陈啸天
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 供职机构：安徽农业大学生命科学学院更多>>
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- 茶儿茶素合成代谢中F3'5'H基因功能的研究
- 儿茶素是茶叶主要特征和功能成分之一,其中B环三羟基儿茶素约占儿茶素总量的65%以上。类类黄酮3,5-羟化酶(flavonoid 3’5’-hydroxylase,F3’5’H)是催化类黄酮B环5’羟基化反应的唯一酶系,与...
- 陈啸天赵磊李伟伟许玉娇王云生
- 关键词：酶活分析
- 茶树类黄酮3',5'-羟基化酶的基因克隆与功能研究
- 儿茶素类(catechins)为2-苯基苯并吡喃衍生化合物，属黄烷醇类化合物，主要类型包括儿茶素(catechin，C)、没食子儿茶素(gallocatechin，GC)、表儿茶素(epicatechin，EC)、表没食...
- 陈啸天
- 关键词：茶树基因克隆原核表达真核表达
- 茶树类黄酮3’,5’-羟化酶在大肠杆菌的表达和优化被引量：4
- 2012年
- 儿茶素是茶叶主要特征和功能成分之一,其中B环三羟基儿茶素约占儿茶素总量的65%以上。类黄酮3’,5’-羟化酶是类黄酮合成中B环5’羟基化的唯一酶系,与B环三羟基儿茶素合成积累密切相关。采用RACE技术,克隆了茶树类黄酮3’,5’-羟化酶基因的1 944 bp的全长序列,开放阅读框区域为55～1 587 bp,编码510个氨基酸,推测其分子量为57.1 kDa,等电点为9.06。该基因重组至pET-32a(+)表达载体上,在大肠杆菌Rosetta中进行原核表达;优化了原核表达中温度诱导条件;利用钴离子吸附柱纯化了目的蛋白。该研究为开展F3’5’H酶的反应动力学、酶的器官组织定位等研究奠定了基础。
- 陈啸天高丽萍赵磊刘亚军王云生夏涛
- 关键词：茶树RACE原核表达
- 茶树花青素还原酶基因在大肠杆菌中的表达及优化被引量：7
- 2011年
- 茶树花青素还原酶是催化非酯型儿茶素EC和EGC合成的关键酶。采用RT-PCR技术,获得了茶树花青素还原酶基因的开放阅读框,它编码含337个氨基酸的蛋白质,推测分子量为37 kD,等电点为6.54;成功地将该基因重组到表达载体pET32a(+)上,并在大肠杆菌rosetta中进行原核表达;优化了原核表达中诱导时间、诱导温度、IPTG浓度、氨苄青霉素浓度,纯化出目的蛋白。HPLC检测表明,目的蛋白具有ANR酶活性。
- 骆洋王弘雪王云生卢忠尉刘亚军单育陈啸天叶辉高丽萍夏涛
- 关键词：茶树原核表达酶活性
