郑菲
- 作品数：21 被引量：20H指数：1
- 供职机构：北京林业大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程文化科学更多>>
- 真菌来源的多结构域酸性纤维素酶及其基因和应用
- 本发明涉及基因工程领域。具体地，本发明涉及真菌来源的多结构域酸性纤维素酶及其基因和应用，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。本发明提供了一个新的纤维素酶基因，其编码的纤维素酶具有良好的性质，...
- 姚斌罗会颖郑菲涂涛苏小运黄火清王苑柏映国王亚茹孟昆
- 新型GH5家族多结构域纤维素酶的结构与功能研究
- 2023年
- 纤维素酶能够将纤维素转化为可发酵的糖类,为丰富纤维素酶的序列与结构资源、揭示纤维素酶结构与功能之间的关系,本研究对两个新型GH5家族多结构域内切纤维素酶TlCel5和ReCel5进行了克隆表达和酶学性质测定,并对其结构域开展了突变研究。序列和结构分析显示,Tlcel5和Recel5分别编码了655个和632个氨基酸,理论分子量分别为68.3 kD和65.9 kD,均包含了CBM1区、CD区、CBMX2区和一个未知结构域,这与以往报道的多数单一结构域或双结构域纤维素酶显著不同。为了解附加结构域对酶功能的影响效果,以ReCel5为研究对象,分别构建了N端CBM1结构域的截断突变体TM1,和C端未知结构域的截断突变体TM2。酶学性质分析显示,TlCel5和ReCel5的最适作用pH和最适作用温度分别为pH 3.0、50℃和pH 4.0、70℃,在50℃和70℃下能够保持良好的稳定性,并且对多种类型的纤维素类底物、半纤维素类底物表现出水解能力。虽然突变体TM1和TM2的酶学性质较野生型没有发生显著变化,但其对羧甲基纤维素钠、大麦葡聚糖、地衣多糖的水解比活值降低了23%-68%,由此说明,在多结构域酶中,附加结构域与酶的水解能力之间存在密切关系。
- 杨俊钊张新蕊赵国柱郑菲
- 关键词：克隆表达酶学性质
- “微生物学”课程教学改革探索
- 2022年
- “微生物学”是生物专业学生的必修课程,具有内容更新快、实践性强等特点,因此对“微生物学”课程开展教学改革存在必要性。目前,“微生物学”课程的教学工作存在理论性强、教学方法陈旧、考核方式有局限性等问题。基于国家林业发展的需求,实现为社会培养合格的复合型人才的目标,在深刻总结“微生物学”课程教学过程存在问题的基础上,对“微生物学”课程进行了教学改革。具体改革措施包含以下3个方面:①课前,凝练与拓展教学内容,注重学生科研思维的建立和科研热情的培养;②课上,采用灵活多样的教学方法开展教学活动,充分发挥学生在课上的积极主动性,建立更强的师生互动关系;③课后,完善与优化评价体系,激励教师提升教学能力和水平,促进学生平衡发展。通过上述教学改革策略的实施,不仅显著改善了教师的教学效果,赋予了该课程更大的吸引力;同时,提高了学生的综合能力,深化了学生对“微生物学”基础知识的掌握程度,激发了学生对微生物前沿知识探索的热情。
- 郑菲国辉何晓青
- 关键词：微生物学教学改革教学效果
- 常压室温等离子体快速诱变绿色糖单孢菌筛选木聚糖酶高产菌株及其酶学性质研究被引量：19
- 2013年
- 【目的】利用常压室温等离子体快速诱变绿色糖单孢菌,筛选耐热耐碱木聚糖酶高产菌株,并对其进行酶学性质分析,确保其适用于生物制浆漂白工艺。【方法】采用刚果红平板水解圈法结合摇瓶发酵胞外酶测定法进行菌株筛选,并通过DNS木聚糖酶活性测定等方法对来源于不同突变株的木聚糖酶进行酶学性质分析对比。【结果】筛选出遗传稳定性良好的两株木聚糖酶高产菌株AT24和AT22-2,以麦草浆为诱导底物的粗酶液中,突变株AT24及AT22-2所产的木聚糖酶活性分别为512.74、552.70 U/mL,分别为原始菌株S.v的16和17倍的。来源于突变株AT22-2的木聚糖酶的最适反应pH为9.5,最适反应温度为90°C,在50°C 90°C温度范围内具有良好的热稳定性,在100°C条件下处理30 min剩余酶活仍为68%;突变株AT24所产木聚糖酶的最适反应温度为60°C,最适pH为10.0,在60°C 80°C的高温环境下,突变株AT24所产的木聚糖酶具有良好的热稳定性。【结论】突变株AT22-2所产具有耐碱耐高温性质的木聚糖酶,在应用领域尤其在纸浆造纸行业具有较大的潜在应用价值。
- 杨颖玉王宁金一刘伟娜王晓宇郑菲邢新会谢响明
- 关键词：木聚糖酶酶学性质分析
- 一种高催化效率纤维素酶突变体及其编码基因和应用
- 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种高催化效率纤维素酶突变体及其编码基因和应用。突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示。纤维素酶突变体比活性比母本野生型的催化效率及比活性有显著提高。可以大...
- 姚斌罗会颖郑菲王亚茹苏小运黄火清柏映国王苑马锐师霞
- 文献传递
- 一种真菌来源的耐热酸性纤维素酶及其基因和应用
- 本发明涉及基因工程领域。具体地，本发明涉及一种来源于真菌的耐热酸性纤维素酶及其基因和应用，其氨基酸序列如SEQ？ID？NO.1或SEQ？ID？NO.2所示。本发明提供了一个新的纤维素酶基因，其编码的纤维素酶具有良好的性质...
- 姚斌罗会颖郑菲王苑王亚茹黄火清石鹏君柏映国苏小运孟昆马锐
- 文献传递
- 真菌来源的膨胀素蛋白及其基因和应用
- 本发明涉及基因工程领域。具体地，本发明涉及真菌来源的膨胀素及其基因和应用，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。本发明提供了一个新的膨胀素蛋白，其具有良好的性质，可作应用于饲料、食品、医药等工...
- 姚斌罗会颖郑菲涂涛苏小运黄火清王苑柏映国王亚茹孟昆
- 文献传递
- Loop B3对GH7内切纤维素酶功能的影响机制
- 2023年
- 糖苷水解酶第七家族(GH7)包含内切和外切两类纤维素酶,其中对外切纤维素酶的研究较为成熟,但对内切纤维素酶的研究相对较少。本研究从嗜热真菌Myceliophthora thermophila的基因组中鉴定出一个新型GH7内切纤维素酶Mt Cel7b,其在60℃,pH 5.0时表现出最佳酶活力。在90℃孵育1 h后,Mt Cel7b仍能保留40%以上的活性。经过序列统计分析发现,Mt Cel7b loop B3存在长链型和短链型的进化差异,为了探究loop B3对内切纤维素酶结构和功能的影响,将MtCel7b的长链型loop B3进行截短,构建了B3^(cut)突变体。结果显示,B3^(cut)突变体在高温下的稳定性较野生型提高了约9%-44%,而其对3种纤维素底物的比活性降低了34%-74%。借助分子动力学模拟进一步分析显示,在突变体B3^(cut)中,其loop B3的截短导致催化裂隙两端的loop A3和loop B1发生了显著位移,缩小了催化口袋的空间结构,加强了催化位点周围的氢键作用网络,从而导致酶在高温下更加稳定。本研究阐明了loop B3在GH7内切纤维素酶中的重要作用,为酶分子的改良工作提供了新的参考。
- 杨俊钊张新蕊孙清扬郑菲
- 关键词：内切纤维素酶嗜热分子动力学模拟
- 一种真菌来源的耐热酸性纤维素酶及其基因和应用
- 本发明涉及基因工程领域。具体地，本发明涉及一种来源于真菌的耐热酸性纤维素酶及其基因和应用，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。本发明提供了一个新的纤维素酶基因，其编码的纤维素酶具有良好的性质...
- 姚斌罗会颖郑菲王苑王亚茹黄火清石鹏君柏映国苏小运孟昆马锐
- 文献传递
- 一种葡萄糖氧化酶CnGODA及其基因与应用
- 本发明涉及基因工程领域。具体地，本发明涉及一种葡萄糖氧化酶CnGODA及其基因与应用，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示，该葡萄糖氧化酶具有良好的性质，可作应用于饲料、食品、医药等工业。根据...
- 姚斌罗会颖郑菲涂涛苏小运黄火清王苑柏映国王亚茹孟昆
