刘兵
- 作品数：25 被引量：54H指数：5
- 供职机构：苏州大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金苏州市科技计划项目(应用基础研究计划)江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 在SU3-RFP／GFP模型中观察胶质瘤间质细胞恶性转化被引量：4
- 2014年
- 目的 通过建立小鼠移植瘤模型及荧光蛋白示踪技术,探讨肿瘤间质细胞恶性转化的相关特性. 方法 将转染红色荧光蛋白（RFP）的人脑胶质瘤干/祖细胞SU3接种于表达绿色荧光蛋白（GFP）的裸小鼠皮下,致瘤后取移植瘤组织再培养,克隆永生化的间质细胞,分析这些细胞体外生长特性、DNA合成能力、细胞染色体特征以及在BALB/c无胸腺裸小鼠中的致瘤情况. 结果 SU3-RFP干/祖细胞接种GFP裸小鼠的致瘤率为100％（12/12）.移植瘤组织再培养的细胞群中,克隆到了ihSTC-H8、ihSTC-F8和ihSTC-S2（简称H8、F8和S2）3株具有永生化特征且表达GFP和成纤维细胞标志蛋白——成纤维细胞活化蛋白（FAP）、S100钙结合蛋白A4（S100A4）的细胞,并且具备异常高的DNA合成能力和超5倍体的染色体核型（H8、F8和S2染色体条数分别为110.58±6.51、106.17±6.36和102.58±6.94）,在BALB/c无胸腺裸小鼠中达到100％（9/9）的致瘤率. 结论 异位生长在宿主皮下的SU3-RFP胶质瘤干/祖细胞具有诱导表达S100A4和FAP的间质成纤维细胞恶性转化的潜能.
- 代兴亮戴纯刚贾敬云谢涛刘兵马笑宇陆朝晖王爱东董军兰青黄强
- 关键词：肿瘤干细胞肿瘤移植间质细胞
- 胶质瘤干细胞可诱导宿主肝组织内胶质瘤间质细胞恶性转化被引量：7
- 2014年
- 目的 在已报道的原位移植的胶质瘤间质细胞可发生恶性转化的基础上,进一步探索该转化的发生是否依赖肿瘤部位特异性微环境.方法 将转有红色荧光蛋白（RFP）基因的人胶质瘤干/祖细胞SU3-RFP接种于全身表达绿色荧光蛋白（GFP）的裸小鼠肝脏,致瘤后取移植瘤组织做常规病理检测和细胞培养,单克隆具永生化的GFP＋,GFP＋/RFP＋细胞传代,做细胞表型分析和致瘤实验.结果 SU3-RFP的移植成功率约83％,经异位生长的移植瘤组织再培养获得永生化的间质细胞.已建立B4,B9,B10三株单克隆细胞株,其中BB4为共表达GFP/RFP的融合细胞,还同时表达CD1a、CD83、CD86等树突状细胞标志蛋白;B9表达GFP和巨噬细胞标志蛋白CD68、F4/80;B10表达GFP和成纤维细胞标志蛋白FAP-α、α-SMA、S100均为鼠源宿主细胞.3株细胞遗传学检测都是异倍体,在裸小鼠皮下致瘤率均为100％.结论 在裸小鼠肝组织内建立的胶质瘤异位移植模型中,胶质瘤间质细胞也能恶性转化,表明这种恶性转化在中枢神经系统之外亦能发生,而且由间质细胞恶性转化可引起肿瘤异质性,这对进一步研究肿瘤发生、演进与肿瘤微环境的关系具有重要意义.
- 吴金鼎王德林代兴亮王中勇刘兵陆朝晖王爱东董军兰青黄强
- 关键词：肿瘤干细胞肿瘤移植恶性转化
- 胶质瘤干祖细胞招募骨髓源细胞模型的建立被引量：1
- 2014年
- 目的 建立荧光示踪骨髓重建裸小鼠模型及其在胶质瘤干祖细胞招募骨髓源细胞研究中的应用.方法 不同放射剂量辐照裸小鼠并收集辐照后外周血及骨髓数据确定清髓性骨髓毁损的最佳剂量;辐照后24 h内经尾静脉移植表达绿色荧光蛋白（GFP）的裸小鼠骨髓细胞.流式检测GFP^＋细胞在骨髓及外周血中的分布,比较移植前后骨髓细胞集落形成能力、骨髓切片来评价重建骨髓功能;在此模型上原位接种红色荧光蛋白（RFP^＋）的胶质瘤干祖细胞（SU3-RFP）观察其对骨髓源细胞的影响.结果 6 Gy辐照后3-5d裸小鼠外周血白细胞数接近于0;骨髓细胞集落数与正常组比较显著减少.骨髓移植后裸小鼠外周血白细胞在28 d恢复到辐照前水平;流式结果显示骨髓和外周血中GFP^＋细胞分别为（90.95±2.05）％和（83.62±0.73）％;骨髓细胞集落数与正常组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.SU3-RFP原位移植瘤中发现GFP^＋骨髓源细胞特异性迁徙到肿瘤区域.结论 6 Gy是裸小鼠清髓性骨髓毁损的最佳剂量;GFP^＋骨髓细胞裸小鼠模型可用于示踪研究肿瘤与宿主骨髓源细胞的关系;胶质瘤干祖细胞对骨髓源细胞具有特异性招募作用.
- 施佳陈骅沈云天陈列松戴纯刚贾敬云谢涛刘兵郭辰田野陆朝晖董军兰青黄强罗良生
- 关键词：胶质瘤
- HBO联合尼莫司汀治疗脑胶质瘤裸小鼠模型的研究被引量：5
- 2015年
- 目的探讨高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)联合化疗药物治疗脑胶质瘤裸小鼠模型中的增敏效应。方法将鼠间传代胶质瘤组织块接种于裸小鼠皮下后第3天将其随机分为对照组(n=10)、HBO组(n=5)、尼莫司汀(nimustine,ACNU)组(n=5)、ACNU+HBO组(n=5)。HBO治疗:将荷瘤鼠置于无特殊病原体的HBO-IVC装置内,每天1次1小时HBO治疗。ACNU治疗:给予30 mg/kg腹腔注射,每周1次,共3次。实验结束时取移植瘤组织,q PCR法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein 9,MMP9)、低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和内皮糖蛋白(endoglin,CD105)的mRNA转录情况。结果对照组(n=10)移植瘤质量为(5.28±1.78)g,HBO组(n=5)为(3.47±1.57)g,ACNU组(n=5)为(2.20±0.12)g,两组与对照组比较差异均有统计学意义(P=0.008,P=0.000)。ACNU+HBO组(n=5)为(1.73±0.63)g,与对照组及ACNU组比较差异均有统计学意义(均P=0.004)。HBO+ACNU组的肿瘤组织坏死减轻,宿主源性免疫炎性细胞减少。TNF-α、MMP9、HIF-1α和CD105的mRNA转录水平在ACNU和HBO+ACNU组下降。结论 ACNU联合HBO治疗荷胶质瘤裸小鼠皮下移植瘤有效,HBO联合ACNU疗效更明显,其机制可能与抑制肿瘤相关炎性细胞浸润、TNF-α、MMP9、HIF-1α和CD105的表达有关。
- 刘兵戴纯刚芮琴马加威王爱东陆朝晖黄强
- 关键词：神经胶质瘤高压氧尼莫司汀
- 高压氧联合药物治疗脑胶质瘤模型鼠效果研究被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨高压氧（HBO）联合胶质瘤化疗药宁得朗（ACNU）治疗胶质瘤干祖细胞SU3移植瘤的疗效.方法 将SU3移植于生长在独立送风系统小鼠笼（IVC）内的普通NC裸小鼠皮下.致瘤后,取肿瘤组织接种于全身发绿色荧光的NC裸小鼠皮下,第3天按数字表法随机分成4组：HBO组（7只）、ACNU＋ HBO组（7只）、ACNU组（7只）和对照组（12只）,前2组置于早先建立的无特殊病原体（SPF）的HBO-IVC装置内,每天1次每次100 min HBO治疗;第2、第3组按30 mg/kg ACNU腹腔注射,每周1次,共3次.每3d1次用游标卡尺测肿瘤体积和天平称荷瘤鼠体质量.实验结束时,测量肿瘤体积和质量,取部分组织行相关分子Rt-PCR检测,余下的制作病理切片.结果 各组移植瘤质量并与对照组比：ACNU＋ HBO组为（2 252.86±1 062.54） mg （P=0.006）;ACNU组为（1 914.28 ±744.55） mg（P =0.002）;HBO组为（4 680.00±2 538.40） mg （P=0.925）;对照组为（4 760.83±1 989.18） mg.移植瘤组织和分子病理方面：对照组肿瘤组织坏死性出血灶十分普遍,出血区域旁肿瘤血管较多,血管内皮细胞增生活跃;这种情况HBO组较少见,而ACNU、ACNU＋ HBO组没有见到新鲜出血,陈旧性出血亦较少,血管增生相对不活跃,同时TNF-α和CD105的mRNA表达值较对照组明显低（分别为P=0.028,P=0.008）.结论 ACNU联合HBO治疗荷人胶质瘤荧光裸小鼠皮下移植瘤有明显的抑制肿瘤生长的作用.虽然单独HBO治疗的抑瘤作用不明显,但无促进肿瘤生长作用.因此,恶性肿瘤患者进行康复治疗时,HBO辅助治疗不应视作禁忌性措施.
- 陆朝晖刘兵马笑宇戴纯刚贾敬云谢涛芮琴王爱东兰青黄强
- 关键词：高压氧化学治疗
- 人脑胶质瘤干祖细胞-绿色荧光裸小鼠皮下移植瘤SU3-NC/GFP-1模型建立被引量：1
- 2015年
- 目的探讨人脑胶质瘤干祖细胞-绿色荧光裸小鼠皮下移植瘤模型的建立。方法将人脑胶质瘤干祖细胞株SU3接种于NC-C57BL/6J荧光裸小鼠右前肢腋下,定期测肿瘤大小,取移植瘤组织块持续传代,并做常规病理、免疫组化染色和绿色荧光蛋白(GFP)检测。结果移植瘤连续传至10代,100%致瘤率。肿瘤晚期都有肉眼可见的肿瘤表面皮肤溃疡性结痂,常规病理符合恶性肿瘤特征,分子免疫病理缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、CD34、TNF、Ki67非均一性表达于相关区域或相关细胞,在470nm激发光下可见移植瘤间质存在一定数量的GFP细胞,以及在坏死区域内的GFP细胞CD68+和CD11b+。结论成功建立人脑胶质瘤干祖细胞-绿色荧光裸小鼠皮下移植瘤模型。
- 陆朝晖戴纯刚刘兵马笑宇何林明张金石陈延明代兴亮贾敬云王爱东董军兰青黄强
- 高压氧治疗肿瘤的应用基础研究进展被引量：7
- 2012年
- 高压氧（hyperbaric oxygen，HBO）能否在肿瘤患者康复治疗中应用，是个具有争议的学术问题，尽管已有一些实验研究表明，HBO能抑制肿瘤血管内皮增生和促进肿瘤细胞凋亡，但仍未在临床上广泛开展，原因是尚未有明确的基础研究证实。本文结合笔者的研究工作和设想，综述如下，旨在推动该研究深入进行。
- 陆朝晖刘兵马笑宇戴纯刚黄强
- 关键词：高压氧治疗肿瘤细胞凋亡学术问题血管内皮
- 胶质瘤干细胞诱发肿瘤免疫耐受微环境的实验研究被引量：2
- 2017年
- 目的 探讨胶质瘤干细胞诱发肿瘤免疫耐受微环境的细胞情况.方法 将转染红色荧光蛋白（RFP）基因的SU3细胞（SU3-RFP）接种于转染绿色荧光蛋白（GFP）的裸小鼠脑内、皮下（腋下和足掌）、肝脏和腹腔等部位,建立RFP^＋/GFP^＋实体瘤模型.对移植瘤组织再培养细胞、SU3-RFP细胞与表达GFP的裸小鼠腹腔冲洗液共培养细胞、荷瘤鼠恶性腹水等进行荧光显微镜和实时摄影跟踪观察,分析RFP^＋/GFP^＋移植瘤免疫耐受微环境情况.结果 双色荧光示踪的冰冻切片显示,肿瘤微环境中的细胞均为GFP^＋细胞,而在组织压片上,肿瘤血管显示RFP^＋/GFP^＋的黄色共定位细胞.在GFP单色荧光示踪移植瘤组织中,肿瘤微环境中的细胞为绿色,可见于肿瘤组织边缘、中间和肿瘤血管中,并有CD68^＋、F4/80^＋、CD11c^＋、CD11b^＋和CD80^＋细胞存在.在双色荧光示踪的共培养细胞中,观察到绿色宿主细胞和红色肿瘤细胞之间发生的吞噬和融合,且融合细胞可转化为恶性的树突状细胞和巨噬细胞.结论 胶质瘤干细胞诱导的肿瘤免疫耐受微环境不受肿瘤寄生地固有组织细胞类型的限制,免疫炎性细胞的免疫耐受与其被诱导恶性转化有关,而这种恶性转化可能受到细胞融合的驱动.
- 谢涛马加威刘兵
- 关键词：胶质瘤干细胞绿色荧光蛋白红色荧光蛋白肿瘤微环境免疫耐受
- 神经导航系统在神经外科“锁眼”手术中的应用
- 2005年
- 目的:将神经导航系统与神经外科“锁眼”技术相结合,使微创技术更完美。方法:对18例脑瘤患者进行3mm层厚的CT或1mm层厚MR扫描,利用导航工作站进行术前计划、切口设计、术中指示病灶部位及重要颅内结构。结果:所有病灶定位准确,误差1～3mm,全切14例,次全切除1例,大部分切除3例。术后神经功能保留良好。结论:神经导航系统与神经外科“锁眼”技术的有机结合,具有定位更准确,病灶全切率高,功能损害小等特点。
- 刘兵刘士海陆朝晖兰青
- 关键词：神经导航神经外科
- 早期肠内营养支持对颅脑损伤患者免疫状态及细胞因子的影响观察被引量：9
- 2015年
- 目的观察及研究早期肠内营养支持对颅脑损伤患者免疫状态及细胞因子的影响程度。方法选取2014年1月-2015年3月于该院进行治疗的60例颅脑损伤患者为研究对象,将其随机分为对照组和观察组,每组各30例,对照组于伤后24 h内即进行肠内营养支持,观察组则于伤后3 d后进行肠内营养支持,然后将两组患者干预前和干预后3、7及14天的免疫指标及细胞因子表达水平进行比较。结果干预前两组患者的免疫指标及细胞因子表达水平差异无统计学意义(P>0.05)干预后3、7及14天观察组的上述两方面均明显好于对照组(P<0.05)两组干预后的两方面指标间差异有统计学意义。结论早期肠内营养支持对颅脑损伤患者免疫状态及细胞因子的影响更为积极,对于机体综合状态的改善作用明显。
- 刘兵马笑宇戴纯刚陆朝晖董军
- 关键词：早期肠内营养支持颅脑损伤免疫状态细胞因子
