邓瑞春
- 作品数:34 被引量:289H指数:10
- 供职机构:北京师范大学资源学院资源生态与中药资源研究所更多>>
- 发文基金:国家社会公益研究专项计划国家自然科学基金内蒙古科技厅基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学经济管理农业科学更多>>
- 免疫亲和层析法纯化重组人促红细胞生成素的实验研究被引量:5
- 2002年
- 目的 以免疫亲和层析方法纯化重组人促红细胞生成素 (rhEPO)。方法 以rhEPO作为抗原 ,免疫Balb/C小鼠 ,制备抗rhEPO单克隆抗体 (mAb)。以纯化的抗rhEPOmAb 2F12与预活化的Sepharose 4B偶联 ,制成抗体亲和层析柱 ,纯化rhEPO。结果 经筛选共获得 4株可分泌抗rhEPOmAb的杂交瘤细胞株 ,分别为 :1A8、2F12、3D4和 3F10。亲和层析纯化的rhEPO经SDS PAGE显示单一条带 ;2g凝胶制备的层析柱一次层析可获得 1.5mg高纯度的rhEPO。利用纯化的mAb建立的ELISA法 ,用于检测rhEPO的蛋白含量可达ng水平。结论 免疫亲和层析法纯化rhEPO的效率高、纯度好 ,用纯化的mAb建立的ELISA法具有灵敏度高。
- 邓瑞春张明伟白云秀汪劲松毛宁章金刚周勇
- 关键词:重组人红细胞生成素单克隆抗体酶联免疫吸附试验
- 聚合酶链反应检测4种猪源细胞系中的内源性反转录病毒(英文)被引量:10
- 2003年
- 为了建立检测猪内源性反转录病毒 (porcine endogenous retrovirus,PERV)的特异性方法 ,根据已发表的 PERV的序列 ,设计并合成了针对 PERV核心蛋白 (gag)、多聚酶 (pol)、囊膜蛋白 (env)基因的 3对引物 ,预期扩增片段分别为 36 1、15 0、2 6 5 bp。应用 PCR技术检测了 PERV在 4株猪源细胞中的整合情况。结果表明 ,在所有被检细胞的基因组中均存在有 PERV的前病毒序列 ;应用 RT- PCR检测上述 4株猪源细胞中 PERV特异性 m RNA的表达 ,结果均为阳性。试验还对建立的上述 2种方法的特异性进行了探讨 ,结果表明试验建立的 PERV检测法具有较高的特异性。该方法的建立为进一步研究 PERV奠定了基础 ,还可对异种移植动物模型及异种移植受体进行病原安全性监测。
- 吕茂民金红邓瑞春王建国杨姝熊景峰丁壮章金刚
- 关键词:聚合酶链反应检测
- 基因工程产品中CHO细胞蛋白残余量测定方法的建立被引量:2
- 1999年
- 目的: 建立简便、快速、高灵敏度的基因工程产品中CHODHFR- 细胞蛋白的检测方法。方法: 以基因工程用宿主细胞CHODHFR- 的全细胞蛋白和该细胞培养上清浓缩蛋白的混合物, 免疫家兔制备抗血清, 并用间接ELISA 测定其效价; 用Western blot 分析该抗体的特异性; 用该抗体建立直接、间接ELISA, 分别测定两种检测方法的动力学曲线、检测范围及灵敏度。结果: 抗CHODHFR- 细胞蛋白的抗血清效价为2×10- 7 , 该抗体只与CHODHFR- 细胞蛋白起反应, 不与基因工程产品EPO 起反应; 用该抗体建立的直接、间接ELISA 法检测范围较宽, 灵敏度小于1μg/L。结论: 建立了高灵敏度、高特异性、操作简单、快速, 可检测基因工程产品中CHO 细胞蛋白残余量的两种ELISA 法。
- 邓瑞春张明伟白云秀汪劲松黄英毛宁
- 关键词:ELISA促红细胞生成素贫血
- 一种菊科植物抽提物对小鼠血液生化成分的影响被引量:1
- 2004年
- 探讨一种菊科植物抽提物对小鼠血液生化成分的影响。利用半自动生化分析仪测定血液生化成分,结果表明该抽提物可降低血清白蛋白和总蛋白含量;降低乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性和丙氨酸氨基转移酶活性;对血清中尿素、尿酸、肌酐都有明显降低作用;可减少血清二价金属离子Ca2+、Mg2+含量,增加Cl-含量;对碱性磷酸酶、天冬氨酸氨基转移酶、血清无机磷影响不明显。
- 邓瑞春周勇王东平张文生徐建国尚静王旭丹葛东宇
- 关键词:菊科植物抽提物小鼠血液生化成分
- 两种不同方法纯化抗血清IgG的效果比较被引量:34
- 1999年
- 为寻找一种操作简便、效率高、纯度好的纯化抗体的方法,比较了辛酸法和离子交换葡聚糖凝胶法,通过纯化兔抗HCG抗血清和羊抗HBSAg抗血清,结果显示辛酸法纯化血清中IgG有以下优点:纯度高,用PAGE方法鉴定可显示两条带。收率高,辛酸法纯化兔抗HCGIgG,每毫升抗血清最高可得25.56mgIgG。效率高,辛酸法纯化血清中IgG的整个过程可在1d内完成。操作方法简便,不需上柱,不需昂贵仪器和试剂。适于大批量纯化,适于基层实验室推广使用。
- 邓瑞春
- 关键词:离子交换抗体IGG
- 驱虫斑鸠菊对人黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及其基因表达水平的调节作用研究被引量:2
- 2002年
- 目的:探讨驱虫斑鸠菊对人 A375黑素瘤细胞株分泌酪氨酸酶活性、黑素合成以及细胞内酪氨酸酶基因表达水平的影响。方法:采用酶学方法研究驱虫斑鸠菊对酪氨酸酶活性的影响;采用475 nm 比色法测定黑素含量;采用 TRIzol 试剂盒提取总 RNA,再用半定量逆转录聚合酶链反应扩增 cDNA,检测酪氨酸酶基因表达水平。结果:驱虫斑鸠菊可以增强 A375人黑素瘤细胞酪氨酸酶活性和黑色素合成能力,还可增强酪氨酸酶基因表达。结论:驱虫斑鸠菊可能从基因水平增强酪氨酸酶活性,促进黑素合成。
- 邓瑞春周勇章金刚徐建国尚靖于鲁海王冬平
- 关键词:驱虫斑鸠菊酪氨酸酶基因表达人黑素瘤细胞
- 全文增补中
- 柿叶乙醇提取物对大鼠高脂血症治疗作用的实验研究
- 目的:研究柿叶乙醇提取物口服液对大鼠高脂血症的治疗作用,为临床选择理想的降脂药物提供依据。方法:采用食饵性高脂血大鼠模型,以康利脂为阳性对照药,观察柿叶乙醇提取物口服液对血脂的影响。结果:柿叶乙醇提取物口服液能显著的降低...
- 邓瑞春张文生杨洪军孟繁蕴杜树山华烨孙丽平王永炎
- 关键词:柿叶降血脂作用
- 文献传递
- 几种HCG生物活性测定方法及其相关因素的比较
- 1998年
- 通过扩大实验动物用量的方法,仔细比较了三种HCG生物活性测定方法:大鼠卵巢增重法、大鼠子宫增重法、小鼠子宫增重法。结果显示,美英日三国药典和中国药典测定的HCG生物活性具有显著性差异,这种差异产生的原因是因为中国药典规定使用的稀释液中,含有对HCG生物活性具有保护作用的BSA;美英日三国药典规定使用的大鼠卵巢增重法组内组间变异系数最小,测定结果可靠性最大;对实验室常用的三种效价计算方法的可靠性进行比较显示,三者之间无显著性差异。
- 邓瑞春焦有烈
- 关键词:生物活性保护剂HCG活性测定
- A蛋白亲和层析法纯化动物血清抗体的效果比较被引量:9
- 1999年
- 比较HitrapProtein-ASepharose亲和层析系统,对不同动物血清或抗血清的纯化效率,提供抗体纯化提供依据。结果显示该方法简便快速,纯化的抗体纯度高,并能较好地保持免疫学活性。层析柱反复使用40多次,纯化效率不变。但Protein-A对不同动物血清的IgG吸附能力不同。提示,应根据动物品种,选择合适的纯化方法。
- 邓瑞春张明伟白云秀汪劲松黄英毛宁
- 关键词:A蛋白抗体血清
- 红景天甙对缺氧/缺糖损伤的SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的影响被引量:23
- 2004年
- 目的 :观察红景天甙对SH -SY5Y细胞缺氧 /缺糖损伤时细胞内 [Ca2 + ]i、细胞凋亡率、细胞线粒体膜电位和活性的变化 ,探讨其对神经细胞线粒体膜电位的影响。方法 :应用细胞培养 ,四唑盐比色实验 (MTT )检测细胞线粒体活性 ,流式细胞术检测细胞内 [Ca2 + ]i、细胞凋亡百分率和线粒体膜电位。结果 :SH -SY5Y细胞缺氧 /缺糖损伤 2、4、6、12h后 ,细胞内 [Ca2 + ]i和细胞凋亡百分率明显高于对照组 ,均有显著差异 (P <0 0 1) ;细胞经缺氧 /缺糖处理后 ,线粒体膜电位和活性明显低于对照组 ,2h时分别为 2 9 17% (P <0 0 1) ,38 80 % (P <0 0 1) ,12h时分别为5 6 72 % (P <0 0 1) ,6 3 5 8% (P <0 0 1) ;红景天甙能显著降低细胞内 [Ca2 + ]i,抑制细胞凋亡的发生 ,提高线粒体膜电位和活性 ,与缺氧 /缺糖损伤组相比均有显著差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 :红景天甙可抑制缺氧 /缺糖损伤所致的线粒体膜电位和活性的降低 ,从而具有稳定线粒体膜电位的作用 ,抑制细胞凋亡的发生 。
- 张文生朱陵群邓瑞春牛福玲田蓉
- 关键词:红景天甙SH-SY5Y细胞线粒体膜电位缺氧