刘兴梅
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：贵阳医学院附属医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 耐药基因MGMT的克隆及导入人骨髓造血干细胞后抗药性的研究
- [目的]采用RT-PCR从人肝组织克隆六氧甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因,并构建腺病毒表达载体pAd5CMV-NPA-MGMT。将其转染人胚肾293细胞(HEK293)进行包装,制备高滴度重组腺病毒颗粒,...
- 王季石刘兴梅杨远
- 关键词：耐药基因腺病毒载体基因转染基因治疗
- 文献传递
- 脂多糖对间充质干细胞Toll样受体4基因的表达水平及活性的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨脂多糖(LPS)对骨髓间充质干细胞(MSC)Toll 样受体4(TLR-4)基因的表达及其功能的影响。方法采用贴壁培养和密度梯度离心法从大鼠骨髓分离 MSC,通过细胞形态、成骨分化潜能及流式细胞术检测表型以鉴定其纯度;半定量 RT-PCR 和流式细胞术分别检测 MSC 在不同浓度(1、10、100 μg/ml)LPS 存在条件下培养24 h 的 TLR-4 mRNA 相对表达量和共刺激分子(CD80、CD86、MHC-Ⅱ)的表达水平;ELISA 法定量检测 TNF-α的分泌水平。结果骨髓 MSC 低表达 TLR-4mRNA(相对表达量0.61±0.10),同时表达 CD80[(9.56±0.69)%]、CD86[(22.03±2.03)%]、MHC-Ⅱ[(2.51±0.97)%],少量分泌 TNF-α[(4.97±2.98)pg/m1]。MSC 经 LPS 处理后,其 TLR-4mRNA、共刺激分子表达和 TNF-α分泌水平均升高,其中10 μg/ml LPS 培养组升高显著,TLR-4 mRNA相对表达水平为1.55±0.02;CD80、CD86、MHC-Ⅱ阳性细胞率分别为(41.70±2.92)%、(59.72±2.00)%、(24.56±2.19)%;TNF-α分泌水平为(213.12±69.08)pg/ml,与对照组比较,P 值均<0.01。100 μg/ml LPS 处理组与10 μg/ml LPS 处理组相比,各项检测指标均降低,但 MHC-Ⅱ和 TNF-α的降低水平无统计学意义(P>0.05)。结论骨髓 MSC 低表达 TLR-4,体外 LPS 可促进骨髓 MSCTLR-4的表达,且与浓度相关。伴随 TLR-4表达水平的升高,CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达水平及 TNF-α水平同时升高。
- 石亮刘兴梅胡晓彦王季石方琴
- 关键词：脂多糖类间充质干细胞受体
