阻塞性肺疾病合并衰弱的诊治进展 2022年 COPD是一种以不完全可逆的气流受限为特点的呼吸系统疾病,好发于老年人,已成为全球第三大死亡原因。衰弱是指老年人生理储备下降导致机体易损性增加、抗应激能力减退的非特异性状态,可导致残疾、生活依赖、跌倒甚至死亡等不良临床结局的老年综合征[1]。研究表明,COPD病人衰弱和衰弱前期发生率高,其可能与年龄增加、吸烟、营养不良、向心性肥胖、共病数量多、多重用药、精神心理因素、社会支持欠佳等因素有关[2⁃4]。Marengoni等[5]纳入了27个国外研究的Meta分析显示:COPD病人的衰弱和衰弱前期发生率分别为20%和56%,且与同龄非COPD老人相比,老年COPD病人衰弱风险大约增加2倍。由于COPD合并衰弱病人的死亡率更高[4],急性加重或再住院次数更频繁,生活质量更低[6],因此,如何在老年COPD病人中早期筛查衰弱并有效干预成为当前老年医学研究的重要课题。本文拟对COPD伴衰弱的早期筛查和干预进展进行综述,以进一步加深对老年COPD病人衰弱的管理。 顾金金 林英 刘强关键词:精神心理因素 早期筛查 向心性肥胖 老年医学 多重用药 西格玛性能验证图在血液脂类项目性能评价中的应用 被引量:2 2018年 目的用西格玛性能验证图评价江苏大学附属医院医学检验科实验室血液脂类项目的检测性能并指导改进方向。方法采用江苏大学附属医院医学检验科实验室2016年室内质量控制数据计算变异系数;采用江苏大学附属医院医学检验科实验室2016年全国血液脂类室间质评结果计算偏倚;采用卫生和计划生育委员会室间质评中的允许总误差和卫生行业标准(WS/T 403-2012)中的允许总误差;通过6西格玛管理软件计算血液脂类项目西格玛值并绘制性能验证图,最后计算质量目标指数以指导检测项目改进方向。结果血液脂类项目中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)(σ=9.85)和脂蛋白a(LPa)(σ=6.45)2个项目性能达到世界一流水平;载脂蛋白B(APOB)(σ=5.70)的性能优秀;三酰甘油(TG)(σ=4.01)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)(σ=4.09)和载脂蛋白A1(APOA1)(σ=4.72)3个项目性能良好;总胆固醇(CHOL)(σ=3.30)性能处于临界;LDL-C和LPa无需改进精密度和准确度,可使用13s(N=2,R=1)质控规则满足性能要求;APOA1、APOB、TG、HDL-C需要优先改进准确度,CHOL性能处于临界需要优先改进精密度,同时选择13s22sR4S41s8x(N=4,R=2或N=2,R=4)方可进一步提升性能。结论西格玛性能验证图可以帮助实验室分析各检测项目性能水平,提供参考的质控规则以及优先改进方向。 刘强 顾金金 阴晴 张龙锋关键词:偏倚 允许总误差 西格玛 4~7岁入学前儿童乙型肝炎病毒表面抗体的水平分析 被引量:2 2021年 目的:分析江苏大学附属医院4~7岁入学前儿童的乙型肝炎病毒表面抗体的浓度水平,为乙肝疫苗的加强接种提供参考依据。方法:回顾性分析2018年1月—2019年12月在医院就诊的412例4~7岁的患儿的乙肝两对半结果。观察入学前儿童乙肝感染率(HBsAg阳性率);依照乙肝表面抗体浓度水平对其进行分组,进行比较分析。结果:412例入学前儿童患者中有2例,阳性率0.49%(2/412);同时期检测的成人患者(18岁以上)HBsAg阳性6087例,阳性率6.42%(6087/94760),入学前儿童的乙肝感染率明显低于成年人(P<0.0001);410例HBsAg阴性患者中,HBsAb阴性(<10mIU/mL)占54.88%(225/410);HBsAb低水平(10~100mIU/mL)占34.15%(140/410);HBsAb中等水平(100~1000mIU/mL)占10.49%(43/410);HBsAb高水平(>1000mIU/mL)占0.49%(2/410)。结论:入学前儿童的乙肝感染率较低,出生时接种乙肝疫苗所产生的抗体水平较低。为更好地预防乙肝,建议对入学前儿童进行乙肝二对半检测,对乙肝表面抗体阴性以及低水平者进行疫苗的加强接种。 张龙锋 刘强 黄文华关键词:乙肝表面抗原 乙肝表面抗体 乙肝疫苗接种 阿托伐他汀对稳定期COPD患者肺功能、肺动脉压及相关指标影响的Meta分析 被引量:13 2017年 目的:系统评价阿托伐他汀对稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能、肺动脉压及相关指标的影响,为临床提供循证参考。方法:计算机检索Cochrane图书馆、PubMed、EMBase、中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库,收集阿托伐他汀联合常规基础方案(试验组)对比单纯常规基础方案(对照组)治疗稳定期COPD的随机对照试验(RCT),提取资料并按照Cochrane系统评价员手册5.1.0评价质量后,采用Rev Man 5.3统计软件进行Meta分析。结果:共纳入7项RCT,合计371例患者。Meta分析结果显示,试验组患者第1秒用力呼气容积[MD=0.07,95%CI(0.04,0.09),P<0.001]、第1秒用力呼气容积占预计值百分比[MD=6.18,95%CI(2.23,10.12),P=0.002]、6分钟步行距离[MD=55.31,95%CI(36.44,74.18),P<0.001]均显著高于/长于对照组,肺动脉收缩压[MD=-6.78,95%CI(-11.62,-1.94),P=0.006]、平均肺动脉压[MD=-6.61,95%CI(-7.26,-5.96),P<0.001]、圣乔治呼吸问卷评分[MD=-13.21,95%CI(-23.90,-2.52),P=0.02]均显著低于对照组,差异均有统计学意义;两组患者第1秒用力呼气容积占用力肺活量比值[MD=3.73,95%CI(-2.08,9.55),P=0.21]和高敏C反应蛋白水平[MD=0.29,95%CI(-1.37,1.95),P=0.73]比较,差异均无统计学意义。结论:阿托伐他汀用于稳定期COPD患者可以显著改善患者肺功能和肺动脉压,提高患者生活质量。 顾金金 刘强 毛善奎关键词:阿托伐他汀 稳定期 肺功能 肺动脉压 META分析 小鼠骨髓及脾脏髓源抑制细胞Notch分子表达分析 被引量:1 2014年 为研究Notch信号途径相关分子在小鼠髓源抑制细胞(MDSC)中表达水平,以CD11b+和Gr-1+为表面标记,采用流式细胞术分选出小鼠骨髓与脾脏MDSC,进而采用定量RT-PCR技术检测Notch 4种受体、5种配体及其下游靶基因Hes-1的mRNA表达水平。结果发现,骨髓中CD11b+Gr-1+细胞(MDSC)比例远高于脾脏,达总细胞的46%,而脾脏MDSC仅占总细胞的4.4%左右。骨髓与脾脏MDSC表达Notch四种受体分子,四种受体分子在两种MDSC中表达水平未见明显差异(P>0.05)。骨髓MDSC Dll4表达水平明显高于脾脏MDSC(P<0.001),而Jagged1、Jagged2和Dll1三种配体分子在来源于两种淋巴器官的MDSC中表达水平未见明显差异(P>0.05),二者均不表达Dll3。与骨髓MDSC相比,脾脏MDSC Hes-1mRNA表达明显增高(P<0.01)。结果提示Notch信号途径可能在MDSC成熟与迁移中发挥一定的作用。 刘美红 段唐海 王文红 张莹莹 王瑞 刘强 熊御云 焦志军关键词:NOTCH配体 NOTCH信号 无需抽提RNA直接定量血浆microRNAs的实时荧光定量PCR方法的建立与评价 被引量:1 2014年 目的建立无需抽提RNA直接以血浆中的microRNAs(miRNAs)作为模板进行实时荧光定量PCR检测的新方法。方法方法学建立。采集健康人EDTA—K,抗凝静脉血并分离血浆,取7.5μl血浆用等量含2.5%(体积比)Tween20的缓冲液处理后进行逆转录及PCR,建立血浆miRNAs直接检测法。用该方法检测健康人血浆标本中U6snRNA、miR-24—1—5p和miR--4634表达水平,评估其扩增的特异性和扩增效率。同时与传统的抽提RNA定量PCR检测法的阈值循环数(cq)值进行比较并作相关性分析。另外,应用建立的血浆直接检测法,比较了混合引物和单个引物逆转录法检测健康人血浆标本中U6snRNA、miR-24—1—5p和miR-4634结果的一致性。结果血浆直接检测法融解曲线显示健康人血浆标本中U6、miR-24—1—5p和miR-4634扩增产物分别在8l、83、84.2℃时出现单一峰,无引物二聚体峰和其他非特异峰出现。血浆直接检测法检测miR.24—1—5p扩增效率为1.1,同一份样本中U6、miR-24—1—5p和miR-4634这3种基因的扩增曲线平行,说明扩增斜率一致。直接检测法检测miR-4634的cq值为30.98±0.17,高于RNA抽提法的29.22±0.21,差异有统计学意义(t=8.475,P〈0.01),而2种方法检测u6(直接检测法32.43±0.08,RNA抽提法32.57±0.06;t=1.354,P〉0.05)、miR-24—1-5p(直接检测法20.73±0.14,RNA抽提法21.064-0.21;t=1.749,P〉0.05)结果差异均无统计学意义。2种方法检测U6(r=0.8605,P〈0.01)、miR.24—1—5p(r=0.7289,P〈0.05)和miR-4634(r=0.7485,P〈0.01)结果具有较好的相关性。混合引物和单个引物逆转录后PCR的cq值之间无明显差异。结论建立的血浆直接检测法只需对血浆标本进行简单的预处理,并可使用混合引物进行逆转录定量PCR,具有操作简便、检测成本低等优点,值得进一步推广应用。(中华 张莹莹 焦志军 段唐海 刘美红 王文红 陈艳 刘强 熊御云关键词:微RNAS 实时聚合酶链反应 血浆 短发夹RNA下调Notch2表达对食管鳞癌Eca109细胞增殖的影响 被引量:2 2014年 目的 :探讨通过转染短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)下调Notch2表达的方法阻滞Notch2信号通路对食管鳞癌Eca109细胞增殖的影响。方法 :首先应用实时荧光定量-PCR法检测包括食管鳞癌Eca109细胞在内的多种肿瘤细胞中Notch受体的表达水平。然后将无效shRNA(Control-shRNA)和针对Notch2基因的shRNA(Notch2-shRNA)分别转染高表达Notch2的Eca109细胞。实时荧光定量-PCR法检测转染后Notch2及其下游靶基因Hes1的mRNA表达,蛋白质印迹法检测转染后Notch2蛋白的表达,CCK-8(cell counting kit-8)法检测Eca109细胞增殖情况,FCM法检测细胞周期变化。结果:食管鳞癌Eca109细胞中Notch2 mRNA高表达。与Control-shRNA转染组相比,Notch2-shRNA转染后Eca109细胞中Notch2 mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.01),下游靶基因Hes1的mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。Notch2-shRNA转染72 h后,Eca109细胞增殖率明显降低(P<0.05);G0/G1期细胞所占百分率为(70.66±6.25)%,明显高于Control-shRNA组的(45.34±1.88)%和未转染对照组的(47.10±1.70)%(P<0.01)。结论 :Notch2在体外培养的食管鳞癌Eca109细胞中高表达,下调Notch2表达可以通过诱导G0/G1期细胞阻滞而减缓Eca109细胞的体外增殖。 王旭辉 花盛浩 邓敏 肖力红 周星 周荣 胡娟 曹志勤 刘强 焦志军关键词:食管肿瘤 NOTCH2 细胞增殖