鲁晓知
- 作品数:11 被引量:46H指数:3
- 供职机构:武汉生物制品研究所更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 中国彝族人群HLA-A基因的DNA分型被引量:3
- 2003年
- 鲁晓知洪坤学秦光明李崇行朱家鸿邵一鸣
- 关键词:彝族人群HLA-A基因DNA分型基因多态性
- 芹菜夜蛾核型多角体病毒的毒力测定
- 1998年
- sfaMNPV是新近从美国引进的一株杆状病毒,它能感染多种鳞翅目昆虫.本实验成功地利用它感染了小菜蛾、棉铃虫和甜菜夜蛾三种昆虫的幼虫,扩大了它的宿主范围.并测定了它对这三种昆虫的毒力.结果表明,SfaMNPV不仅能感染这三种昆虫,且能在这三种昆虫幼虫体内大量增殖,能作为这三种昆虫的生物杀虫剂使用.
- 邓宁鲁晓知
- 关键词:芹菜夜蛾核型多角体病毒毒力测定
- 丙型肝炎病毒非结构区NS4b基因片段的克隆和表达
- 2000年
- 采用聚合酶链反应 (PCR)技术和DNA体外重组方法 ,克隆出 5 79bp的丙型肝炎病毒 (HCV)NS4b基因片段 ,插入到原核高效表达载体 pET 2 8a中 ,构建重组质粒pET/NS4b ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)菌株 ,经IPTG诱导培养后 ,获得了目的蛋白的高效表达。SDS PAGE分析显示在 30kD处有一条表达的目的蛋白区带。通过固定化金属配体亲和层析 (IMAC)纯化目的蛋白 ,ELISA检测结果表明 ,该重组蛋白具有很好的特异性和抗原性。
- 鲁晓知郑琳严家新朱家鸿
- 关键词:丙型肝炎病毒克隆ELISA
- 中国彝族人群HLA-Cw位点基因多态性研究被引量:1
- 2003年
- 目的 应用DNA分型技术 ,分析中国彝族人群在HLA Cw位点的等位基因分布频率 ,为进一步研究HLA Cw与HIV感染及其发病进程的关联提供背景资料。方法 设计合成 2 6条特异性分型引物和 1对内对照引物 ,组成 2 4个PCR反应 ,建立PCR SSP分型方法 ,对 10 2例随机选取的无亲缘关系的中国彝族健康人作HLA Cw基因分型。结果 在彝族健康人群中共检测到HLA Cw位点的12种等位基因 ,其中HLA Cw 0 1、Cw 0 7和Cw 0 8为主要分布型别 ,基因频率分别为 0 .3 3 3 3、0 .2 5 0 0和 0 .1765 ,检出了HLA Cw 12、Cw 13 0 1、Cw 14和Cw 15等血清学方法不能鉴定的HLA Cw基因 ;统计分析表明HLA Cw位点的基因型分布符合Hardy Weinburg平衡 (χ2 =65 .983 1,df=66,P >0 .0 5 )。结论 证实了PCR SSP法用于HLA Cw基因分型的可靠性和适用性 ,在DNA水平上提供了中国彝族群体的HLA
- 鲁晓知洪坤学秦光明陈健平阮玉华李崇行朱家鸿邵一鸣
- 关键词:基因多态性人种群基因型艾滋病
- 应用间接混合夹心酶免疫试验法检测人血清中狂犬病毒抗体被引量:8
- 1996年
- 本文利用狂犬病毒单抗,结合间接ELISA,建立了一种检测狂犬病毒抗体的间接混合夹心酶免疫试验法。以此方法检测60份人血清样品,与常规的小鼠中和试验法测得结果相比较,二者相关性显著(r=0.926)。实验证明,此法特异性强、灵敏度高、稳定性好,且省去了间接ELISA的抗原提纯等步骤,操作简单,适合于发展成为诊断试剂盒。
- 鲁晓知徐葛林朱家鸿肖鼎昌徐雯
- 关键词:狂犬病毒抗体检测狂犬病
- 抗狂犬病毒糖蛋白及核蛋白单抗的研制及应用被引量:16
- 1996年
- 狂犬病毒CVS株免疫BALB/c小鼠后,获得6株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,经检测,其中4株分泌抗狂犬病毒核蛋白单抗.2株分泌抗糖蛋白单抗.将这些单抗腹水制成狂犬病毒ELISA夹心法酶标诊断试剂,试验结果表明,对固定每株及街毒有较好的特异性.对正常鼠脑及组织培养物无非特异性反应,可检出毒力低至330LD50的CVS林狂犬病毒,有较好的敏感性。
- 徐葛林鲁晓知朱家鸿肖鼎昌徐红徐雯
- 关键词:狂犬病毒单克隆抗体
- 中国彝族人群CCR5基因单核苷酸多态性及其与HIV感染的关联研究被引量:1
- 2005年
- 目的对中国彝族人群CCR5基因调节区和结构区的单核苷酸多态性(SNP)进行全面检测,并分析SNP与HIV感染的关联。方法通过巢式PCR分别扩增102份彝族正常人和68份HIV感染者样本的CCR5基因调节区和结构区,利用变性高压液相色谱法(DHPLC)筛选存在突变的基因片段,对突变片段进行双向DNA序列测定,然后应用SequenceNavigator软件对CCR5基因的单核苷酸多态性进行分析,并通过SPSSandPPAP软件分析SNPs与HIV感染的相关性。结果在中国彝族人群CCR5基因的编码区中检测到A77G、G316A、T532C、C921T、G668A五种SNP以及第686688位的AGA缺失突变(686Del3),除C921T(Y307Y)为无意义突变外,其他A77G、G316A、T532C、G668A均为有意义突变,它们的氨基酸突变分别为K26R、G106R、C178R、R223Q突变。在这些突变位点中,只有G668A突变的等位基因频率较高,可达0.08,其余均小于0.01,并且在正常人群和HIV感染者两个群体中的等位基因频率没有显著性差异(P>0.05);与编码区所不同的是,在调节区检测到T58934G、G59029A、T59353C、G59402A和C59653T五种SNP,他们的等位基因频率较高,在0.19120.2941范围之间。所检测到的每一个突变在正常人群和HIV感染人群中的分布均差异无统计学意义(P>0.05)。突变位点间的连锁与HIV感染的相关性,提示T59353CG59402A单体型与HIV感染可能存在关联。结论DHPLC是一种快速的高效筛选未知基因突变的高通量方法。SNP与HIV感染的关联性有待于进一步深入研究。
- 马丽英洪坤学鲁晓知秦光明陈健平陈康林阮玉华邢辉朱家鸿邵一鸣
- 关键词:获得性免疫缺陷综合征彝族
- 芹菜夜蛾核型多角体病毒毒力的生物测定被引量:13
- 1997年
- 利用芹菜夜蛾核型多角体病毒室内感染2龄小菜蛾、棉铃虫和甜菜夜蛾,测得LC50分别为2.47×106、7.96×105和2.22×105PIB/ml。以4.22×107和4.22×106PIB/ml两种浓度感染小菜蛾、棉铃虫和甜菜夜蛾等2龄幼虫,测得LT50,小菜蛾分别为6.15和7.32天,棉铃虫分别为8.20和11.37天,甜菜夜蛾分别为5.53和7.20天。致死时间均随感染浓度增加而减少。
- 鲁晓知陈曲侯洪华珠王家坤余泽华
- 关键词:核型多角体病毒小菜蛾生物测定
- 丙型肝炎病毒E2抗原基因的克隆、表达及纯化被引量:1
- 2000年
- 目的 为了获得大量重组HCVE2蛋白 ,以研究E2抗体潜在的保护作用。方法 利用PCR方法从HCV基因组序列中扩增出 931bp的E2基因片段 ,经EcoRI和Sall双酶切后连接到pET 2 8a表达载体上 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)菌株 ,得到重组质粒PET -E2 ,工程菌经IPTG诱导培养 ,明显表达出HCVE2蛋白 ,表达产物经固定化金属配体亲和层析纯化 ,用ELISA方法检测生物学活性。结果 表达产物主要以包涵体形式存在 ,表达量达菌体蛋白的 18%以上 ,目的蛋白具有良好的反应原性。
- 鲁晓知郑琳严家新朱家鸿
- 关键词:丙型肝炎病毒E2基因
- 人α-干扰素基因在小菜蛾(Px)细胞中的表达被引量:1
- 1999年
- 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 (Autographacalifornicanuclearpolyhedrosisvirus ,AcN PV)是杆状病毒基因工程的理想材料 本文采用一种新型的细胞系———Px细胞系为受体细胞 ,pAc373-IFN -α为转移载体 ,利用AcNPV这种表达载体成功地在Px细胞中表达了人α
- 邓宁周世力鲁晓知
- 关键词:ACNPV基因表达