龚伟
- 作品数：19 被引量：117H指数：9
- 供职机构：解放军军需大学军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 新城疫病毒对肿瘤细胞生物学行为的影响被引量：6
- 2003年
- 目的:研究新城疫病毒(NDV)对肿瘤细胞的作用。方法:采用空斑试验观察NDV对鸡胚成纤维细胞(CEF)的作用,通过细胞抑制试验、琼脂糖凝胶电泳、TUNEL染色、细胞骨架染色及细胞唾液酸含量测定等,观察NDV对肿瘤细胞的影响。结果:NDV对CEF、HeLa及Hep-2等肿瘤细胞可产生明显的病变,而对人的羊膜细胞(Wish细胞)无明显影响;对Hela细 胞和Hep-2细胞能产生明显的生长抑制作用,但无量效依赖关系。NDV还可导致以凋亡为主的细胞死亡,引起Hela细胞和Hep-2细胞的细胞骨架发生改变,以及去除肿瘤细胞表面唾液酸的作用。结论:NDV能选择性地作用于人肿瘤细胞,抑制肿瘤细胞的生长,导致肿瘤细胞发生凋亡,有望成为一种有效的抗肿瘤生物制剂。
- 薛立娟金宁一龚伟王宏伟孙大辉罗琴芳葛涛李萍
- 关键词：新城疫病毒肿瘤细胞生物学行为
- 凋亡素诱导人成骨肉瘤细胞多药耐药株凋亡的研究被引量：9
- 2001年
- 目的 :研究凋亡素对人成骨肉瘤细胞OS 732多药耐药株R OS 732的作用。方法 :凋亡素基因VP3 经酶切后克隆入质粒 pIRES1,获得重组质粒pIRVP3,通过脂质体法 pIRVP3转染R OS 732细胞 ,RT PCR检测凋亡素在细胞中的表达 ;光镜及电镜下观察瘤细胞 ;提取瘤细胞基因组DNA进行琼脂糖凝胶电泳 ;流式细胞仪检测凋亡率。结果 :凋亡素基因已在转录水平表达 ;光镜及电镜下 2组细胞形态变化明显 ;电泳见转染组DNA呈梯状条带 ,对照组为单一条带 ;转染组凋亡率明显高于空白对照组 (P <0 .0 1)。结论 :凋亡素可有效诱导R OS 732细胞凋亡。
- 孙大辉金宁一谷贵山龚伟段德生
- 关键词：凋亡素成骨肉瘤多药耐药性凋亡细胞
- 日粮铜对猪生长性能及血清GH、INS、IGF-Ⅰ、IGFBP_3水平的影响被引量：26
- 2003年
- 选用 6 0头断乳“军牧 1号”白猪 ,分成 6组 ,每组 10头 ,分别饲以添加 0、10 0、15 0、2 0 0、2 5 0、30 0 mg/ kg铜 (硫酸铜 )的日粮 ,进行为期 80 d的饲养试验 ,定期称重、采血 ,观测铜对仔猪生长性能及血液 GH、INS、IGF- 、IGFBP3 的影响。结果表明 :基础日粮中添加 10 0～ 30 0 m g/ kg铜均能促进仔猪的生长 ,降低饲料消耗 ,其中以 2 5 0 m g/ kg铜和第40～ 6 0天最为显著 (P<0 .0 1)。高剂量铜能显著提高循环血液中 GH、INS、IGF- 、IGFBP3 的水平 ,其中以添加 2 5 0mg/ kg铜水平 ,于试验期第 2 0～ 40天最为明显 (P<0 .0 1)。高铜促生长作用显然是通过促进 GH、INS、IGF- 的合成和分泌而实现的。
- 刘国文周昌芳王哲张乃生龚伟张苏江张光圣冯海华付世新
- 关键词：日粮铜血清INSIGF-IIGFBP3
- 铜对体外仔猪软骨细胞增殖和自分泌IGF-、IGFBP_3的影响被引量：16
- 2002年
- 体外分离、培养仔猪关节软骨细胞 ,然后在细胞培养液中分别添加 0、7.8、15 .6、31.2、6 2 .5 μm ol/ L 铜。结果表明 ,软骨细胞在 4种浓度的铜中可存活并增殖 ,而且能增加胰岛素样生长因子 (IGF- )、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP3 )的分泌量。但随铜浓度的增加 ,其存活率、增殖率、3 H- Td R掺入率及 IGF- 、IGFBP3 的分泌量有明显的差异。且以培养液中添加 31.2μmol/ L铜对软骨细胞的增殖作用最强 ,增殖率、3 H- Td R掺入数、IGF- 、IGFBP3 的分泌量显著高于对照组 (P <0 .0 1)。表明 31.2 μmol/ L 铜浓度是促进体外软骨细胞增殖和自分泌 IGF- 、IGFBP3 的最适浓度。
- 刘国文周昌芳张乃生龚伟王哲冯海华付世新
- 关键词：铜仔猪软骨细胞增殖自分泌IGF-IIGFBP
- 新城疫病毒HN基因构建的核酸疫苗抗肿瘤作用研究被引量：12
- 2003年
- 目的 :探讨HN基因在NDV抗肿瘤上发挥的作用。方法 :以pVAX1为表达载体构建了含NDVHN基因的pVHN核酸疫苗 ,以脂质体介导方法在体外转染OS732细胞 72h后 ,用 3,5 二羟基甲苯法测定OS732细胞膜唾液酸含量的变化。 6周龄BALB/c鼠左后肢皮下接种 2× 10 6个S180肿瘤细胞 ,分别于肿瘤接种后的第 7天 (肿瘤直径为 2～ 3mm)和第 17天瘤内注射 10 0 μg核酸重组体 ,同时设pVAX1对照组和单纯荷瘤对照组。荷瘤鼠经治疗后框窦采血 ,分离血清 ,测定血清唾液酸含量。取脾 ,采用FACS方法测定淋巴细胞亚群数量的变化。结果 :pVHN体外转染OS732细胞后 ,能显著降低细胞表面唾液酸含量 (P <0 .0 5 )。pVHN应用于荷瘤鼠显著降低血清中唾液酸含量 (P <0 .0 5 ) ,引起CD8+ T淋巴细胞亚群数量的增加 (P <0 0 5 )。结论 :单独HN基因在体外转染能够降低肿瘤细胞表面唾液酸含量 ,体内表达后引起T淋巴细胞亚群数量改变。
- 米志强金宁一龚伟薛立娟孙大辉葛涛连海解丽华
- 关键词：新城疫病毒HN基因核酸疫苗抗肿瘤作用
- 新城疫病毒HN和鸡贫血病毒VP3基因联合抗肿瘤生物制剂
- 本发明提供3种能表达新城疫病毒HN基因及鸡贫血病毒VP3基因的联合抗肿瘤作用的核酸疫苗,分别为pIRHNVP3、pVHN和pVVP3。其中,pIRHNVP3转染真核细胞后,能同时表达HN蛋白和VP3蛋白;pVHN和pVV...
- 金宁一龚伟薛立娟丁壮葛涛金扩世郭志儒王宏伟李萍
- 文献传递
- 脊髓造影诊断犬椎间盘脱出症
- 作者应用脊髓造影术,对1例双后肢瘫痪的病犬作了检查,并取得了满意效果,现介绍如下。发病情况及临诊检查京巴犬,白色,3岁,雌性,体重4kg。主诉:该犬三个月前因从床上往下跳跃而摔伤,曾去其它诊所检查过,未见明显异常,两个月...
- 李小兵张盛云韩红伟张乃生龚伟李毓义
- 关键词：侧位片椎间隙
- 文献传递
- pVVP3和pVHN核酸疫苗的构建、表达及对肿瘤细胞的作用被引量：13
- 2003年
- 用pVAX1载体构建抗肿瘤核酸疫苗 .将鸡贫血病病毒 (CAV)的VP3基因和鸡新城疫病毒(NDV)HN基因插入载体pVAX1的多克隆位点 ,构建了 2个重组基因疫苗pVVP3和pVHN .转染OS732细胞 ,Western印迹及血凝试验检测HN基因表达状况及表达产物的活性 .RT PCR、DNALadder、TUNNEL染色检测VP3基因的表达及表达产物诱导OS732细胞凋亡作用 .酶切鉴定证实成功地构建了两个核酸疫苗 ,并能在真核细胞内表达 .含HN的核酸疫苗pVHN表达后具有血凝活性并致肿瘤细胞表面唾液酸含量降低 (P <0 0 5 ) .pVVP3的转染能导致OS732细胞凋亡 ,凋亡率可达87% .试验结果表明 。
- 米志强金宁一龚伟薛立娟连海解丽华李萍
- 关键词：鸡新城疫病毒HN基因抗肿瘤
- pIRVP3/pIRHNVP3核酸表达质粒的构建及对肿瘤细胞的影响被引量：10
- 2002年
- 目的 研究应用凋亡素基因 (VP3)和NDVHN基因联合抗肿瘤的可能性。方法 以pIRES1neo为表达载体构建了含鸡贫血病毒VP3基因和长春株HN基因的pIRVP3/pIRHNVP32个核酸重组质粒。将 2个重组质粒在体外转染HeLa和OS 732细胞 ,用荧光显微镜、DNA琼脂糖电泳及TUNEL染色等方法 ,检测凋亡素基因和HN基因导致细胞死亡的类型。结果pIRVP3和pIRHNVP3转染HeLa和OS 732细胞 4 8h后 ,pIRVP3和pIRHNVP3均具有很强的诱导肿瘤细胞凋亡的能力 ,且pIRVP3的抗肿瘤作用强于pIRHNVP3。结论 在体外 。
- 龚伟薛立娟孙大辉王宏伟葛涛罗琴芳李萍金宁一
- 关键词：凋亡素NDVHN核酸生物制剂
- 利用细菌/杆状病毒系统在昆虫细胞中表达 HIV-1Gag蛋白
- 2001年
- 目的在昆虫细胞中表达中国流行株 Ｂ亚型 ＨＩＶ－１ Ｇａｇ蛋白，制备重组 Ｇａｇ蛋白。方法将中国 株 Ｂ亚型 ＨＩＶ－１的 Ｇａｇ全基因序列，克隆到杆状病毒表达载体 ｐｆａｓｔｂａｃＩ中，构建了重组质粒 ｐｆａｓｔＧａｇ。经转座及平板 筛选，提取重组穿梭质粒 Ｂａｃｍｉｄ。经转染Ｓｆ９昆虫细胞后，获得了重组杆状病毒。用 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ和间接免疫荧光实验分析表达的目的蛋白。结果重组病毒在昆虫细胞 Ｓｆ９中高效表达了中国株 Ｂ亚型 ＨＩＶ－１ Ｇａｇ蛋 白，表达的重组蛋白具有良好的抗原活性，可与ＨＩＶ－１标准阳性血清及ｐ２４单克隆抗体发生较强的免疫反应。结论 重组表达产物可用于艾滋病的免疫诊断和疫苗研究。
- 王宏伟金宁一龚伟张应玖许崇波秦云龙金洪涛邵一鸣殷震
- 关键词：免疫缺陷病毒杆状病毒GAG蛋白
