倪红兵
- 作品数:68 被引量:200H指数:8
- 供职机构:南通大学附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金南通市科技局社会发展科技计划项目上海市科学技术委员会基础研究重点项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学理学文化科学更多>>
- 儿童急性淋巴细胞白血病中BAFF、APRIL及其受体的表达研究被引量:6
- 2014年
- 目的:探讨B淋巴细胞刺激因子(BAFF)、增殖诱导配体(APRIL)及其受体在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及意义。方法:培养ALL细胞株Raji和REH细胞,采用Real Time-PCR及ELISA、Western blot检测BAFF、APRIL及其受体mRNA及蛋白表达;运用荧光免疫细胞化学法和流式细胞术(FCM)鉴定BAFF、APRIL蛋白在Raji和REH细胞的定位与表达;同时运用RT-PCR和ELISA方法检测不同治疗阶段(初发20例,缓解23例)ALL患儿和健康对照儿童(15例)各指标mRNA和血浆蛋白水平,并分析BAFF、APRIL血浆蛋白水平和主要临床指标之间的相关性。结果:各指标mRNA和蛋白在ALL细胞株中均有表达,BAFF和APRIL蛋白定位于细胞膜上,FCM检测其阳性细胞比例及平均荧光强度比对照组明显升高(P<0.05);初发ALL儿童血浆BAFF、APRIL及其受体mRNA和蛋白水平比健康儿童显著升高(P<0.05);缓解期患儿各指标比初发组下降,差异有统计学意义(均P<0.05);血浆BAFF、APRIL水平和乳酸脱氢酶(LDH)、血清铁蛋白(SF)、白细胞计数(WBC)呈正相关,与血红蛋白(Hb)、血小板计数(Plt)呈负相关,与患者性别、年龄无相关性。结论:ALL中BAFF、APRIL异常表达,提示BAFF、APRIL和儿童ALL的发生发展有关;其两个受体BCMA、TACI水平亦有不同程度升高,推断BAFF和APRIL在儿童ALL中可能是通过BCMA、TACI发生作用。
- 吴利辉孙宝兰徐美玉宋红花顾健辉杨治平倪红兵
- 关键词:儿童急性淋巴细胞白血病B淋巴细胞刺激因子增殖诱导配体
- 测定对人BAFF-R基因启动子活性影响因素的方法
- 本发明公开了一种测定对人BAFF-R基因启动子活性影响因素的方法,包括引物设计、BAFF-R基因5’侧翼区的克隆、BAFF-R基因5’侧翼区序列缺失质粒的构建、细胞培养、IFN-γ和NF-κB抑制剂对细胞增殖的干预、重组...
- 鞠少卿王惠民王跃国袁宏香丛辉王旭东丁伟峰浦江倪红兵
- RNA干扰沉默增殖诱导配体基因对结肠癌细胞周期的影响被引量:4
- 2010年
- 目的 探讨沉默增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)基因对人结肠癌SW480细胞增殖及细胞周期的影响.方法 将APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(siRNA-APRIL)转染结肠癌SW480细胞株,以非特异性序列载体转染组(nontargeting control)及未转染组(nontransfected control)作为对照.Real-time PCR和Western blot评价APRIL沉默效率;CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化;RT-PCR检测细胞周期调控基因p21及p27的表达.结果 与非特异性序列载体转染组及未转染组相比,siRNA-APRIL显著抑制APRIL mRNA及蛋白的表达(P<0.05);siRNA-APRIL转染SW480细胞48 h、72 h和96 h后细胞增殖能力明显下降(P<0.05);转染48 h,siRNA-APRIL组G0/G1期细胞比例增高,S期及G2/M期细胞比例减少,细胞凋亡的数量增加,同时p21及p27 mRNA的表达上调(P<0.05);而上述指标两对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 siRNA-APRIL能特异性抑制结肠癌SW480细胞APRIL的表达,并抑制细胞增殖,使细胞周期出现G0/G1期阻滞,其机制可能与上调p21和p27的表达有关.
- 王峰丁伟峰王敬春景蓉蓉倪红兵丛辉王跃国鞠少卿王惠民
- 关键词:增殖诱导配体小干扰RNA结肠癌细胞周期
- 焦磷酸测序技术及其应用进展被引量:13
- 2005年
- 焦磷酸测序技术是一种新的依靠生物发光进行DNA序列分析的技术。在DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶和双磷酸酶的协同作用下,将引物上每一个dNTP聚合与一次荧光信号释放偶联起来,通过检测荧光的释放和强度,达到实时测定DNA序列的目的。此技术不需要荧光标记的引物或核酸探针,也无需进行电泳,具有分析结果快速、准确、灵敏度高和自动化的特点。在遗传多态性分析、重要微生物的鉴定与分型研究、克隆检测和等位基因频率分析等方面具有广泛的应用。
- 倪红兵鞠少卿王惠民
- 关键词:DNA序列分析DNA序列分析DNA聚合酶遗传多态性分析克隆检测生物发光
- 《临床实验室管理学》的优化组合教学被引量:10
- 2008年
- 在《临床实验室管理学》的教学过程中,通过将教学内容与其他教材中相关内容相结合、与现行的国家法律法规相结合、与社会实践及研究结果相合等方式方法;充分利用有关教学资源,开展读书报告会等多种形式,可以调动学生学习的主动性和积极性,取得良好的教学效果。
- 王惠民倪红兵崔明
- 关键词:教学
- 焦磷酸测序技术及其应用进展被引量:11
- 2006年
- 倪红兵王惠民
- 关键词:生命科学研究荧光分子荧光标记光信号
- 不同检测系统胆固醇、三酰甘油的偏倚分析
- 2009年
- 目的通过不同检测系统的方法学比对分析,探讨各检测系统之间测定血清胆固醇、三酰甘油是否具有可比性。方法依据美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)EP9-A2文件要求,每天随机从临床样本中抽取8份不同浓度的血清样本,分别用两种检测系统进行胆固醇、三酰甘油的测定,共测定5d,记录实验结果,将结果进行相关回归分析,计算在医学决定水平处的预期偏倚(B^c)和预期偏倚的95%可信区间,并判断偏倚是否可以接受。结果不同检测系统对胆固醇、三酰甘油测定结果的偏倚在允许误差范围内,两者结果具有可比性。结论当用两个以上的检测系统检测同一检验项目时,应进行方法比对和偏倚评估,判断其临床可接受性能,以保证检验结果的可比性。
- 李本善倪红兵
- 关键词:EP9-A2偏倚评估
- 氨基酸分析-同位素稀释质谱法准确定量胱抑素C重组蛋白被引量:4
- 2017年
- 目的:建立同位素稀释液相色谱串联质谱法进行氨基酸分析,准确定量人重组蛋白胱抑素C(Cys C)。方法:优化Cys C蛋白酸水解条件,将Cys C蛋白水解成氨基酸,以水解产物缬氨酸(Val)和苯丙氨酸(Phe)为研究对象,13C5-Val和13C9,15N-Phe为内标,根据括号法分别计算水解产物Val和Phe浓度,从而准确定量Cys C蛋白。结果:Cys C蛋白在130℃,6 mol/L HCl溶液中水解4 h可完全水解。以水解产物Val和Phe分别计算Cys C浓度为1.324 mg/g和1.328 mg/g,一致性较好,检测结果变异系数均小于7%(n=5),取二者平均值得到重组Cys C蛋白浓度为1.326 mg/g。结论:成功建立同位素稀释质谱法准确定量重组蛋白Cys C的氨基酸分析方法,有望为临床实验室蛋白质检测的溯源提供思路。
- 沈蕾季伙燕崔明王建新倪红兵王惠民
- 关键词:氨基酸分析同位素稀释质谱法蛋白定量
- 应用参考方法对血清γ-谷氨酰基转移酶的测量不确定度评定被引量:1
- 2010年
- 目的 探讨临床实验室对测量不确定度的评定方法和程序.方法 应用国际临床化学联合会(IFCC)公布的参考方法对参考实验室外部质量评价计划(RELA)样本进行γ-谷氨酰基转移酶(GGT)催化活性浓度测定,明确反映整个过程测量不确定度分量的来源,按A,B两类不确定度的计算方式对各分量分别进行评定,计算合成标准不确定度,最后取95%置信区间,计算出扩展不确定度.结果 GGT催化活性浓度均值为3.492 μkat/L,合成标准不确定度为0.032 μkat/L,取95%置信区间,包含因子k=2,则扩展不确定度(U)为0.064 μkat/L.结论 临床实验室的测量不确定度与传统的测量误差相比,更能反映测量的水平,对临床检验工作有一定的指导意义.
- 倪红兵施秀英王惠民肖静鞠少卿王跃国
- 关键词:测量不确定度Γ-谷氨酰基转移酶合成标准不确定度扩展不确定度
- 人BAFF-R基因启动子活性的测定方法
- 本发明公开了一种人BAFF-R基因启动子活性的测定方法,包括引物设计、BAFF-R基因5’侧翼区的克隆、BAFF-R基因5’侧翼区序列缺失质粒的构建、细胞培养、重组报告基因质粒瞬时转染细胞、荧光素酶活性检测等步骤。本发明...
- 鞠少卿王惠民王跃国袁宏香丛辉王旭东丁伟峰浦江倪红兵
- 文献传递