侯俊
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 生存素反义寡核苷酸在胃癌化疗中对表阿霉素的增敏性及其信号转导途径研究
- 2009年
- 目的:通过构建survivin反义寡核苷酸,研究其在胃癌化疗中对表阿霉素(Epirubicin,EPI)的增敏作用及作用机制。方法:构建survivin反义寡核苷酸链(Antiscnse RNA,ASODN)及正义寡核苷酸对照链(SODN),脂质体法转染胃癌SGC-7901细胞,MTT法检测转染组细胞抑制率并筛选出适宜浓度,不同浓度表阿霉素处理胃癌SGC-7901细胞,MTT法检查表阿霉素对其生长抑制作用并筛选出4组浓度做为待测浓度,将2种因素联合作用于SGC-7901细胞,Western-blot法检查survivin蛋白表达情况,MTT法检查表阿霉素对其抑制率,流式细胞仪检查细胞周期,Annexin V-FITC法检查细胞凋亡情况,RT-PCR法检查bcl-2、SMac mRNA表达情况。结果:经200nmol/L survivin反义寡核苷酸处理后的SGC-7901细胞对表阿霉素的敏感性明显增加:MTT法示转染后细胞经表阿霉素作用24h后,抑制率较单独使用表阿霉素的未转染组明显提高(P<0.05,q>1.15),流式细胞仪检查示联合作用组使细胞G2/M期细胞数较单独使用表阿霉素组明显增多:Western-blot检查示转染后survivin蛋白表达水平显著降低,Annexin V-FITC检查示转染组细胞凋亡明显增加,RT-PCR检查示:SMac mRNA在联合作用组较空白对照组表达上调。结论:Survivin反义寡核苷酸能够增强SGC-7901细胞对表阿霉素的敏感性,其作用可能是通过上调SMac的表达实现的。
- 侯俊张才全彭洪马国栋
- 关键词：反义寡核苷酸生存素表阿霉素信号转导途径
- 曲古抑菌素A与罗格列酮联合应用对胃癌细胞增殖的抑制作用
- 2009年
- 目的研究组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂曲古抑菌素A(TSA)与过氧化物酶体增殖物激活受体γ配体罗格列酮(ROZ)联合应用对胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法首先用不同浓度的TSA和ROZ分别作用于SGC-7901细胞,MTT法检测二者对细胞增殖的抑制作用,以筛选出合适的联合作用浓度。将SGC-7901细胞随机分为对照组、TSA组、ROZ组和TSA+ROZ组,加入相应的药物处理48h后,MTT法检测各组细胞增殖抑制率,并应用流式细胞仪检测细胞周期情况,RT-PCR检测PPARγ和CyclinD1基因mRNA的转录水平。结果对SGC-7901细胞增殖抑制作用不显著的低剂量TSA(40nmol/L)与ROZ联用时,能显著增强ROZ对细胞增殖的抑制作用,TSA+ROZ组G0/G1期细胞比例较单用TSA或ROZ组明显增加,且CyclinD1基因mRNA转录水平明显下降;TSA作用于细胞后,PPARγ基因mRNA转录水平较对照组明显升高,而ROZ单独作用后,细胞PPARγ基因mRNA转录水平无改变。结论TSA可明显增强ROZ对SGC-7901细胞增殖的抑制效应,提示HDAC在SGC-7901细胞内可能具有抑制PPARγ的作用。
- 马国栋张才全侯俊彭洪
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶过氧化物酶体增殖物激活受体Γ胃癌增殖
- 巨噬细胞移动抑制因子抗体对HepG2细胞增殖的影响被引量：1
- 2008年
- 目的研究巨噬细胞移动抑制因子（MIF）抗体对HepG2细胞增殖的影响，并探讨其作用机制。方法四甲基偶氮唑盐法检测MIF抗体（50、100，200、400μg／L）对HepG2细胞增殖的抑制作用；流式细胞仪检测细胞周期的变化；免疫组织化学法检测Cyclin D1蛋白表达；Westernblot检测血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达；酶联免疫吸附法检测MIF抗体对HepG2细胞分泌IL-6水平的影响。结果MIF抗体可以抑制HepG2细胞生长并具有剂量和时间依赖性。MIF抗体可使细胞周期停滞于G0／G1期，不同浓度（0、50、100、200、400μg／L）MIF抗体作用48h后，G0／G1期细胞比例分别为61．34％±1．08％、65．08％±2．71％、71．19％±1．19％、78．39％±1．00%、83．92％±0．51％。不同浓度MIF抗体作用后CyclinD1蛋白表达率分别为26．060／0±0．47％、22．34％±0．75％、18．06％±1．16％、14．03％±0．59％，明显低于对照组（29．51％±1．28％）。不同浓度MIF抗体作用后，VEGF蛋白表达分别为21．22％±0．68％、19．64％±0．54％、18．04％±0．42%、16．59％±0．66％，明显低于对照组（23．23％±0．51％）。MIF抗体对HepG2细胞分泌IL-6有抑制作用，随着MIF抗体浓度的增加，其IL-6分泌量也相应降低，分别为（210．67±9．31）pg／ml、（181．67±10．05）pg／ml、（160．50±6．60）pg／ml、（143．67±10．56）pg／ml、（118．01±7．48）pg／ml。结论MIF抗体可抑制HepG2细胞的增殖，其可能机制是下调CyclinD1蛋白的表达，从而阻止其由G0／G1期向S期分化；也可能与其抑制VEGF蛋白的表达、减少IL-6的分泌有关。
- 彭洪杨祖奎侯俊马国栋程春燕
- 关键词：肝细胞细胞周期白细胞介素-6巨噬细胞移动抑制因子
- HDAC在PPARγ途径抑制胃癌SGC-7901细胞侵袭中的作用被引量：5
- 2009年
- 背景与目的:有研究表明组蛋白去乙酰化酶(histone deacety lase,HDAC)能抑制过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)促进脂肪细胞分化的能力;最近发现PPARγ活化后,能够抑制多种肿瘤细胞的生长与侵袭。本研究旨在观察HDAC在PPARγ途径影响胃癌细胞株SGC-7901侵袭能力中的作用及机制。方法:用不同浓度的HDAC抑制剂曲古抑菌素A(TSA)和PPARγ配体罗格列酮(ROZ)分别作用于SGC-7901细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测两种药物对细胞增殖的抑制作用,以筛选出合适的联合浓度。将SGC-7901细胞随机分为对照组、TSA组、ROZ组和TSA与ROZ联合组。MTT法检测细胞增殖抑制率,Transwell小室法检测各组胃癌细胞侵袭能力,RT-PCR法检测各组细胞PPARγ、MMP-2mRNA表达情况,Westernblot检测MMP-2蛋白的表达。结果:5μmol/LROZ和40nmol/LTSA为无明显细胞毒性作用的最高浓度,低于此浓度的ROZ及TSA可减弱SGC-7901细胞的侵袭能力(P<0.01)。5μmol/LROZ与20nmol/LTSA联合作用对SGC-7901细胞的侵袭抑制呈协同作用(q=1.41>1.15)。ROZ可以下调SGC-7901细胞MMP-2mRNA和蛋白的表达(P<0.01),TSA与ROZ联合处理组细胞MMP-2表达下调较单用ROZ组明显(P<0.01)。RT-PCR结果显示,TSA作用SGC-7901细胞后,可使PPARγ表达增加(P<0.01)。结论:HDAC通过一系列分子机制限制PPARγ的激活,应用TSA抑制HDAC活性后,可以使ROZ抑制胃癌细胞的侵袭活性增强。
- 马国栋张才全侯俊张龙云蔺超
- 关键词：SGC-7901细胞组蛋白去乙酰化酶过氧化物酶体增殖物激活受体Γ
