顾范博
- 作品数：9 被引量：22H指数：3
- 供职机构：苏州大学医学部更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅医学科研项目国防基础科研计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学化学工程环境科学与工程更多>>
- Ad-ING4-poly（A）-Promoter-IL-24双基因共表达载体构建及表达
- 2010年
- 目的 构建poly（A）-Promoter介导的携带人肿瘤生长抑制因子4（ING4）和人白细胞介素-24（IL-24）双基因的重组腺病毒共表达载体Ad-ING4-poly（A）-Promoter-IL-24（简称Ad-ING4-IL-24）,研究Ad-ING4-IL-24对HepG-2人肝癌细胞生长的影响.方法 以含有poly（A）和Promoter （hEF1-eIF4g）基因片段的pORF-mbcl-2α质粒为模板,PCR扩增poly（A）-Promoter目的 片段（含Sal Ⅰ,Not Ⅰ）,亚克隆至pAdTrack-CMV载体中以构建pAdTrack-CMV-poly（A）-Promoter空载体,再分别以pcDNA3.0-ING4和pcDNA3.0-IL-24重组质粒为模板,PCR扩增ING4（含BglⅡ,Sal Ⅰ）和IL-24（含XhoⅠ,XbaⅠ）目的 基因片段,并依次插入pAdTrack-CMV-poly（A）-Promoter载体中构建pAdTrackCMV-ING4-Poly（A）-Promoter-IL-24双基因共表达重组转移载体,测序正确后用Pme Ⅰ酶线性化,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1构建同源重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-ING4-poly（A）-Promoter-IL-24,再经Pac Ⅰ酶线性化后用脂质体转染QBI-293A包装细胞,经多轮扩增后收获Ad-ING4-IL-24重组腺病毒子,其效价可达3.5×109PFU/ml,用RT-PCR和Western blot法分别鉴定ING,4和IL-24基因在HepG-2人肝癌细胞中的转录和表达,MTT法和流式细胞仪检测Ad-ING4-IL-24对HepG-2人肝癌细胞生长抑制和诱导细胞凋亡的功能及其增效作用.结果 DNA测序结果显示pAdTrack-CMV转移载体中插入的ING4、poly（A）-Promoter和IL-24序列与GenBank报道的完全一致,RT-PCR和Western blot检测结果显示Ad-ING4-IL-24能成功介导ING4和IL-24基因在HepG-2人肝癌细胞中表达 并能明显抑制HepG-2人肝癌细胞的生长和诱导其凋亡,其中Ad-ING4-IL-24双基因组更优于相应各单基因组.结论 成功构建了poly（A）-Promoter介导的Ad-ING4-IL-24双基因共表达重组腺病毒载体,Ad-ING4-IL-24不仅能明显抑制HepG-2人肝癌细胞生长和诱导其凋亡,而且与Ad-ING4和AdIL-24单基因组相比具有抑癌增效作用.
- 盛伟华谢宇锋缪竞诚顾范博单云波刘铁连井莹莹胡志清杨吉成
- 关键词：生长抑制因子4IL-24肿瘤基因治疗
- 浅论医学特色生物化学及分子生物学实验教学改革与建设
- 论述医学特色生物化学及分子生物学实验教学改革与建设及实验教学改革的必要性,并提出实验教学改革的内容及具体目标。
- 徐岚周迎会顾范博姜智吴士良
- 关键词：生物医学工程分子生物学生物化学技术教学改革
- 文献传递
- 结晶紫-杂多酸分光光度法测定地表水中痕量磷酸盐和硅酸盐被引量：12
- 2005年
- 顾范博吴士良
- 关键词：磷酸盐硅酸盐
- 全龟酶解液抗疲劳的初步研究
- 2007年
- 目的初步探索全龟水解液的耐疲劳作用。方法利用酶降解全龟酸抽提物,采用DABS-C1柱前衍生HPLC法,测定全龟酶水解液的游离氨基酸组份,以Folin-酚试剂法测定全龟抽提液的蛋白质与部分微量元素的含量,并观察了服用了全龟酶解液的小鼠耐疲劳效果。结果全龟酸抽提液含较高的蛋白质和钙,酶降解液含丰富的二十种氨基酸。结论全龟酶解液富含丰富的氨基酸,具有明显的抗疲劳作用。
- 顾范博吴士良
- 关键词：HPLC酶解液氨基酸
- 科研反哺教学在生物化学开放性实验中的实践被引量：6
- 2021年
- 开放性实验是高校实验教学的一种新模式。将科研反哺教学理念引入到生物化学开放性实验中,指导教师可以充分利用学校科研资源,并将前沿性科研成果引入到开放性实验项目中,激发了学生的学习兴趣,拓宽了学生的眼界和知识储备,丰富了学生的实验技能,培养了学生的科研素养和创新能力,为将来学生从事科研工作打下坚实的基础。
- 郭琳顾范博王亚荣
- 关键词：科研反哺教学生物化学实验教学改革教学模式
- 聚乙烯醇存在下结晶紫—杂多酸光度法测定地表水中微量磷酸盐和硅酸盐被引量：3
- 1991年
- <正> 磷酸盐和硅酸盐的测定一般都用分光光度法中的钼黄法和钼蓝法。钼黄法相当稳定,但灵敏度低;钼蓝法的灵敏度虽有所提高,但这些有色配合物的摩尔吸光系数都未超过1×10~4。近年来用结晶紫—杂多酸分光光度法同时测定磷、硅和砷,然而砷和硅的含量只能用减差法求出,误差较大。由于地表水中含磷。
- 李惠珍李桂英顾范博
- 关键词：地表水磷酸盐硅酸盐
- 人发中痕量硅的分光光度测定法
- 1997年
- 顾范博李惠珍瞿蕴玉
- 关键词：头发分光光度法
- Ad-ING4-IRES-IL-24双基因共表达载体的构建及表达被引量：1
- 2011年
- 目的:构建IRES介导的携带人肿瘤生长抑制因子4(ING4)和人白介素24(IL-24)双基因的重组腺病毒共表达载体(简称为Ad-ING4-IRES-IL-24),研究其表达产物对A549肺癌细胞生长的影响。方法:将PCR扩增的IRES、ING4和IL-24基因片段分别插入pAdTrack-CMV载体中构建pAdTrack-CMV-ING4-IRES-IL-24双基因共表达重组转移载体。按腺病毒载体常规构建方法获得同源重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-ING4-IRES-IL-24,并在QBI-293A包装细胞中进行包装和病毒扩增。将扩增后的Ad-ING4-IRES-IL-24腺病毒感染A549肺癌细胞,并用RT-PCR和Western blot法鉴定ING4和IL-24基因在QBI-293A细胞或A549肺癌细胞中的表达,MTT法和流式细胞仪检测其对A549肺癌细胞生长抑制和诱导凋亡的功能和抑癌增效作用。结果:DNA测序结果显示pAdTrack-CMV转移载体中插入的ING4、IRES和IL-24片段的序列与GenBank报道的完全一致,Ad-ING4-IRES-IL-24能成功介导ING4和IL-24基因在QBI-293A和A549细胞中表达,不仅能明显抑制A549肺癌细胞生长和诱导其凋亡(72小时生长抑制率为62.82%±0.65%,凋亡率为19.40%±1.29%),而且与Ad-ING4-IRES(72小时生长抑制率为42.31%±0.43%,凋亡率为13.30%±1.85%)和Ad-IRES-IL-24单基因组(72小时生长抑制率为47.44%±0.39%,凋亡率为12.40%±1.05%)相比具有显著性差异(P<0.05)。结论:成功构建了IRES介导的Ad-ING4-IL-24双基因共表达重组腺病毒载体,Ad-ING4-IL-24不仅能明显抑制A549肺癌细胞生长和诱导其凋亡,而且与Ad-ING4和AdIL-24单基因组相比具有抑癌增效作用。
- 盛伟华谢宇锋缪竞诚顾范博单云波朱晔涵陈华昕杜贤荣杨吉成
- 关键词：腺病毒ING4IL-24肺癌肿瘤基因治疗
- 用Lowry's法检测医用天然橡胶手套中水溶性蛋白质的含量被引量：3
- 2005年
- 医用天然橡胶手套中的水溶性蛋白质被抽提到缓冲溶液中,然后将其浓缩,同时也将溶于水的杂质分离,这些杂质会影响测定结果,将抽提到的蛋白质再一次溶解,使用蛋白质标样,借助Lowry's实验,通过比色法确定水溶性蛋白质的含量.
- 顾范博彭淼张同成吴士良
- 关键词：天然橡胶蛋白质
