韩晓英
- 作品数：34 被引量：165H指数：9
- 供职机构：四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心更多>>
- 发文基金：四川省重点科学建设项目四川省杰出青年学科带头人基金四川省教育厅青年基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 聚合酶链反应(PCR)检测鸭瘟病毒方法的建立和应用被引量：29
- 2005年
- 宋涌程安春汪铭书刘菲廖永洪袁桂萍韩晓英徐超陈孝跃
- 关键词：琼脂凝胶血清中和试验DPV
- 鸭病毒性肠炎病毒强毒株的形态发生学与超微病理学研究被引量：26
- 2004年
- 应用透射电镜和超薄切片技术,研究鸭病毒性肠炎病毒(duckenteritisvirus,DEV)CH强毒株人工感染成年鸭后,病毒在宿主细胞内的形态发生及各组织器官的超微结构变化。结果表明,感染后不同时间剖杀及发病后死亡鸭的肝、肠、脾、胸腺、法氏囊等组织器官中,均观察到典型的疱疹病毒粒子。病毒主要的靶细胞为淋巴细胞、网状内皮细胞、成纤维细胞、巨噬细胞、血管内皮细胞、肠道上皮细胞、肠道平滑肌细胞和肝细胞等。DEV的核衣壳有空心型、致密核心型、双环型和内壁附有颗粒型四种形态,存在胞核和胞浆两种装配方式。病毒核衣壳可在核内获得皮层,通过核内膜获得囊膜成为成熟病毒;也可通过内外核膜进入胞浆,在其中获得皮层,然后在各种质膜上获得囊膜,最后成熟病毒释放到细胞外。伴随着病毒的复制、装配和成熟,细胞中出现多种核内和胞浆包涵体、核内致密病毒核酸颗粒、微管和中空短管以及胞浆内膜包裹的电子致密小体、双层管等病毒相关结构。超微研究表明,组织细胞有坏死和凋亡两种变化。坏死细胞肿胀甚至破裂,线粒体肿胀空泡化,粗面内质网扩张,核糖体脱落,有的细胞器甚至完全崩解,染色质或固缩或溶解。凋亡细胞则染色质聚集,胞浆凝聚深染,细胞膜上有大量空泡,并有凋亡小体形成。细胞坏死与凋亡往往同时存在,疾病发?
- 袁桂萍程安春汪铭书周毅刘菲韩晓英廖永洪徐超郭宇飞周伟光文明贾仁勇陈孝跃
- 关键词：鸭病毒囊膜强毒株核衣壳法氏囊
- 一种新发现的鸭病毒性肿头出血症传染病的研究
- 1998-2003年四川省、重庆市、贵州省和云南省等养鸭地区发生一种以鸭头肿胀、眼结膜充血出血、全身皮肤广泛出血、肝脏肿大呈土黄色并伴有出血斑点、体温43℃以上、排草绿色稀粪等为特征的急性传染病,该病的发生迅速、传播快,...
- 程安春汪铭书陈孝跃周毅刘菲宋涌郭宇飞韩晓英袁桂萍徐超廖永洪方鹏飞刘兆宇
- 文献传递
- 一种新发现的鸭病毒性肿头出血症的研究被引量：26
- 2003年
- 对 1998年以来在四川省、重庆市、贵州省和云南省等养鸭省份发生的一种以鸭头肿胀、眼结膜充血出血、全身皮肤广泛性出血、肝肿胀呈土黄色并伴有出血斑点、体温 4 3℃以上、排草绿色稀粪等为特征的急性传染病进行了流行病学调查、临床症状和病理变化观察、病理组织学检查、病原分离鉴定、人工感染试验、电镜观察、防治试验 ,确诊为一种新病 ,暂时将其命名为“鸭病毒性肿头出血症 (Duckviralswollenheadhaemorrhagicdisease)”。用鸭胚原代成纤维细胞自不同地区病死鸭分离到 12株抗原性一致的病毒 ,病毒粒子呈球形或椭圆形 ,直径约 80nm ,无囊膜 ,核酸为RNA ,不凝集鸡、鸭、鹅、鸽、黄牛、水牛及猪的红细胞 ,在 pH 4 .0～ 8.0稳定 ,对氯仿有抵抗力 ,与鸭瘟病毒和鸭病毒性肝炎病毒无抗原相关性 ,琼脂扩散试验证实与番鸭细小病毒、禽流感病毒、鸡传染性腔上囊病病毒、禽病毒性关节炎病毒和鹅副黏病毒无抗原相关性。分离毒经口服、皮下注射、肌肉注射和滴鼻途径感染鸭均能成功复制出与临床病例一致的症状和病变 ,而不能感染SPF鸡(鸡胚 )和鹅。制备的超免疫血清和康复鸭血清具有良好紧急预防和治疗效果 ,利用病死鸭内脏制备的组织灭活疫苗和分离毒制备的油剂灭活疫苗具有良好预防效果。根据分离病毒特性建议?
- 程安春汪铭书陈孝跃周毅刘菲宋涌郭宇飞韩晓英袁桂萍徐超廖永洪方鹏飞刘兆宇
- 关键词：病毒性肿头出血症流行病学症状病理变化人工感染试验
- PCR在鸭瘟临床诊断和免疫及致病机理研究中的初步应用被引量：68
- 2004年
- 根据GenBank文献,应用Oligo6 0分析软件合成了用于扩增鸭瘟病毒(duckplaguevirus,DPV)EcoRⅠ765bp片段的1对引物,上游引物(P1)位于EcoRⅠ片段的246～266nt,下游引物(P2)位于EcoRⅠ片段的727～744nt,以DPVCHa株DNA为模板,筛选PCR最佳反应条件,建立了检测DPV的PCR方法。应用该方法对强毒株DPV鸭胚培养物和弱毒株的鸡胚培养物进行扩增,均可获得498bp的DNA片段。而对正常鸭(鸡)胚和鸡马立克氏病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸭病毒性肝炎病毒、多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、鸭副伤寒沙门氏菌和鸭疫里默氏杆菌培养物进行检测,结果均呈阳性。扩增产物测序结果与文献报道一致,证明了PCR方法的特异性。对DPVCHa株鸡胚毒提取物DNA进行检测,其最低检出量为10fg。用病毒分离、Dot-ELISA和PCR三种方法分别检测1990～2002年期间送检的临床样品,对所获得的结果进行χ2分析,证明PCR检出率明显高于前2种方法。CHa株免疫雏鸭后对血液、心、肝、脾、肺、肾、十二指肠、直肠、法氏囊、胸腺、胰腺、延脑、大脑、小脑、舌头、肌肉、骨髓、食道共18种组织和粪便进行PCR检测,结果表明:①皮下接种4h后,心、肝、脾、肾、法氏囊、胸腺、胰腺、延脑、大脑和小脑为阳性,8h后18种组织和粪便均为阳性;②口服接种4h后舌头和食道为阳性,8h后,
- 程安春汪铭书刘菲宋涌袁桂萍韩晓英徐超廖永洪周伟光文明贾仁勇陈孝跃
- 关键词：胸腺小脑DPV法氏囊鸭瘟病毒
- 检测鸭瘟病毒PCR方法的建立及其在临床诊断和免疫与致病机理研究中的初步应用
- 根据Genbank文献,用计算机分析并合成了1对用于扩增鸭瘟病毒(Duck PlagueVirus,DPV)ECOR I基因765bp片段的引物,上游引物(P1)位于ECOR I基因的246-266位,下游引物(P2)位...
- 程安春汪铭书刘菲宋涌袁桂萍韩晓英徐超廖永洪
- 关键词：PCR
- 文献传递
- 检测鸭瘟病毒PCR方法的建立及其在临床诊断和免疫与致病机理研究中的初步应用
- 鸭瘟病毒(Duck Plague virus,DPV)是引起的鸭、鹅等水禽的急性败血性传染病的一种疱疹病毒,临床以体温升高,两腿麻痹、下痢、流泪和部分病鸭头颈肿大为特征。该病为一种广泛嗜全身性感染的传染病,其病理特征是血...
- 程安春汪铭书刘菲宋涌袁桂萍韩晓英徐超廖永洪
- 文献传递
- 生物素标记寡核苷酸探针原位检测石蜡切片鸭瘟病毒核酸被引量：2
- 2009年
- 据GenBank中有关鸭瘟病毒(DPV)的1个765 bp的EcoRⅠ片段序列,用Oligo软件设计长度为37 bp的寡核苷酸并用生物素标记制备探针,经blast分析和斑点杂交检测探针的特异性后,建立从石蜡切片中检测出DPV核酸的原位杂交方法并对人工感染死亡鸭的各组织器官进行检测,结果显示:(1)寡核苷酸探针能特异性检测到DPV强毒CHv株DNA,对鸭病毒性肝炎病毒QL79株RNA、血清1型鸭疫里默氏杆菌DNA、鸭源多杀性巴氏杆菌DNA、鸭沙门菌DNA和大肠杆菌DNA的检测结果为阴性。(2)以寡核苷酸探针建立的从石蜡切片中检测出DPV核酸的原位杂交方法的最佳反应条件为:组织切片先用0.2 mol/L HCl 37℃处理20 min,然后用100 mg/L的蛋白酶K 37℃消化15 min左右;杂交时探针工作浓度为350μg/L;Avidin-AP的工作稀释度为1∶100。(3)以所建立的原位杂交法检测DPV-CHv强毒人工感染死亡鸭的各组织器官,结果肝脏、肠道、法氏囊、脾脏、食道、肺脏和肾脏呈阳性反应,DPV的DNA分布于特定细胞的细胞浆和细胞核。结果表明,原位杂交检测石蜡切片中DPV的方法具有直观、特异性强的优点,是对DPV进行检测和病原定位的良好方法,可用于DPV的侵染过程和致病机理研究及回顾性诊断检测。
- 程安春廖永洪汪铭书袁桂萍徐超韩晓英郭宇飞
- 关键词：鸭瘟强毒
- 鸭病毒性肠炎病毒强毒在人工感染鸭体内形态结构和发生学的电镜观察
- 为研究鸭病毒性肠炎病毒(Duck Enteritis Virus,DEV)CH强毒株在感染鸭体内的分布和形态学发生规律,我们应用透射电镜和超薄切片技术对人工感染DEV的成年鸭各组织器官进行观察。结果表明:感染后12h在脾...
- 袁桂萍程安春汪铭书周毅刘菲郭宇飞韩晓英廖永洪徐超周伟光文明贾仁勇陈孝跃
- 文献传递
- 鸭病毒性肠炎病毒强毒在人工感染鸭体内形态结构和发生学的电镜观察被引量：17
- 2005年
- 为研究鸭病毒性肠炎病毒(DEV)CH强毒株在感染鸭体内的分布和形态学发生规律,应用透射电镜和超薄切片技术对人工感染DEV的成年鸭各组织器官进行观察。结果表明:感染后12 h在脾脏和法氏囊首先观察到少量的DEV出现,24 h后在脾、胸腺和法氏囊以及死亡鸭的肝、肠和胰中均观察到具有典型的疱疹病毒粒子及其核衣壳形态的DEV。DEV病毒核衣壳有空心型、致密核心型、双环型和内壁附有颗粒型4 种形态,存在胞核和胞浆两种装配方式。病毒成熟有两种方式:一为细胞核内核衣壳在核内获得皮层,通过核内膜获得囊膜成为成熟病毒;二为核内核衣壳通过内外核膜进入胞浆,核内和胞浆内的核衣壳在细胞浆中获得皮层,然后在各种质膜上获得囊膜,最后成熟病毒通过细胞破裂或其他方式释放到细胞外。伴随着病毒的复制、装配和成熟,细胞中出现多种核内和胞浆包涵体、核内致密颗粒、核内微管和中空短管、胞浆电子致密小体等结构。
- 袁桂萍程安春汪铭书周毅刘菲韩晓英郭宇飞廖永洪徐超文明贾仁勇周伟光陈孝跃
- 关键词：电镜观察发生学核衣壳法氏囊强毒株成年鸭
