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肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65与低密度脂蛋白受体相关蛋白关联蛋白的结合被引量：1: 2005年; 目的:寻找与肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65(cancerandembryoexpressionprotein65,CEP65)相互结合的蛋白分子,为研究CEP65在肿瘤发生中的作用机制提供线索。方法: 以CEP65为诱饵蛋白,通过酵母双杂交方法, 筛选人胚胎组织cDNA表达文库。将获得的阳性克隆cDNA片段分别克隆到原核和哺乳细胞表达质粒,通过GSTpull down和免疫共沉淀对相互作用蛋白作进一步验证。结果: 筛选到能与CEP65相互结合的低密度脂蛋白受体相关蛋白产关联蛋白(lowdensitylipoproteinreceptor relatedprotein associatedprotein1,RAP)。将分别在原核和哺乳细胞中表达的RAP与CEP65进行GSTpull down实验,结果显示,原核表达的GST RAP可以与His CEP65相互结合,而在哺乳细胞共表达的GST CEP65和Myc RAP也能相互结合。结论:RAP可以和CEP65相结合,CEP65有可能通过与RAP相互作用,在肿瘤的浸润、转移及增生中发挥其功能。; 靳更林张建芝苏荣刘晓颖吴健孟麟寿成超; 关键词：低密度脂蛋白受体相关蛋白胚胎组织 CDNA表达文库哺乳细胞 CDNA片段诱饵蛋白

人Norpeg蛋白的原核表达及其抗体的制备: 2005年; 目的原核表达NorpegC端编码区并制备小鼠抗Norpeg多克隆抗体。方法将Norpeg基因C端编码区克隆进原核表达载体pGEX4T-1中,转化E.coli,以IPTG诱导重组蛋白的表达。以纯化的重组目的蛋白作为免疫原免疫小鼠,制备相应的多克隆抗体。结果成功构建原核表达载体,表达了重组蛋白并制备了小鼠抗Norpeg多克隆抗体。结论人NorpegC端编码区能够在体外大肠杆菌中获得融合表达,制备的小鼠抗Nor-peg多克隆抗体特异性较高,为下一步深入Norpeg功能研究提供了重要基础。; 孙玉宁靳更林李燕寿成超; 关键词：多克隆抗体

抗胃癌单链抗体免疫毒素重组质粒的构建及表达被引量：1: 2001年; 目的　构建能表达抗胃癌单链抗体免疫毒素的重组质粒并进行表达。方法　应用基因工程方法 ,将抗胃癌的单链抗体基因与绿脓杆菌外毒素基因进行重组 ,得到的重组质粒转化大肠杆菌BL - 2 1,鉴定后的阳性克隆经IPTG诱导表达。结果　重组质粒经酶切鉴定正确 ,IPTG诱导后可看到明显的表达带 ,分子大小与预计值相符。结论　得到了能表达抗胃癌单链抗体免疫毒素的重组质粒。; 韩梅靳更林寿成超戴寿芝; 关键词：免疫毒素类胃癌重组质粒

猪鼻支原体P37蛋白相互作用蛋白的筛选与鉴定被引量：4: 2004年; 既往工作表明 ,胃癌组织中有较高的猪鼻支原体感染率 ,猪鼻支原体的主要膜蛋白P37能够诱导外周血单核细胞释放肿瘤坏死因子 (TNF) .为了深入研究P37的作用机制 ,利用酵母双杂交系统筛选与P37蛋白相互作用的蛋白质分子 .首先 ,将编码P37全长的cDNA克隆到 pGBKT7载体中 ,构建“诱饵”表达载体 pGBKT7 p37,以此筛选人胎盘组织cDNA表达文库 .在 2 6× 10 6个克隆中 ,筛选到一株能与P37相互作用的阳性克隆 ,序列测定表明 ,该阳性克隆编码人视网膜色素上皮细胞蛋白 (Norpeg蛋白 ) .在此基础上经GST PullDown实验 ,进一步证实Norpeg蛋白确能与P37相互作用 ,为进一步研究P37对细胞的作用机制奠定了基础 .; 孙玉宁靳更林张建芝吴健寿成超; 关键词：酵母双杂交

免疫毒素的研究进展: 1999年; 肿瘤的导向治疗开创了肿瘤治疗的新篇章.在众多的导向治疗中免疫毒素发展较为迅速,尤其是利用现代生物技术,分别将起导向作用的载体和杀伤效应的毒素基因进行一系列的改建,然后重组而获得的免疫毒素有了长足的发展,许多免疫毒素已经进入临床Ⅰ,Ⅱ期试验,显示出良好的应用前景.; 靳更林; 关键词：肿瘤免疫毒素

肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白CEP65相互作用蛋白的筛选与鉴定: 2004年; CEP6 5蛋白 (cancerandembryoexpressionprotein 6 5 )为肿瘤单克隆抗体 3H11所识别的抗原分子 ,RT PCR及RNA印迹检测表明 ,CEP6 5蛋白表达于肿瘤及胚胎组织 .为了研究CEP6 5在肿瘤发生中的作用机制 ,以CEP6 5为诱饵蛋白 ,通过酵母双杂交体系筛选人胚胎组织cDNA表达文库 .从 5 2× 10 6个克隆中筛选得到 14个阳性克隆 ,并在酵母体系中通过不同方法得到验证 .在此基础上 ,选取在双杂交中作用明显的 5 1号克隆 ,与CEP6 5作GSTpull down实验 ,结果证明 ,CEP6 5与 5 1号阳性克隆蛋白确能相互作用 .生物信息学分析发现 ,CEP6 5与 5 1号阳性克隆蛋白相互作用。; 靳更林孙玉宁张建芝马泓孟麟吴健寿成超; 关键词：单克隆抗体酵母双杂交体系相互作用

染色体上引物原位标记（PRINS）技术及其应用的新发展被引量：3: 1996年; 本文详细介绍了染色体上引物原位标记（ＰＲＩＮＳ）技术的新发展．其中包括随机引物原位标记技术、重复ＰＲＩＮＳ技术、多色ＰＲＩＮＳ技术和快速ＰＲＩＮＳ技术．并对ＰＲＩＮＳ技术在研究杂色体结构、畸变、检测核酸顺序和基因定位等方面的应用作了介绍．; 靳更林李奎彭中镇; 关键词：染色体引物原位标记基因定位

猪二价体引物原位标记与基因定位研究: 该研究首次建立了猪二价染色体(二价体)引物原位标记、二价体重复PRINS及二价体多色PRINS技术,并对其用于猪基因组研究的可行性进行了讨论,为猪基因组研究开辟了一条新的途径.; 靳更林; 关键词：二价体基因定位微卫星DNA

肿瘤及胚胎特异表达蛋白CEP65的真核细胞表达及其细胞定位: 2005年; 背景与目的:既往研究表明,肿瘤相关抗原CEP65(cancer and em bryoexpression protein65)仅表达于肿瘤和胚胎组织,本研究拟揭示CEP65在细胞中的分布,为进一步阐明CEP65在肿瘤发生、发展中的功能奠定基础。方法:构建肿瘤及胚胎特异表达基因Cep65与GST融合表达的真核表达质粒,通过DEAE-Dextran方法转染COS7细胞,分离细胞的胞浆蛋白和核蛋白,W estern blot检测CEP65在细胞中的分布情况。构建Cep65与红色荧光蛋白基因融合表达的真核表达质粒,转染细胞后,利用荧光显微镜观察CEP65在细胞中的分布。结果:通过细胞组分生化分析分离细胞胞浆蛋白和核蛋白,W estern blot检测结果表明,表达的CEP65分布在细胞浆和细胞核中。荧光蛋白定位进一步分析发现,转染单纯荧光蛋白表达质粒的细胞,其荧光在细胞内呈弥散性分布,而转染CEP65与荧光蛋白基因融合表达质粒的细胞,在细胞质及细胞核内形成聚集的荧光颗粒。结论:CEP65可在COS7细胞中高效表达,其表达产物存在于细胞质和细胞核内;CEP65可能是一种核相关蛋白。; 靳更林郭建辉马泓孟麟; 关键词：胚胎肿瘤真核表达荧光蛋白

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靳更林