刘利军
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国科学院生物物理研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 金黄色葡萄球菌核酸酶基因的片段缺失与定点突变
- 1992年
- 金黄色葡萄球菌核酸酶R(SNase R)是金黄色葡萄球菌核酸酶(SNase A)的一种类似物,具有与SNaseA相同的酶活性,与SNase A唯一不同之处是在N端多出6个氨基酸残基。为了得到完整的SNase基因并使其在E.Coli中表达,我们利用单链U模板—单引物突变法,将为6个额外氨基酸残基编码的18个氨基酸残基删除,其突变率可达90％。进而,完整的SNase A基因被重组入表达载体pBV221。细菌表达产物的PAGE分析结果指出,SNase A在E.coli中得到高效表达。与此同时,我们利用两个不同的引物在单链U模板上同时介导两种不同类型的突变(片段缺失、碱基取代)其突变率可达83％以上,这为进行多种类型的高效突变提供一个有用的方法。本文也对影响突变率的某些实验因素进行了讨论。
- 刘利军静国忠蒋美岩刘志革邹强
- 关键词：葡萄球菌
- ST-Ⅱ信号肽基因的化学合成及克隆
- 1991年
- 外源基因在原核细胞中的分泌表达仍然是很活跃的研究领域。Fujimoto等系统地分析比较了大肠杆菌内毒素ST-Ⅰ、ST-Ⅱ、LT-A、LT-B信号肽在人表皮生长因子(hEGF)分泌表达中的作用指出,由ST-Ⅱ信号肽组成的表达载体在大肠杆菌中能精确加工并使hEGF这样小的多肽成功地分泌到细胞周质及培养基中。
- 静国忠张广法蒋美岩刘利军
- 关键词：化学合成克隆
- 金黄色葡萄球菌核酸酶去C-末端肽段在E.coli中的高效表达
- 1995年
- 报道了7个金黄色葡萄球菌核酸酶(SNase)C-末端缺失突变体在E. coli细胞中的高效表达,其表达量可占细胞总蛋白量的16.90％～57.7％,即使仅由52个残基组成的小肽段,也能在细胞中稳定积累,然而,SNase的C-末端缺失明显地影响到肽段的分泌表达水平乃至越膜分泌。实验指出,7个肽段都能同抗SNase多克隆抗体呈特异性免疫反应,较长的肽段仍保留着不同程度的SNase的催化活性。
- 静国忠刘利军刘志革邹强蒋美岩
- 关键词：葡萄球菌核酸酶蛋白质
- 黑蝉发声膜的超微结构及其声学功能
- 1992年
- 黑蝉Cryptotympana atrata Fabricius的发声膜依次由上表面、蜡层、横向几丁质纤维层(H-CFL)、纵-横向和纵向纤丝层(V-HFL和VFL)、真皮层、类脂质层、腊层和下表面组成,具有适合于发声功能的结构特性,而明显区别于其他昆虫的一般角质板。上表面为直径约0.28—0.4μm的纤维网状结构,具有保护功能;但其边缘为直径约2.7μm的拱形纤维束和高约4μm的两棘突起的组合结构,具有加固和弹性阻尼功能。下表面是由直径约8μm的纤维束骨架伸延和交织成直径约0.7—1.0μm的纤维网状结构,具有支撑和保护功能。H-CFL通常为28层,而肋间膜逐渐变薄,凹端约为6层,形成适合于长肋阻尼振动的刚-柔结构。长肋加厚段由H-CFL的片层伸延、加密和增厚而成的几丁质体,共腹端形成适合于阻尼振动的弧形“关节”状节构。每条长肋上方的短肋是由两侧间膜的H-CFL,V-HFL和VFL伸延和交织而成的加厚几丁质体,具有阻尼功能的质量块。
- 刘利军蒋锦昌
- 关键词：黑蝉超微结构
- 金黄色葡萄球菌核酸酶A基因在大肠杆菌中的高效表达被引量：2
- 1994年
- 这篇文章报道了金黄色葡萄球菌核酸酶A的克隆和在温控启动子P_RP_L调控下在E.coli中的高效表达。SDS-PAGE分析表明,核酸酶A的含量可占E.coli细胞总蛋白含量的60％。经有效的增溶和复性处理后,重组酶具有与天然酶相同的活力;N-末端氨基酸分析的结果指出,fMet在转译后被加工去除;对重组SNaseA在构象上的同一性也通过Phenyl-Su-perose疏水柱层析进行了分析。
- 静国忠刘利军刘志革周波邹强
- 关键词：金黄葡萄球菌核酸酶基因表达
