刘君
- 作品数:21 被引量:94H指数:7
- 供职机构:北京林业大学更多>>
- 发文基金:国家转基因植物研究与产业化专项国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域:农业科学生物学电子电信更多>>
- 结缕草中DREB1A基因的克隆及植物表达载体的构建
- GenBank上已发布的转录因子DREB1A的cDNA序列设计并合成了一对引物,通过RT-PCR方法从我国野生结缕草中扩增出了DREB1A基因的全长cDNA片段,序列分析表明该基因全长为692bp,与拟南芥的DREB1A...
- 王月华韩烈保刘君何宇峰方文娟
- 关键词:结缕草DREB1A基因克隆表达植物表达载体
- 草地早熟禾愈伤组织诱导的多因子正交试验研究被引量:18
- 2005年
- 通过多因子的正交试验,筛选出草地早熟禾PoapratensisBaron品种的最适愈伤组织诱导培养基为MS+2,4D(1mg/L)+6BA(0.1mg/L)+CuSO4(3mg/L)+酸水解酪蛋白CH(1g/L),各因子影响程度为2,4D>CuSO4>CH>6BA。对于Midnight品种,最适愈伤组织诱导培养基为MS+2,4D(2mg/L)+6BA(0mg/L)+CuSO4(3mg/L)+CH(1g/L),各因素影响程度为2,4D>CH>CuSO4>6BA。通过用所得培养基进一步诱导比较,证明通过正交设计方法获得的结果为最佳诱导配方,用正交设计筛选愈伤组织诱导培养基是一种较好、可靠的方法。同时,在愈伤组织诱导试验中,建议使用胚性愈伤诱导率作为统计指标。
- 刘君信金娜韩烈保
- 关键词:草地早熟禾正交设计诱导愈伤
- 影响草地早熟禾(Poa pratensis L.)基因枪转化的关键因素研究被引量:7
- 2006年
- 将含有DREB1A基因的表达载体,通过基因枪法转化草地早熟禾的胚性愈伤组织,探讨了金粉沉淀剂、金粉直径等因素对转化的影响,同时通过不同浓度潮霉素(Hygromycin,简称Hy)对未转化愈伤组织的筛选,获得最佳筛选浓度。结果表明,适合于草地早熟禾基因枪轰击的条件为Ca(NO3)2+PEG4000包被质粒DNA;1μm金粉作为质粒DNA的载体;合适的轰击高度为6cm、轰击次数为1次、无渗透处理。采用Hy作为草地早熟禾转基因植株抗生素筛选标记时,Baron品种愈伤组织继代的临界筛选浓度为100mg/L。
- 韩烈保信金娜刘君曾会明
- 关键词:草地早熟禾DREB1A基因基因枪
- 多年生黑麦草转基因育种及其安全性的研究进展被引量:7
- 2008年
- 多年生黑麦草是适应性很强的牧草和草坪草种,转基因技术的应用已成为其育种研究的重要途径。为此,概述了多年生黑麦草组织培养和遗传转化方面的研究进展,首次探讨了转基因多年生黑麦草的生物安全性。
- 李雪韩烈保刘君
- 关键词:多年生黑麦草生物安全
- 一种高质量麦冬总RNA的提取方法被引量:2
- 2007年
- 本方法采用CTAB作为去污剂,分别用氯仿/异戊醇反复抽提、LiCl沉淀,以去除蛋白质、碳水化合物和次生代谢物等杂质,用DNase处理去除DNA污染,最后用无水乙醇沉淀获得总RNA。该方法不仅能获得完整性好、纯度高的总RNA,而且操作简单、成本低廉、RNA产率高,对富含次生物质的中草药材植物组织总RNA的提取具有借鉴意义。
- 刘君韩烈保李雪王月华
- 关键词:CTAB麦冬总RNA提取
- 乙烯对麦冬光合作用的影响及相关基因的克隆
- 乙烯(ethylene,ETH)在植物生长发育过程中具有重要的生理作用。本研究的目的是在分析乙烯(ETH)对麦冬(Ophiopogon japonicus)光合作用影响的基础上,利用SSH等分子生物学实验技术,从麦冬中克...
- 刘君
- 关键词:麦冬光合作用基因克隆乙烯
- 以基因枪法转化日本结缕草获得转基因植株被引量:20
- 2006年
- 将含有DREB1A和gus基因的双基因载体质粒包裹在金粉上,以基因枪轰击日本结缕草胚性愈伤组织,以gus基因的瞬时表达研究日本结缕草基因枪转化参数.结果表明,在1 100 psi压力下6 cm的轰击距离、每皿轰击2次的转化效果最好,而金粉和质粒用量对转化效率影响不显著;经过筛选和再生培养,检测到gus基因的稳定表达,并获得日本结缕草潮霉素抗性株系,PCR-Southern杂交证实外源DREB1A基因已整合到日本结缕草基因组中.
- 齐春辉韩烈保梁小红曾会明刘君
- 关键词:日本结缕草基因枪转化转基因植株DREB1AGUS基因
- 豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(CpTI)的克隆及其植物表达载体的构建被引量:3
- 2008年
- 用CTAB法提取豇豆叶片总DNA后,根据基因两端的保守序列设计引物,经PCR方法扩增得到CpTI基因,将其克隆到pMD-18T载体上,酶切并测序鉴定,将该基因登陆到GeneBank(NO.EU088405)并进行同源性鉴定,证明该基因为丝氨酸蛋白酶抑制剂基因家族中的一员。在此基础上,将CpTI基因用限制性内切酶BamHⅠ/SacⅠ切下后,克隆到pCUbi1303的UBI启动子和NOS终止子之间。经PCR和酶切鉴定,得到了该基因的真核表达载体pCUbiCpTI1303,为下一步的转基因做好了准备。
- 罗娟王秀敏韩烈保刘君曾会明吴云锋
- 关键词:克隆植物表达载体
- 基于TDC-GP2的激光测距系统设计
- 为解决激光测距系统普遍存在成本高、稳定性差等问题,设计了一个基于TDC-GP2计时单元,以飞行时间TIME-OF-FLIGHT(TOF)法中的脉冲激光测距法来实现激光测距的系统。应用低功耗Atmega128单片机和低成本...
- 李玉株肖江黄丽燕刘君
- 关键词:TDC-GP2激光测距飞行时间
- 文献传递
- 基于TDO-GP2的激光测距系统设计
- 为解决激光测距系统普遍存在成本高、稳定性差等问题,设计了一个基于TDC-GP2计时单元,以飞行时间TIME-OF-FLIGHT(TOF)法中的脉冲激光测距法来实现激光测距的系统。应用低功耗Atmega128单片机和低成本...
- 李玉株肖江黄丽燕刘君
- 关键词:激光测距飞行时间单片机稳定性