霍霞
- 作品数:212 被引量:757H指数:14
- 供职机构:汕头大学医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学环境科学与工程理学更多>>
- 人膀胱癌细胞F-肌动蛋白微丝的共聚焦激光显微镜观察
- <正> 细胞骨架结构中的微丝成分主要由肌动蛋白组成,参与维持细胞形态、细胞间紧密连接、细胞外基质附着等功能,在肿瘤细胞转化过程中发现,肌动蛋白网络骨架发生了变化,最显著的变化是F-actin骨架的重组。本文从形态学角度探...
- 许险峰霍霞
- 文献传递
- 共聚焦图像数据的三维重建和显示被引量:2
- 2000年
- 本文介绍利用激光扫描共聚焦显微镜获得的共聚焦图像数据的三维重建和显示方法 ,并以 ACAS Ultima3 1 2激光扫描共聚焦显微镜系统为例 ,分析了 SPF算法。
- 陈耀文霍霞林珏龙徐虹
- 关键词:共聚焦显微镜三维重建图像显示
- 抑制性消减杂交法筛选植入人发角蛋白与单纯脊髓损伤大鼠基因表达的差异被引量:1
- 2006年
- 目的:采用抑制性消减杂交筛选植入人发角蛋白大鼠损伤脊髓基因性差异表达。方法:实验于2004-11在汕头大学中心实验室进行。分别从植入人发角蛋白损伤组与单一损伤对照组4thw组织中提取mRNA,反转录成双链cDNA,经RsaI酶切、接头连接、两次消减杂交和两次抑制性聚合酶链扩增,而后将消减cDNA产物进行T/A克隆和测序分析。结果:所获植入人发角蛋白脊髓损伤组织差异表达基因的消减cDNA产物散布在280~800bp范围。经蓝白筛选和酶切鉴定,共得到232个阳性克隆。对其中20个做测序分析获得了氨基酸转运蛋白系统A2(Ata2)、细胞色素氧化酶Ⅲ(COXⅢ)、抗过氧化物蛋白5(Prd5)、Tap1蛋白和半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cst3)等5个表达蛋白。结论:prd5、Ata2和COXⅢ分别通过参与脊髓损伤后抗氧化损伤过程,起到抑制自由基、兴奋性氨基酸的产生,减轻Ca离子紊乱的程度,降低了继发性损害对脊髓组织的二次损伤程度;而Tap1蛋白和Cst3则参与人发角蛋白的降解过程。
- 徐锡金林新华霍霞朴仲贤朴英杰
- 关键词:脊髓损伤角蛋白基因人发角蛋白基因表达
- 人发角蛋白植入大鼠损伤脊髓部位的电镜观察被引量:5
- 2003年
- 目的:脊髓外伤后的继发性病理改变,是影响脊髓神经组织再生修复的重要因素。采用人发角蛋白(humanhairkeratin,HHK)植入脊髓损伤(spinalcordinjury,SCI)部位,以期达到减轻继发性损害,诱导和促进损伤脊髓组织的再生。方法:采用改制Ⅱ型纽约大学(NewYorkUniversity,NYU)装置,在建立大鼠脊髓损伤模型基础上,将经过特殊处理后能在体内降解的HHK植入大鼠损伤脊髓部位,对植入后1,4,12,26周的损伤脊髓组织进行电镜观察。结果:第1周为急性炎症时期,HHK周围结构紊乱,集聚大量的炎症细胞,灰质出现坏死;第4周时,炎症细胞减少,巨噬细胞吞噬髓鞘,胶质细胞增生;第12周时,多核巨噬细胞出现在HHK周围,HHK开始崩解,崩解物被多核巨细胞所吞噬;第26周时,神经轴突沿HHK间隙排列生长,灰质中神经元数量增加,HHK周边细胞有序生长。结论:植入的人发角蛋白具有诱导神经胶质细胞增生,阻止脊髓空洞的形成,从而减轻了脊髓损伤组织的继发性伤害的程度,改善了神经元再生的外环境,并可以桥接诱导神经轴突定向再生的作用。
- 徐锡金朴英杰霍霞
- 关键词:脊髓损伤电镜观察
- 血管平滑肌细胞快速牵张损伤后细胞缝隙连接功能的变化
- 2006年
- 目的:探讨牵张损伤时血管平滑肌细胞(A7r5)缝隙连接功能的改变及其影响因素。方法:采用细胞牵张损伤装置建立A7r5细胞损伤模型,通过细胞培养、荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜荧光漂白后恢复技术检测对照组,轻度、中度和重度牵张损伤组细胞活性(Hoechst 33342和propidium iodide染色)、细胞内钙(Fluo_4/AM染色)、细胞内氧自由基(H2D-CFDA染色)和细胞间通讯功能(5_CFDA染色)的变化。结果:随着细胞牵张损伤的加重,细胞活性降低、细胞内钙及细胞内氧自由基升高、细胞间通讯功能下调。含钙缓冲液和细胞间通道阻断剂甘珀酸可使细胞通讯功能进一步下调,而Ca2+鳌合剂———乙二醇四乙酸、氧自由基清除剂———超氧化物歧化酶可使细胞通讯功能上调。结论:牵张损伤可通过细胞内钙超载和活性氧的增多来降低平滑肌细胞缝隙连接的细胞通讯功能。
- 徐锡金霍霞李燕Margaret A.ParsleyHelen L.HellmichDonald S.ProughDouglas S.DeWitt
- 关键词:细胞损伤
- CYP3A4基因原核表达质粒构建与诱导表达被引量:2
- 2007年
- 以质粒pCWNF14为模板,采用PCR技术扩增出CYP3A4基因,并将其接入pET-22b(+)、pET-28b(+)和pET-32a(+)载体中,经PCR测序鉴定后,转化Rosetta(DE3)2pLysS细菌,并用IPTG诱导表达.采用考马斯亮蓝染色的方法检测重组蛋白表达,3个表达重组质粒中,只有pET-32a(+)-CYP3A4可以表达目的蛋白;在低浓度IPTG(50μmol/L)诱导6h,所表达的CYP3A4蛋白约占细菌总蛋白的40%,且该蛋白不溶于8mol/L的尿素,而溶于去污剂10mmol/L3-((3-Cholamidopropyl)dimethylammonio propanesulfonic acid(CHAPS))和0.3%lauroyl sarcosine(SKL).成功地使CYP3A4基因在原核系统中高效表达.
- 张宝霍霞齐宗利徐锡金李燕林懿彭琳
- 关键词:CYP3A4
- 放线菌酮诱发的凋亡淋巴细胞线粒体观察被引量:6
- 1998年
- 本实验用放线菌酮处理大鼠建造细胞调亡模型。用透射电镜观察大鼠胸腺、脾脏和肠系膜淋巴结淋巴细胞的超微结构。放线菌酮处理2小时可致大鼠淋巴细胞凋亡。在凋亡早期可见淋巴细胞的线粒体、内质网、溶酶体等细胞器增多,线粒体数量变多和结构异常是凋亡淋巴细胞早期形态学特征之一。
- 霍霞朴英杰黄行许黄行许
- 关键词:放线菌酮细胞凋亡淋巴细胞线粒体
- 鸡胚材料体外培养的方法
- 1998年
- 可供培养的细胞种类极其广泛,由于胚体与成体所处生存环境的不同,开展胚胎组织细胞的培养有着广泛的意义。本文结合自己在胚胎组织细胞培养方面的实践经验,简述鸡胚整胚、器官、组织和细胞体外培养的方法及其应用。
- 霍霞朴英杰
- 关键词:鸡胚体外培养细胞培养
- 肝癌细胞纤维肌动蛋白的共聚焦激光扫描显微镜光学切片观察被引量:7
- 2001年
- 目的 :建立培养细胞共聚焦激光扫描显微镜光学切片的方法 ,探讨肝癌细胞纤维肌动蛋白 (F_actin)的空间结构。方法 :采用共聚焦激光扫描显微镜光学切片技术结合异硫酸氢荧光素_鬼笔环肽 (FITC_phalloidin)标记纤维肌动蛋白和碘化丙啶(PI)标记细胞核的荧光探针双重标记技术对肝癌细胞纤维肌动蛋白进行形态学观察和图像分析。结果 :肝癌细胞内纤维肌动蛋白微丝形成束状纤维 ,粗壮而密集 ,平行排列或纵横交错成网状贯穿整个细胞和细胞突起。结论 :① 共聚焦激光扫描显微镜的光学切片技术结合FITC -phalloidin和PI荧光探针双重标记技术是观察和分析细胞骨架系统三维立体结构的良好方法 ;② 肝癌细胞内纤维肌动蛋白微丝粗壮。
- 霍霞徐锡金陈耀文林珏龙许险峰
- 关键词:肝癌细胞株共聚焦激光扫描显微镜
- 抑癌基因PTEN在鼻咽癌细胞株中表达的研究被引量:1
- 2004年
- 目的:检测人鼻咽癌细胞株中PTEN表达情况,探讨鼻咽癌细胞中PTEN表达与细胞分化程度的关系。方法:进行细胞株的培养,采用流式细胞仪和共聚焦显微镜检测方法对细胞中PTEN的表达进行定位定量检测。结果:两种细胞株均有PTEN的表达,表达强度和分布与分化程度有关,分化越好,表达越高,流式细胞仪检测PTEN在细胞株中表达强弱顺序为CNE1>CNE2,阳性表达细胞数CNE1>CNE2差异有统计学意义(P<0.01);激光共聚焦扫描显微镜检测PTEN主要表达在细胞核和细胞浆,分布与分化程度有关,细胞核表达强度CNE1
- 杨海伟霍霞朴仲贤徐锡金林珏龙
- 关键词:抑癌基因PTEN流式细胞仪激光共聚焦扫描显微镜