郝念
- 作品数：17 被引量：51H指数：5
- 供职机构：杭州市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 脱水猪角膜基质为载体体外构建猫角膜内皮组织被引量：8
- 2004年
- 目的 :以脱水猪角膜基质为载体体外构建猫角膜内皮组织 ,并观察其形态结构 ,以寻找体外构建角膜组织最佳载体材料及方法 ,最终目的是体外构建可用于移植的角膜内皮组织。方法 :以脱水处理的猪角膜基质片为载体 ,将猫角膜内皮细胞接种于去除猪角膜内皮细胞的后弹力膜上 ,在添加了表皮生长因子和层粘连蛋白的培养液中培养 7d ,分别观察倒置显微镜下、组织学切片及扫描电镜下内皮组织的形态结构。结果 :倒置显微镜下 ,组织培养的猫角膜内皮细胞形成单层内皮组织 ,排列较规律 ,细胞间连接紧密 ;组织学观察发现 ,培养的猫角膜内皮细胞形成完整的内皮组织 ,贴附于脱水基质的后弹力膜上 ,与正常的角膜内皮组织结构相似 ;扫描电镜下 ,组织培养的猫角膜内皮细胞间连接紧密 ,细胞大小不甚一致 ,胞核清晰。结论 :以脱水猪角膜基质为载体 ,体外成功构建出猫角膜内皮组织 ,其形态结构近似于正常角膜内皮组织。
- 吴静李姝燕郝念徐锦堂赵松滨
- 关键词：内皮角膜角膜基质
- 来氟米特活性代谢物A771726抑制角膜移植免疫排斥反应的实验研究
- 目的：分析来氟米特活性代谢物A771726对角膜上皮的毒性，探讨局部应用该药物对大鼠角膜移植排斥反应的抑制作用，观察该药对体外诱导培养的大鼠骨髓来源树突状细胞分化成熟及免疫活性的影响，探讨其对角膜新生血管的抑制作用及机制...
- 郝念
- 关键词：来氟米特角膜移植免疫排斥反应
- 文献传递
- 来氟米特活性代谢物A771726抑制角膜新生血管的实验研究被引量：3
- 2008年
- 目的探讨来氟米特活性代谢物丙二酸次氮酰胺(A771726)对角膜新生血管的抑制作用及机制。方法(1)碱烧伤法制作大鼠角膜新生血管模型,40只SD大鼠随机分成A、B、C及D组,每组10只大鼠(10只眼)。空白对照组(A组)生理盐水滴眼,B、C、D组伤后分别滴用0·5%、1·0%及2·0%的A771726滴眼液,均每日4次,共28d。每日裂隙灯显微镜下观察角膜新生血管的生长情况,测量新生血管面积。(2)不同浓度A771726与体外培养的人脐静脉内皮细胞(ECV-304)共同孵育,以四唑盐比色法(MTT法)检测细胞的增生活性,激光共聚焦显微镜检测免疫荧光染色增生细胞核抗原(PCNA)的表达。结果(1)C、D组大鼠角膜新生血管面积均显著小于空白对照A组(P<0·01),而B组大鼠角膜新生血管面积与A组差异无统计学意义(P>0·05)。(2)40、80、160、320μmol/LA771726与人脐静脉内皮细胞共同孵育36h可抑制细胞增生,随浓度增加抑制作用增强,免疫荧光染色显示细胞核PCNA的表达有降低。结论A771726能通过抑制血管内皮细胞增生阻止角膜新生血管生成。
- 郝念张明昌
- 关键词：角膜新生血管人脐静脉内皮细胞激光共聚焦显微镜
- 来氟米特活性代谢物A771726对大鼠角膜移植排斥反应的影响
- 2009年
- 目的探讨来氟米特活性代谢物A771726对大鼠角膜移植排斥反应的抑制作用。方法建立SD-Wistar大鼠同种异体穿透角膜移植模型,随机分组。A组为空白对照组;B、C、D组分别为0.5%、1.0%及2.0%A771726滴眼液组;E组为Wistar大鼠自体移植对照组。术后比较各组角膜植片排斥指数(RI)及植片存活时间,并对植片进行组织学及免疫组织化学染色观察。结果A组角膜植片存活时间为(9.38±2.26)d,B组(10.13±2.41)d,C组(17.57±1.72)d,D组(17.50±2.14)d,E组(>28.00)d。A组、B组分别与C组、D组植片存活时间差异有统计学意义(P<0.01)。移植术后10d,A组、B组角膜植片发生排斥反应,植片高表达IFN-γ及ICAM-1;术后20d,C组、D组植片发生排斥反应,植片IFN-γ及ICAM-1表达增高。结论局部应用A771726滴眼液能有效抑制角膜移植排斥反应。
- 郝念张明昌边芳
- 关键词：A771726来氟米特角膜移植免疫排斥
- 异种角膜基质作为生物角膜载体的免疫学研究被引量：7
- 2006年
- 目的探讨异种(猪)角膜基质组织免疫原性,以评价其作为角膜重建载体材料的可行性。方法将新鲜、脱水2种猪角膜基质植片分别植入F344大鼠角膜基质层间,术后12d、90d抽取外周血,行抗CD25·FITC和抗CD4/CD8·PE双色免疫荧光标记,流式细胞仪测定分析。结果测得新鲜组、脱水组大鼠术后12d外周血T淋巴细胞表面抗原CD4+和CD25+、CD8+和CD25+双阳性表达率(1.53%±0.47%,2.13%±0.53%与0·57%±0.20%,0.67%±0.18%)及CD4+/CD8+比值(1.43±0.28,1.69±0.18)与同基因移植组(1.78%±0.36%,1.50±0.19)、阴性对照组(2.06%±0.52%,1.44±0.32)比较无显著性差异(P>0.05)。术后90d,新鲜组、脱水组大鼠外周血T淋巴细胞表面抗原CD4+和CD25+、CD8+和CD25+双阳性表达率(1.48%±0.39%,1.50%±0.46%与0·55%±0.15%,0·58%±0·11%)及CD4+/CD8+比值(1.43±0.51,1.36±0.59)与同基因移植组(1.32%±0·75%,1.31±0.29)、阴性对照组(1.34%±0.18%,1.44±0.42)比较,也无显著性差异(P>0.05)。结论异种(猪)角膜基质免疫原性低,是一种理想的角膜体外重建载体材料。
- 吴静郝念李姝燕徐锦堂王彦平
- 关键词：角膜基质免疫原性生物载体异种移植
- 层粘连蛋白和表皮生长因子对兔角膜内皮细胞周期的影响被引量：19
- 2004年
- 目的 观察层粘连蛋白和表皮生长因子单独及联合应用对兔角膜内皮细胞周期的影响。方法 体外培养角膜内皮细胞分为对照组、层粘连蛋白组、表皮生长因子 (EGF)组和联合应用组 ,倒置显微镜观察各组细胞形态及数目变化 ;计数 0、12、2 4、36h的各组细胞数目并绘制细胞生长曲线 ;流式细胞技术检测各组细胞周期。结果 倒置显微镜观察及细胞生长曲线显示 ,与对照组相比 ,层粘连蛋白组、EGF组和联合应用组细胞数目明显增多 ,其中联合应用组最为显著 ;细胞周期检测结果显示 ,层粘连蛋白组、EGF组和联合应用组G0～G1期细胞比例显著下降 (P <0 .0 5 ) ,G2～M期细胞比例显著提高 (P <0 .0 5 ) ;EGF组和联合应用组S期细胞比例显著提高 (P <0 .0 5 ) ;联合应用组与层粘连蛋白组相比 ,G0～G1期细胞比例显著下降 (P <0 .0 5 )。结论 层粘连蛋白和表皮生长因子单独及联合应用都可明显促进角膜内皮细胞分裂增生 ,且联合应用有协同作用。
- 李姝燕吴静郝念徐锦堂赵松滨
- 关键词：表皮生长因子层粘连蛋白角膜内皮细胞细胞周期细胞培养
- 一种巩膜外加压生物复合材料及制备方法
- 本发明提供一种巩膜外加压生物复合材料，含药用级透明质酸以葡萄糖醛酸含量计5％-40％，透光率≤98％，溶血性：不得检出，溶血链球菌：不得检出，霉菌与酵母菌总数：≤10CFU/g，机械拉伸强度＞3Mpa，撕裂强度＞5kN/...
- 张惠成胡勇平冯海黄鑫郝念
- 文献传递
- 交联透明质酸植入材料在眼科应用的生物安全性评价被引量：1
- 2013年
- 【摘要】背景透明质酸是人体细胞外基质的一种黏多糖成分，具有良好的生物相容性。化学交联合成的交联透明质酸材料提高了材料的物理特性，具有临床应用前景。目的评价交联透明质酸材料的组织相容性及生物安全性，探讨其作为眼科植入材料的可行性。方法按照《医疗器械生物学评价》（GB／T16886．5—2003）的标准自行制备交联透明质酸材料。将18只8周龄雄性新西兰白兔采用随机配对法随机分为实验组和对照组，实验组兔眼角膜基质层间植入交联透明质酸材料3个月，对照组仅制作角膜基质层间囊袋，但不植入交联透明质酸材料，术后1周、2周，1、2、3个月裂隙灯显微镜观察交联透明质酸材料的在体角膜内生物学反应，并于术后2周、1个月、3个月行术眼角膜组织病理学检查。将小鼠胚胎成纤维细胞（L929细胞）分别置于消毒的交联透明质酸薄膜6孔细胞培养板（交联透明质酸组）、医用眼科硅胶材料6孔培养板（硅胶组）和未加任何材料6孔板内（阴性对照组），细胞培养48h后倒置显微镜及扫描电子显微镜观察L929细胞形态。L929细胞与交联透明质酸材料浸提液共同培养，48h后MTT法检测培养细胞的相对增生率（RGR）。结果兔在体实验的观察期内，交联透明质酸材料与兔角膜基质愈合良好，术后兔角膜无炎症反应和新生血管；组织病理学检查见角膜基质纤维排列整齐，未发现淋巴细胞等炎性细胞浸润。体外细胞接触试验后24h，交联透明质酸组和阴性对照组培养的细胞生长良好，细胞大小均一，排列正常，而硅胶组培养细胞贴壁生长欠佳，并有悬浮的死亡细胞。L929细胞与交联透明质酸材料浸提液共同培养48h后细胞的RGR为87．50％，属于细胞毒性1级。结论交联透明质酸材料在兔角膜组织中具有良好的组织相容性和生物安全性，是一种理�
- 郝念张惠成胡勇平刘晓玲董映
- 关键词：组织相容性生物安全性细胞毒性
- 角膜体外重构异种生物载体材料植入性实验研究被引量：5
- 2005年
- 目的:分析测定异种(猪)角膜基质组织免疫原性,观察其角膜层间植入后与受体角膜愈合情况,以评价该材料生物相容性,并在此载体上体外重构角膜内皮组织,探讨其作为角膜重建载体材料可行性。方法:(1)将新鲜、脱水两种猪角膜基质植片分别植入F344大鼠角膜基质层间,术后12、90d对外周血进行CD25和CD4/CD8双色免疫荧光标记,流式细胞仪测定分析。(2)猪角膜基质植入新西兰白兔角膜层间,定期临床观察植片愈合情况,并取受体兔角膜进行组织学观察。(3)将猫角膜内皮细胞接种于保留后弹力层的脱水猪角膜基质上,加入培养液培养7d,组织学观察体外重构的角膜内皮组织形态结构。结果:(1)测得新鲜组、脱水组大鼠外周血T淋巴细胞CD4+CD25+、CD8+CD25+双阳性表达率及CD4+/CD8+比值与同基因移植组、阴性对照组比较无显著差异(P>0.05)。(2)兔眼临床观察:全部植片存活,12只术眼未见有角膜水肿混浊、角膜新生血管、排斥反应发生,新鲜植片在2个月左右已透明,脱水植片在6个月后透明。兔角膜组织学观察:新鲜植片4个月时与兔角膜基质相融愈合,脱水植片经角膜细胞再分布、胶原纤维改建重塑于8个月后与兔角膜基质相融愈合,两组植片愈合过程中未见有淋巴细胞浸润及新生血管生成。(3)体外重构的内皮组织形态结构与正常内皮层相似。结论:异种(猪)角膜基质免疫原性低,具有良好的生物相容性,是目前较为理想的角膜体外重构载体材料。
- 吴静郝念李姝燕徐锦堂王彦平
- 关键词：角膜基质生物相容性材料
- 角膜移植免疫排斥反应防治研究进展被引量：1
- 2012年
- 同种异体角膜移植是角膜病致盲患者复明的终末治疗手段,但移植术后免疫排斥反应是角膜移植失败的首要原因,尤其在高危角膜移植（新生血管、多次角膜移植及活动性炎症）免疫排斥反应高达50%以上。因此,预防角膜移植排斥反应发生是角膜移植成功的关键。本文针对角膜移植排斥反应发生机制,对目前防治角膜移植免疫排斥反应等研究热点进行综述。
- 郝念
- 关键词：移植免疫排斥反应角膜移植排斥反应术后免疫排斥反应高危角膜移植活动性炎症
