陈玉
- 作品数：6 被引量：9H指数：1
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
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- 雷帕霉素靶蛋白RNA干扰联合雷帕霉素对人食管癌移植瘤生长和移植瘤组织中雷帕霉素蛋白基因表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨RNA干扰技术联合雷帕霉素对人食管癌裸鼠移植瘤生长和移植瘤组织中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因表达的影响。方法:①构建裸鼠食管癌EC1细胞移植瘤模型,待肿瘤长出1周后,将荷瘤小鼠随机分为雷帕霉素治疗组[(腹腔注射雷帕霉素,50μg/(kg.次)]、mTOR小分子干扰RNA(siRNA)治疗组[腹腔注射mTORsiRNA,3μg/次]和联合治疗组(先腹腔注射mTORsiRNA,第2天腹腔注射雷帕霉素),另设空白对照组(腹腔注射PBS代替药物)和顺铂治疗组[腹腔注射常规化疗药顺铂,1mg/(kg.次)];每组各5只。连续治疗2周,治疗结束取瘤组织,分析治疗前后移植瘤体积的变化。②采用免疫组化及原位杂交技术观察各组瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达。结果:①单用雷帕霉素(F=185.00,P<0.001)或mTORsiRNA(F=199.01,P<0.001)均能降低裸鼠移植瘤体积;雷帕霉素和mTORsiRNA有交互作用(F=30.30,P<0.001),2者联合应用后,裸鼠移植瘤体积有更大幅度的下降。顺铂治疗后,裸鼠移植瘤体积与联合治疗的效果差异无统计学意义(t=0.426,P=0.682)。②单用雷帕霉素(F=395.76,F=550.04,P均<0.001)或mTORsiRNA(F=367.58,F=573.39,P均<0.001)均能降低裸鼠移植瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达;雷帕霉素和mTORsiRNA有交互作用(F=11.68,P=0.004;F=10.23,P=0.006),2者联合应用后,裸鼠移植瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达有更大幅度的下降。顺铂治疗后,裸鼠移植瘤组织中mTOR蛋白(7.15±0.56)及mRNA(6.88±0.59)的表达与联合治疗的效果差异无统计学意义(t=0.622,P=0.551;t=0.572,P=0.583)。结论:应用RNA干扰技术沉默mTOR基因及应用雷帕霉素治疗均可有效抑制肿瘤的生长,下调裸鼠食管癌移植瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达,且2者联合效果最佳。
- 陈玉亚国伟张威陈奎生
- 关键词：雷帕霉素RNA干扰
- RNA干扰对EC9706细胞mTOR表达及细胞生长与凋亡的影响被引量：8
- 2010年
- 目的:探讨RNA干扰技术对人食管癌EC9706细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达及细胞生长与凋亡的影响。方法:设计合成mTORsiRNA,采用低、中、高浓度(50、100与150nmol/L)的mTORsiRNA分别转染EC9706细胞24、48与72h,同时设无义对照组(转染无义对照siRNA)、空白对照组(转染空脂质体)及正常对照组(不转染)。采用免疫细胞化学与原位杂交法分别检测各组EC9706细胞中mTOR蛋白与mRNA的表达;应用MTT法检测细胞增殖,计算细胞生长抑制率;应用TUNEL法检测转染24h时细胞凋亡,计算凋亡指数(AI)。结果:转染24、48与72h,6组细胞mTOR蛋白和mRNA的表达差异均有统计学意义(mTOR蛋白:F=24.14,45.78,59.19,P均<0.001;mTORmRNA:F=41.42,69.74,43.71,P均<0.001),细胞生长抑制率差异亦有统计学意义(F=143.85,172.98,155.01,P均<0.001);低、中、高浓度组转染不同时间点间比较,mTOR蛋白(F=42.23,29.46,50.22,P均<0.001)、mTORmRNA(F=6.48,8.50,4.80,P均<0.05)及细胞生长抑制率(F=78.77,76.14,52.28,P均<0.001)差异均有统计学意义。mTORsiRNA转染组EC9706细胞mTOR蛋白与mRNA的表达均低于各对照组,且mTOR蛋白及mRNA的表达随mTORsiRNA浓度的增加及转染时间的延长而减弱(P<0.05)。不同浓度mTORsiRNA转染组EC9706细胞生长抑制率均高于各对照组,且细胞生长抑制率随mTORsiRNA浓度的增加和转染时间的延长而升高(P<0.05)。转染24h,6组细胞AI相比,差异有统计学意义(F=442.96,P<0.001),mTORsiRNA转染组AI均高于各对照组,且高浓度转染组AI高(P<0.05)。结论:mTORsiRNA可有效抑制EC9706细胞mTOR蛋白与mRNA的表达,且能抑制EC9706细胞的增殖并促进其凋亡。
- 张威陈玉亚国伟陈奎生
- 关键词：食管肿瘤EC9706细胞MTORRNA干扰凋亡
- 雷帕霉素及mTOR siRNA对食管癌EC9706细胞mTOR基因表达影响的研究
- 目的：探讨雷帕霉素及mTOR siRNA对食管癌食管癌EC9706细胞mTOR基因的抑作用及对细胞生长、凋亡等的影响。方法：用雷帕霉素、mTORsiRNA及顺铂分别或联合处理食管鳞癌EC9706细胞，应用免疫细胞化学检测...
- 张威亚国伟陈玉陈奎生
- 关键词：雷帕霉素食管癌EC9706细胞
- PTEN反义寡核苷酸对EC9706细胞增殖、凋亡和PTEN、mTOR表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨PTEN反义寡核苷酸(ASODN)对食管癌EC9706细胞增殖、凋亡和PTEN、mTOR表达的影响。方法:利用阳离子脂质体介导PTEN的ASODN和无义寡核苷酸(N-ODN)转染食管癌EC9706细胞,终浓度为3、6和12μmol/L的ASODN为实验组,终浓度12μmol/L的N-ODN为N-ODN对照组,不进行转染的为空白对照组。运用MTT法、TUNEL检测空白对照组、N-ODN对照组及3种浓度的ASODN作用24、48及72h后食管癌EC9706细胞增殖和凋亡情况;采用免疫细胞化学技术及原位杂交方法检测各组EC9706细胞中PTEN蛋白、mTOR蛋白和mRNA的表达。结果:①随PTENASODN转染浓度(F3μmol/L=784.774,F6μmol/L=242.884,F12μmol/L=412.105,P均<0.001)和时间(F24h=60.676,F48h=57.703,F72h=51.841,P<0.001)的增加,食管癌EC9706细胞的增殖增强。②随PTENASODN转染浓度(F3μmol/L=36.655,F6μmol/L=47.594,F12μmol/L=85.264,P均<0.001)和时间(F24h=4.860,F48h=4.901,F72h=8.153,P<0.001)的增加,食管癌EC9706细胞的凋亡下降。③随PTENASODN转染浓度(F3μmol/L=45.634,F6μmol/L=66.399,F12μmol/L=72.763,P均<0.001)和时间(F24h=4.065,F48h=3.985,F72h=5.446,P<0.001)的增加,PTEN的蛋白表达降低;mRNA的表达也降低(F3μmol/L=23.357,F6μmol/L=43.272,F12μmol/L=51.402,P均<0.001;F24h=3.933,F48h=4.084,F72h=4.528,P<0.001)。④mTOR蛋白(F3μmol/L=19.422,F6μmol/L=30.000,F12μmol/L=62.168,P<0.001;F24h=5.340,F48h=9.150,F72h=21.056,P<0.001)和mRNA(F3μmol/L=19.414,F6μmol/L=46.571,F12μmol/L=68.634,P<0.001;F24h=4.815,F48h=12.165,F72h=7.858,P<0.001)的表达随PTENASODN转染浓度和时间的增加而增强。⑤上述各指标中均以12μmol/LASODN作用72h的效应最强(P均<0.05)。结论:PTENASODN促进食管癌EC9706细胞增殖、抑制凋亡,下调PTEN蛋白和mRNA的表达,上调mTOR蛋白和mRNA的表达。
- 亚国伟张威陈玉陈奎生
- 关键词：PTEN反义寡核苷酸MTOR凋亡EC9706细胞
- 雷帕霉素对食管癌EC1细胞mTOR表达及细胞生长与凋亡的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨雷帕霉素对人食管癌EC1细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达及细胞生长、凋亡的影响。方法:采用低、中、高浓度的雷帕霉素(100、150、200nmol/L)分别作用于EC1细胞24、48、72h,同时设溶剂对照组和空白对照组,用免疫细胞化学及原位杂交法检测EC1细胞中mTOR蛋白与mRNA的表达,MTT法检测EC1细胞的增殖情况,TUNEL法检测各组作用24h后细胞凋亡情况。结果:雷帕霉素作用24、48与72h,5组细胞mTOR蛋白与mRNA的表达差异均有统计学意义(mTOR蛋白:F=29.273、34.328、41.571,P均<0.001;mTORmRNA:F=34.969、53.614、36.943,P均<0.001),细胞生长抑制率差异亦有统计学意义(F=566.732、51.768和186.022,P均<0.001);雷帕霉素低、中、高浓度组EC1细胞mTOR蛋白与mRNA的表达均低于各对照组,且其表达随雷帕霉素浓度的增加及作用时间的延长而减弱(P<0.05)。雷帕霉素低、中、高浓度组细胞生长抑制率均高于各对照组,且随雷帕霉素浓度的增加和作用时间的延长而升高(P<0.05)。作用24h,5组细胞凋亡指数(AI)差异有统计学意义(F=524.563,P<0.001),雷帕霉素低、中、高浓度组AI均高于各对照组,且随雷帕霉素浓度的增加而增高(P<0.05)。结论:雷帕霉素可能通过抑制EC1细胞mTOR蛋白与mRNA的表达从而抑制EC1细胞的增殖,促进细胞凋亡。
- 王贵琴张威陈玉亚国伟陈奎生
- 关键词：雷帕霉素食管肿瘤MTOR凋亡
- 雷帕霉素及mTOR siRNA对食管癌EC9706细胞mTOR基因表达影响的研究
- 目的 :探讨雷帕霉素及mTOR siRNA对食管癌食管癌EC9706细胞mTOR基因的抑作用及对细胞生长、凋亡等的影响。方法 :用雷帕霉素、mTOR siRNA及顺铂分别或联合处理食管鳞癌EC9706细胞,应用免疫细胞化...
- 张威亚国伟陈玉陈奎生
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