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中脑皮层投射多巴胺神经元的提取及帕潘立酮对其电生理学特性的影响被引量：1: 2012年; 目的精确示踪并分离中脑皮层多巴胺(DA)能神经元,检测帕潘立酮对其动作电位的影响。方法采用脑立体定位技术,将荧光逆行性示踪剂注射至鼠脑内嗅皮层区,灌注取脑,行冰冻切片;采用免疫组织化学技术进行酪氨酸羟化酶(TH)染色;依据荧光强度分选示踪标记的神经细胞并培养,采用细胞膜片钳技术对其进行电流注射,并加入抗精神病药物帕潘立酮,检测加药前后动作电位的产生及变化。结果准确标记向脑皮质投射的中脑DA能神经元,呈TH阳性,位于腹侧被盖区;筛选出标记的DA能神经元,电流刺激可诱发出DA神经元典型的动作电位,加入抗精神病药物帕潘立酮后,动作电位幅度降低(P<0.05)、宽度变小(P<0.01)。结论精确分离出向脑额叶投射的中脑皮层DA神经元,帕潘立酮可降低此类细胞动作电位幅度及宽度,从而降低细胞的兴奋性。; 董海曼高青张静暴丽华李贵宝彭雷冯晓雯岳庆伟刘增训孙晋浩高英茂; 关键词：多巴胺神经元立体定位技术动作电位

白藜芦醇对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用: 2012年; 目的探讨白藜芦醇对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法用不同浓度的Aβ25-35处理PC12细胞,建立细胞毁损模型,然后加入不同浓度的白藜芦醇,在显微镜下观察PC12细胞形态的变化及突起生长情况。采用MTT检测技术观察PC12细胞的生长活性,采用酶标仪检测乳酸脱氢酶(LDH)的活性,采用瑞士-吉姆萨染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果损伤组加入Aβ25-35,24 h后细胞形态不规整,突起出现不同程度的肿胀破裂,48 h后见不到完整的突起结构;保护组加入白藜芦醇预孵育后明显延缓突起损伤,24 h后仍能观察到比较完整的突起结构,48 h后远端发生轻微断裂。保护组细胞突起长度和D(λ)值明显大于损伤组(P<0.01),细胞凋亡数以及LDH活性明显低于损伤组(P<0.01)。结论白藜芦醇对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用。; 冯晓雯高青董海曼彭雷岳庆伟张静暴丽华李贵宝孙晋浩高英茂; 关键词：细胞凋亡白藜芦醇淀粉样Β蛋白 PC12细胞

中脑-皮层多巴胺亚群神经元的提取及帕潘立酮对其电生理学特性的影响: 精神分裂症是临床上发病率高、治愈率低的精神顽疾,中脑-皮层多巴胺(DA)通路的异常则是导致该病的解剖学基础,但其建立的机制不清。本实验将荧光示踪剂立体定位注射至Wistar新生鼠脑内嗅皮层区,逆行标记中脑皮层DA神经元;...; 董海曼高英茂高青张静暴丽华李贵宝彭雷冯晓雯岳庆伟孙晋浩

应用神经逆行示踪及激光显微切割技术精确分离mesostriatal亚群神经元: 2011年; 目的中脑内向纹状体投射的mesostriatal多巴胺能细胞亚群是导致帕金森病的关键神经元,本实验拟寻找该亚群投射神经元的分布及有效分离方法。方法利用立体定位技术将绿色荧光逆行示踪剂注射到新生鼠纹状体内,24h后灌注取脑做冰冻切片;应用免疫荧光组织化学染色方法行酪氨酸羟化酶(TH)染色,采用激光显微切割技术将荧光示踪剂标记且呈TH染色阳性的神经元精确切割并收集。结果荧光示踪的神经元呈TH阳性者即属于mesostriatal亚群神经元,主要分布于中脑黑质,应用激光显微切割技术可精确分离这些逆行示踪且TH染色阳性的神经元。结论应用逆行荧光示踪和激光显微切割技术可精确分离mesostriatal亚群神经元。; 杨淑华高青李春晓王超张静李贵宝李振华孙晋浩; 关键词：多巴胺能神经元

地佐环平诱发原代培养脑皮层神经元凋亡的实验研究: 探讨地佐环平对原代培养胎鼠脑皮层神经元凋亡的影响。地佐环平又名MK-801,是一种非竞争性NMDA受体拮抗剂,广泛应用于精神分裂症动物模型的建立,研究发现高浓度的地佐环平明显损伤体外培养的GABA能神经元,部分GABA能...; 彭雷高英茂高青张静暴丽华李贵宝董海曼冯晓雯岳庆伟孙晋浩

轴突导向因子EphA5沉默后抑制中脑神经上皮细胞投射: 2012年; 目的：探讨轴突导向因子EphA5在中脑神经上皮细胞向纹状体投射中的作用。方法：从孕11d大鼠胚胎取材并培养中脑神经上皮细胞；设计EphA5基因干扰序列，构建RNA干扰载体，采用电转染技术将EphA5干扰载体转入中脑神经上皮细胞，电转后将中脑神经上皮细胞与纹状体共培养，观察转染后中脑神经上皮细胞向纹状体组织的靶向生长情况。结果：中脑神经上皮细胞与纹状体组织块联合培养，神经突起明显朝向组织块生长；EphA5基因干扰载体转染中脑神经上皮细胞可降低EphA5蛋白表达，EphA5基因沉默后神经上皮细胞突起朝向纹状体生长趋势不明显。结论：EphA5基因沉默后中脑神经上皮细胞向纹状体投射减弱，EphA5基因可调控中脑神经上皮细胞向纹状体的靶向投射。; 房芃高青冯晓雯张静暴丽华董海曼彭雷李振华孙晋浩高英茂; 关键词：神经上皮细胞中脑 RNA干扰

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高青